La ingeniería genética y la ingeniería celular están a la vanguardia de la biología. Las preguntas del examen de ingreso a la universidad a lo largo de los años se basarán en el conocimiento de los libros de texto de biología de la escuela secundaria y examinarán algunos temas relacionados involucrados en aplicaciones prácticas. Este es un desafío tanto para estudiantes como para profesores. Después de muchos años de práctica y pensamiento docente, el autor tiene algunas opiniones personales que me gustaría discutir con ustedes aquí.
Examen de ingreso a la Universidad de Jiangsu 2009 1 34 preguntas
1.1 Título original
Bacillus thuringiensis puede producir proteínas toxinas con capacidades insecticidas. La siguiente figura es un diagrama esquemático del proceso de cultivo de plantas transgénicas con el gen de la toxina Bt (gen de resistencia a la ampicilina). Responda las siguientes preguntas con base en la figura.
(2) ② en la figura muestra el proceso de conectar hindⅲ con Bam Hⅰ y ADN ligasa para obtener el plásmido recombinante si se reemplaza con Bst? l Utilice la digestión bamh ⅰ y el plásmido recombinante se podrá obtener después de que el gen objetivo se conecte al plásmido.
1.2 ?Respuesta original y análisis
1.2.1Respuesta original
? Las respuestas originales a esta pregunta del examen de ingreso a la universidad son 2 y 1.
? Análisis de 1.2.2
Como se muestra en la figura siguiente, después de que el fragmento del gen objetivo se digiere con Hin D ⅲ y Bam H ⅰ, ambos fragmentos se pueden digerir con Hin D ⅲ y Bam H ⅰ. Recombinar para que se puedan obtener dos plásmidos recombinantes.
Como se muestra en la siguiente figura, ¿qué pasa si cambias a Bst? l y bamh ⅰ y un fragmento obtenido por digestión enzimática, y Bst? El plásmido recombinante se puede obtener recombinando el plásmido digerido con L y Bam Hⅰⅰ.
? 1.3 ¿Dudas
? Al hacer este tipo de preguntas, ¿debería considerar la conexión inversa?
Como se puede ver en la imagen, ¿Bst? l y bamh ⅰ tienen la misma secuencia de restricción y el mismo extremo adhesivo después de la restricción. Entonces, si consideramos la conexión inversa, ¿Bst? Después de digerir el plásmido y el fragmento del gen diana con las enzimas ly bamh ⅰ, se obtuvieron dos plásmidos recombinantes ligándolos con ADN ligasa.
Sin embargo, es obvio que la respuesta original no consideraba las conexiones positivas y negativas.
? 2 ?2012 Examen de ingreso a la universidad de Jiangsu 32 preguntas
? 1.1 Título original
La Figura 1 muestra la longitud (pb es el par de bases) y la secuencia de bases parcial del fragmento de ADN que contiene el gen diana D. La Figura 2 muestra la estructura y la secuencia de bases parcial del plásmido. ¿Msp existente? Las secuencias de bases y los sitios de restricción de escisión de endonucleasa de restricción I, BAM H I, MBO I y SMA I son C↓CGG, G↓GATCC, GATTC y CCC↓GGG respectivamente. Responda las siguientes preguntas:
(4) Si el plásmido de la Figura 2 y el gen diana D se tratan con la misma enzima de restricción para formar un plásmido recombinante, ¿qué enzima de restricción se debe seleccionar? . Después de introducir el plásmido recombinante, para detectar la E. coli que contiene el plásmido recombinante, ¿qué se debe agregar generalmente? Cultura en los medios. Después de las pruebas, algunas cepas de E. coli que contienen plásmidos recombinantes no pueden expresar correctamente el gen diana D. La razón más probable es.
? 2.2 ?Respuesta y análisis original
? 2.2.1 Respuesta original
La primera respuesta vacía es "Bam H I", la segunda respuesta vacía es "Antibiótico B" y la tercera respuesta vacía es "Escindido con la misma endonucleasa de restricción". Los dos extremos son lo mismo, y algunos genes diana D están conectados al plásmido en dirección inversa".
2.2.2 Análisis
Dado que el gen diana y el vector son cortados por la misma endonucleasa de restricción, los extremos en ambos lados del gen diana y los dos extremos después del corte del El plásmido puede ser complementario. El gen puede estar vinculado al vector, lo que resulta en una expresión incorrecta del gen d.
2.3 Considere las conexiones positivas y negativas
De esta pregunta, se desprende que al realizar este tipo de preguntas de prueba, debe considerar tanto las respuestas positivas como las negativas.
3 Una pregunta común en las pruebas de ingeniería genética
3.1 Contenido de la prueba
La imagen muestra un fragmento de ADN que contiene el gen objetivo. Según la imagen, responde las siguientes preguntas:
3.2 Respuesta original
El primer espacio es "3", el segundo espacio es "2" y el tercer espacio es "6 " .
? 3.3 ?Análisis original
Las secuencias de reconocimiento de las enzimas de restricción de ECOR ⅰ y SMA ⅰ son ambas de 6 nucleótidos.
Ecor ⅰ puede reconocer la secuencia GAATTC y el extremo adhesivo escindido es -gaat TC-CTT AAG-; SMA ⅰ reconoce la secuencia CCCGGG y el extremo escindido es CCCGGG-GGG CCC. Como se muestra en la siguiente figura, el fragmento de ADN * * * tiene dos líneas tangentes Eco Rⅰ y 1 línea tangente Smaⅰ, y * * * tiene cuatro extremos pegajosos y dos extremos romos recortados.
? 3.4 Pregunta
¿Está relacionada la secuencia de la endonucleasa de restricción con la dirección de los desoxinucleótidos?
Sabemos que las dos cadenas de desoxinucleótidos que forman la molécula de ADN son antiparalelas. Si una cadena mide 5ˊ→3ˊ de izquierda a derecha, la otra cadena mide 5ˊ→3ˊ de derecha a izquierda. Entonces, cuando las endonucleasas de restricción reconocen secuencias de restricción, ¿no están restringidas por la dirección de la cadena de desoxinucleótidos?
3.5 opiniones personales
? La secuencia de bases de una molécula de ADN dada es generalmente tal que la cadena superior está en la dirección 5ˊ→3ˊ y la cadena inferior está en la dirección 3ˊ→5ˊ. Aunque los libros de texto de biología de la escuela secundaria no indican la dirección de las secuencias de digestión de las endonucleasas de restricción, de hecho, todos están acostumbrados a escribir la secuencia de reconocimiento de las endonucleasas de restricción en la dirección de 5 ˊ a 3 ˊ. La secuencia de digestión está relacionada con la dirección del desoxinucleótido. .
3.6 Análisis y respuesta correcta a esta pregunta
Como se muestra en la siguiente figura, hay 1 línea tangente Ecor I y 1 SMA I en este fragmento de ADN, * * * 2 pegajosas Se cortan los extremos y 2 extremos planos.
Entonces la respuesta correcta a esta pregunta es: el primer espacio es "2", el segundo espacio es "2" y el tercer espacio es "4".
4 ?Resumen y reflexión
La ingeniería genética se ha desarrollado rápidamente en los últimos años, y el conocimiento teórico de la ingeniería genética también mejora constantemente. Se puede decir que las preguntas del examen de ingreso a la universidad son ejercicios de alta calidad que habitualmente practicamos, pero todavía quedan preguntas. Por lo tanto, como docente debes actualizar y mejorar constantemente tu sistema de conocimientos, respetar los hechos científicos, tener espíritu de búsqueda de la verdad y, ante todo, tener una perspectiva correcta.