Determinación según cromatografía líquida de alta resolución (Anexo VD).
Las condiciones cromatográficas y la prueba de idoneidad del sistema utilizaron gel de sílice unido a octadecilsilano como relleno; tampón de metanol-fosfato (solución de dihidrógeno fosfato de potasio de 8 mmol/L, solución de dihidrógeno fosfato de 8 mmol/L, ajuste el valor de pH del hidrógeno de potasio). solución a 5,0 ± 0,1 y prepararla nuevamente antes de usarla) (43:57) ya que la longitud de onda de detección es de 242 nm; El número de placas teóricas calculadas en base al pico de succinato sódico de hidrocortisona no debe ser inferior a 3000, y la separación entre el pico de succinato sódico de hidrocortisona y los picos adyacentes debe cumplir los requisitos.
Método de medición: Tome una cantidad adecuada del producto, péselo con precisión, agregue fase móvil para disolverla y diluya cuantitativamente para obtener una solución que contenga aproximadamente 40 μg por 1 ml, mida con precisión 20 μl e inyéctelo. en el cromatógrafo líquido y registre el cromatograma. Además, tome una cantidad adecuada de sustancia de referencia de succinato de sodio de hidrocortisona, pésela con precisión, mídala de la misma manera y calcule por el área del pico de acuerdo con el método estándar externo. Nombre del método:
Determinación del succinato de hidrocortisona sódica: cromatografía líquida de alta resolución
Ámbito de aplicación:
Este método utiliza cromatografía líquida de alta resolución Determina el contenido de hidrocortisona sódica succinato (C25H33NaO8).
Este método es adecuado para el succinato sódico de hidrocortisona.
Principio del método:
La muestra de prueba se pesa para preparar una solución de fase móvil, ingresa al cromatógrafo líquido de alto rendimiento para la separación cromatográfica y utiliza un detector de absorción ultravioleta para detectar en una longitud de onda. de 242 nm. Valor de absorción de succinato sódico de hidrocortisona, calcular su contenido.
Reactivos:
1. Metanol
2. Tampón fosfato
Instrumentos y equipos:
1. Instrumento
1.1 Cromatógrafo líquido de alto rendimiento
1.2 Columna cromatográfica
Se utiliza gel de sílice unido con octadecilsilano como relleno y el número de placas teóricas se puede calcular de acuerdo con hidrogenación El pico calculado de succinato de pino sódico no debe ser inferior a 3000.
1.3 Detector de absorción UV
2. Condiciones cromatográficas
2.1 Fase móvil: tampón fosfato de metanol=43 57
2.2 Longitud de onda de detección: 242 nm
2.3 Temperatura de la columna: temperatura ambiente
Preparación de la muestra:
1. Tampón de fosfato
Solución de dihidrogenofosfato de potasio de 8 mmol/L, ajuste el valor de pH a 5,0 ± 0,1 con una solución de dihidrógeno fosfato de potasio de 8 mmol/L y prepárelo fresco antes de usarlo
2. Pese la muestra de prueba
Pese con precisión Tome una cantidad adecuada. de muestra de este producto.
3. Preparación de la solución de referencia
Pesar con precisión una cantidad adecuada de sustancia de referencia de succinato de sodio de hidrocortisona, agregar la fase móvil para preparar una solución que contenga 40 μg por 1 ml.
4. Preparación de la solución del producto de prueba
Disolver el producto de prueba anterior en la fase móvil y diluirlo cuantitativamente para preparar una solución que contenga 40 μg por 1 ml.
Nota: "Pesaje de precisión" significa que el pesaje debe tener una precisión de una milésima parte del peso tomado. "Medición de precisión" significa que la precisión de la medición de un volumen debe cumplir con los requisitos de precisión para pipetas de ese volumen establecidos en las normas nacionales.
Pasos operativos:
Pipete con precisión 20 μL de cada una de las soluciones de referencia y de prueba anteriores, inyéctalas en el cromatógrafo líquido de alto rendimiento y utiliza un detector de absorción UV para medir la hidrogenación. a una longitud de onda de 242 nm. Valor de absorción de succinato de cortisona sódica para calcular su contenido.
Referencias:
Farmacopea de la República Popular China y la República Popular China, compilada por el Comité Nacional de Farmacopea, Chemical Industry Press, edición de 2005, Parte 2, p.404 .