¿Cuál es la diferencia entre cromatografía de fase normal y cromatografía de fase reversa?

1. Diferentes fases estacionarias: el gel de sílice de fase normal tiene una superficie con grupos polares, mientras que el gel de sílice de fase inversa está modificado y tiene una cadena alquílica (como C-18) unida a la superficie. haciéndolo menos polar, por lo tanto hay menos retención de compuestos polares.

2. Los tipos de muestras aplicables son diferentes: en condiciones de fase reversa, los grupos hidroxilo en la superficie del gel de sílice se modifican para reducir su polaridad, lo que hace que su aplicabilidad sea más amplia (en comparación con la fase reversa). , varias moléculas polares grandes y pequeñas y productos naturales se pueden separar eficazmente en sistemas de fase inversa.

3. Diferentes fases móviles: cromatografía en fase normal Debido a que los grupos silanol en la superficie del gel de sílice son altamente polares, los compuestos solubles en agua altamente polares son difíciles de eluir. usado. En la cromatografía de fase inversa, debido a que la adsorción de compuestos polares y la fase estacionaria es pequeña, se puede usar un solvente menos polar para lograr un efecto de elución más ideal.

Información ampliada:

Notas:

Evite cambios bruscos de presión y temperatura: los cambios bruscos de temperatura o dejar caer la columna desde un lugar alto afectará el contenido de La columna. Dependiendo de la condición de llenado, un aumento o disminución repentino en la presión de la columna también afectará el empaque en la columna. Por lo tanto, el caudal debe ajustarse lentamente y la rotación de la válvula no debe ser demasiado lenta durante la inyección de la válvula.

No cambie la composición del disolvente directamente: Al cambiar la composición del disolvente, se debe cambiar de forma gradual y lenta, especialmente en cromatografía de fase reversa, no se debe cambiar directamente de disolventes orgánicos a agua. o viceversa.

Está prohibido el retrolavado: En términos generales, las columnas cromatográficas no se pueden retrolavar. Sólo cuando el fabricante especifica que la columna se puede retrolavar se pueden eliminar las impurezas que quedan en el cabezal de la columna. De lo contrario, el retrolavado reducirá rápidamente la eficiencia de la columna.

Enciclopedia Baidu-Cromatografía de fase normal

Enciclopedia Baidu-Cromatografía de fase inversa