1. Tinción inicial: Sujete la muestra de tinción acidorresistente con una abrazadera de montaje para recolectarla, agregue 2-3 gotas de fucsina de ácido carbólico y caliéntela lentamente a gran altura sobre una llama. Hiérvala si aparece vapor, será temporal. Si la volatilización de la solución de teñido disminuye, agregue la solución de teñido para evitar que se seque, caliéntela durante 3 a 5 minutos. con agua del grifo.
2. Desvanecimiento: desvanezca con etanol de ácido clorhídrico 3 durante 30 segundos a 1 minuto;
3. Contratinción: contrateñir con solución acuosa de melan alcalino durante 1 minuto, lavar con agua, absorber con una esponja absorbente y observar con un microscopio de aceite de cocina.
El principio de la tinción ácido-alcohol resistente
La pared celular de las micobacterias contiene una gran cantidad de lípidos, que están rodeados de peptidoglicano. Por lo tanto, las micobacterias generalmente no son fáciles de teñir y deben teñirse. ser calentado Y extender el tiempo de teñido para promover la coloración. Sin embargo, después de que el ácido micólico de las micobacterias se combina con el tinte, es difícil decolorarlo con agentes decolorantes ácidos, de ahí el nombre de tinción acidorresistente.
El método de tinción acidorresistente de Zi-Nissl consiste en combinar firmemente ácido micólico y ácido carbólico-fucsina en condiciones de calentamiento para formar un complejo, que no se decolorará incluso cuando se trate con ácido clorhídrico y alcohol. Cuando se añade una contratinción de melan alcalino, las micobacterias siguen siendo rojas, mientras que otras bacterias y sustancias del fondo son azules.