Propietario, hay muchos métodos, déjame elegir algunos representativos
1. Cromatografía de afinidad: utilizando la afinidad especial y reversible entre las moléculas y sus ligandos. Una tecnología de cromatografía que separa por
Principio: Las moléculas de afinidad con estructuras especiales se convierten en adsorbentes en fase sólida y se colocan en una columna de cromatografía cuando la mezcla de proteínas se separa. Al pasar por la columna de cromatografía, se obtienen proteínas con afinidad por el adsorbente. Se adsorberán y retendrán en la columna de cromatografía. Las proteínas sin afinidad fluirán directamente porque no se adsorben, por lo que se separarán de las proteínas separadas y luego se seleccionarán. Utilice un eluyente apropiado y cambie las condiciones de unión para eluir la proteína unida. /p>
2. Filtración en gel: utilice un gel con una estructura de red de cierto tamaño como medio de cromatografía (como gel de polisacárido de glucosa, gel de agarosa, gel de poliacrilamida, etc.), según el tamaño y la forma molecular. de la sustancia separada, la velocidad de difusión en los poros del gel es diferente, por lo que se separa mediante la velocidad del método de cromatografía en columna.
Principio: método de cromatografía de filtración en gel (cromatografía de filtración en gel). También conocido como cromatografía de exclusión o método de tamiz molecular, se utiliza principalmente para separar proteínas en función de su tamaño y forma, es decir, su calidad y purificación. El empaquetamiento en la columna de cromatografía es un material de estructura de red porosa inerte, principalmente un material cruzado. material de polisacárido unido (como dextrano o agarosa), de modo que las sustancias en la mezcla de proteínas se clasifican según diferentes tamaños moleculares. Separación También llamada cromatografía de exclusión molecular. Técnica de cromatografía que utiliza perlas de gel porosas como matriz para separar proteínas. u otras mezclas moleculares según el tamaño molecular. Generalmente, las moléculas grandes fluyen primero y luego las moléculas pequeñas.
3. Electroforesis en gel de poliacrilamida: se utiliza para separar proteínas y nucleótidos de oligosacáridos. > El principio de funcionamiento de la electroforesis en gel de poliacrilamida es una red. Tiene un efecto de tamiz molecular. Tiene dos formas: (1) gel de poliacrilamida no desnaturalizante Durante el proceso de electroforesis, la proteína puede permanecer intacta y la proteína se puede determinar de acuerdo. dependiendo del peso molecular de la proteína, la forma de la proteína y su cantidad de carga unida se separa gradualmente en un gradiente
4. Salir: aumentar la concentración de sal neutra reduce la solubilidad de las proteínas. gases y moléculas sin carga. Es un método que se utiliza a menudo en la separación y purificación de proteínas. Las sales neutras de uso común incluyen sulfato de amonio, sulfato de sodio y cloruro de sodio.