1. Puesta en marcha:
1. Encienda la computadora;
2. Encienda cada módulo del cromatógrafo de líquidos; >
3. Haga doble clic en "LC1260 (Online)" en el escritorio para ingresar a la interfaz en línea;
2. Escape:
1. la bomba (gire en sentido contrario a las agujas del reloj durante aproximadamente 1 vuelta)
2. Haga clic con el botón derecho en el área del icono "Bomba", seleccione la opción "Método", ingrese a la pantalla de edición de la bomba, configure el caudal: 5 ml/min. y haga clic en "Aceptar";
3. Haga clic con el botón derecho en el área del icono "Bomba", haga clic en la opción "Control", seleccione "ON" y haga clic en "Aceptar". hasta que no haya burbujas en la tubería (desde la botella de disolvente hasta la entrada de la bomba (generalmente 5 minutos), cambie de canal y continúe enjuagando hasta que todos los canales a utilizar
estén libres de burbujas;
p>4. Haga clic con el botón derecho en el icono "Bomba" y haga clic en la opción "Método", configure el caudal: 0 ml/min, apriete manualmente la válvula de descarga.
5. el icono "Bomba", haga clic en la opción "Método", seleccione la proporción adecuada de fase móvil según los requisitos del método, establezca el caudal: 1,0 ml/min (no necesariamente 1);
6; De la misma manera, haga clic derecho en el ícono "Column Comp", "DAD", haga clic en la opción "Método" y siga:
7. haga clic en la opción "Control" y en "ON" para encender el horno de columna y el detector;
3. Editar método:
1. Haga clic en "Método" - "Editar método completo". para comenzar a editar el método completo;
2. Seleccione tres elementos excepto "Análisis de datos", ingrese a la siguiente pestaña, seleccione "Als" (inyección automática), haga clic en "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción; /p>
3. Seleccione la opción "Información del método" en el menú "Método" y agregue información del método (como:
¡Esto es para prueba!), seleccione "Aceptar" e ingrese el siguiente opción;
4. Configuración de parámetros de la bomba: haga clic con el botón derecho en el icono "Bomba", haga clic en la opción "Método" y configure el "Flujo": como 1,0 ml/min; "¿Detener?" ?
Tiempo": como 10 minutos (el tiempo de parada es solo el tiempo necesario para hacer una muestra), seleccione la proporción adecuada de fase móvil según los requisitos
Comparar, seleccione "Aceptar" e ingrese la siguiente opción;
5. Configuración automática de parámetros del muestreador: haga clic con el botón derecho en el icono "Muestreador", haga clic en la opción "Método" y seleccione "Volumen de inyección", ingrese el volumen de inyección, seleccione "Aceptar" e ingrese la siguiente opción;
6. Configuración de parámetros del horno de columna: haga clic con el botón derecho en "Comp. de columna" y haga clic en la opción "Método", configure la temperatura "Izquierda" (temperatura configurable). rango: 10 ℃ -80 ℃ por debajo de la temperatura ambiente), generalmente las temperaturas "izquierda" y "derecha" son las mismas, seleccione "Combinado" para unir Simplemente haga clic en "¿Detener?
Hora" y seleccione "Como Bomba/Inyector", seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
7. Configuración de parámetros del detector UV: haga clic derecho en "DAD", haga clic en la opción "¿Método?" e ingrese la longitud de onda de detección requerida en el espacio en blanco a continuación (puede seleccionar varias longitudes de onda según sea necesario, se pueden seleccionar hasta 8 longitudes de onda "Seleccione "Como bomba/inyector" "Espectro";
——Debajo del Opción "Tienda", seleccione según sea necesario
"Ninguno" o "Todos (escaneo de longitud de onda completa)" y otras opciones, seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
8. Después de editar el método, haga clic en "Método" En el menú, seleccione " Guardar método como", ingrese un nombre de método, seleccione "Aceptar" y guarde el método
con éxito.
9. Inyección con una sola aguja
10. Desde el menú "Ejecutar control", seleccione la opción "Información de muestra" e ingrese el "Nombre del operador" en "Archivo de datos"; /p>
Seleccione "Ruta" y "Prefijo/Contador (nombramiento de archivos)" para configurar "Prefijo (generalmente establecido en año, mes, día)" y "Contador" ingrese "Ubicación (muestra) Posición)"; "Nombre de la muestra", seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
11. Después de que la línea base esté estable, seleccione la opción "Ejecutar método" en "Ejecutar control" para iniciar la inyección.
4. Inyección de secuencia:
1. Seleccione la opción "Tabla de secuencia" en el menú "Secuencia" y seleccione las opciones requeridas en la "Tabla de configuración", generalmente
p>es "Vial (frasco de muestra)", "Nombre de muestra (nombre de muestra)", "Nombre de método (nombre de método)", "Inj/Vial (número de inyecciones
número)" , "Tipo de muestra (tipo de muestra)", "Archivo de datos (nombre de archivo)" y "Volumen de inyección (volumen de inyección)";
2. Haga clic en "Insertar" para generar una fila, establezca los parámetros anteriores. seleccione la fila y haga clic en Modificar los parámetros correspondientes después de copiar "Copiar" y "Pegar", es decir,
generar una lista de secuencia, seleccione "Aceptar" para ingresar a la siguiente opción;
3. Haga clic en la opción "Parámetros de secuencia" del menú "Secuencia", seleccione la "Ruta" de los datos de la secuencia (la secuencia se generará automáticamente
Guarde los datos en una carpeta llamada "Nombre de la secuencia"). -Hora"). Se recomienda seleccionar "Prefijo/Contador" para guardar los datos. ;
Seleccione "Comando/Macro posterior a la secuencia" en la opción "Apagar" y seleccione "PUMPALL OFF ( apague la bomba después de que termine la secuencia
)" según sea necesario. "LAMPALL OFF ( "Apague la lámpara UV después de que termine la secuencia)"" "STANDBY (Apague la lámpara UV
y bombee después de finalizar la secuencia)", seleccione "Aceptar" e ingrese la siguiente opción; (Nota: si el valor predeterminado se guarda en "Ruta" en la unidad C, puede hacer clic en "Ver", seleccionar "Preferencias ", y agregue las correspondientes rutas de guardado de "SequenceTemplates", "Data" y "Master Methods" según sea necesario)
4. En el menú "Sequence", seleccione "Guardar plantilla de secuencia como", ingrese una secuencia nombre y seleccione "Aceptar";
5. Después de que la línea base esté estable, seleccione "Ejecutar secuencia" en la opción "Ejecutar control" para iniciar la inyección secuencial.
(Nota: si la ejecución se detiene a mitad de camino, seleccione "Detener ejecución/Inyectar/Secuencia" en "Control de ejecución" para conservar la información del gráfico. Si
selecciona Abortar, todo se pierde la información del espectro)
5. Análisis de datos (uso sin conexión):
1 Haga doble clic en el icono "LC1260 (sin conexión)" para ingresar a la pantalla sin conexión.
2. Desde el menú "Ver", haga clic en "Análisis de datos" para ingresar a la pantalla de análisis de datos.
3 Seleccione "Cargar señal" en el menú "Archivo", seleccione el nombre del archivo de datos requerido. y haga clic en "Aceptar", se recuperan los datos.
4. Optimización del espectro: Seleccione "Opciones de señal" en el menú "Gráficos". Seleccione rangos completos o de uso del rango Seleccione
el rango de tiempo y el rango de respuesta deseados, seleccione Aceptar, seleccione Eventos de integración, ajuste "Rechazo de área" y "Rechazo de altura" para eliminar picos no deseados; Establecer integración" para eliminar selectivamente integraciones innecesarias
Si desea eliminar Para operar, seleccione el quinto icono de la izquierda en la fila superior de "Método Eventos manuales" para realizar la operación de eliminación. Haga clic en Icono "√" a la izquierda para guardar los parámetros de integración en el método y salir de "Eventos de integración".
(Nota: el icono "Establecer integración")
6. Dibujo de curva estándar:
1. Seleccione "Nueva tabla de calibración" en "Calibración". ", seleccione "Nivel (es decir, el punto correspondiente a
en la marca, el primer punto es 1)" y "Cantidad Defanlt (concentración del punto correspondiente del estándar)" en "Automático Configuración", seleccione "Aceptar";
2. Agregue cada parámetro de punto en secuencia seleccionando la opción "Agregar nivel" en el menú "Calibración". Si es el método estándar externo, en "ISTD "elemento
Seleccione "NO", si es la norma estándar interna, seleccione "Sí"; los números correspondientes a la norma y a la norma interna bajo el elemento "#" deben estar unificados; si desea para cambiar los puntos correspondientes en la curva estándar
;
3 Seleccione la opción "Modo" del elemento "Recalibrar" en el menú "Calibración" significa. tomando el promedio del punto actual y el punto correspondiente en el punto de referencia
El valor reemplaza el punto correspondiente original en la canción estándar. Si se selecciona "Reemplazar", significa que el punto actual reemplaza el punto correspondiente. en la canción estándar;
(Nota: Cómo modificar la unidad de concentración en "Cantidad predeterminada": seleccione "Calibración" En "Configuración de calibración", modifique
"Unidades de cantidad" y establezca la unidad de concentración, seleccione "Configuración de calibración" en "Calibración", modifique "¿Predeterminado?
Curva de calibración", seleccione el tipo de curva apropiado, si pasa el origen y la gravedad específica de cada uno; apunte a la curva estándar:
Peso, generalmente seleccione Igual)
4. Acceda al espectro de la muestra, haga clic en el pico cromatográfico cuya concentración debe calcularse y seleccione "Especificar informe". " en el menú "Informe", seleccione "Estilo de informe" como "Detalle", haga clic en "Aceptar" y seleccione el icono "Vista previa de impresión". Los resultados del cálculo se pueden reflejar en el informe.
7. Configuración de superposición de espectro:
1. Seleccione la opción "Superponer señal" en el menú "Archivo" y seleccione cualquier espectro que deba superponerse
<. p>2 En la opción "Señal", seleccione el icono "Superposición de señal 3D" (el cuarto icono de la izquierda justo encima del mapa) y ajuste el tiempo y la altura de entrelazado en el cuadro de diálogo "Ajustar opciones de superposición de señal" que aparece. arriba; Para eliminar espectros superpuestos, haga clic en el sexto icono del gráfico
.
8. Cálculo de la relación señal-ruido y otros parámetros:
1 Seleccione la opción "Editar rango de ruido" en el elemento "Idoneidad del sistema" en el "Informe". menú y establezca el rango de tiempo (Más de
1 minuto
2. Seleccione "Especificar informe" en el menú "Informe", seleccione "Estilo de informe" como "Ruido de rendimiento" y haga clic en
Después de hacer clic en "Aceptar", podrá obtener una vista previa de los parámetros de relación señal-ruido;
3. Seleccione "Especificar informe" en el menú "Informe", seleccione "Estilo de informe" como "Rendimiento extendido" y haga clic en
Después de hacer clic en "Aceptar", puede obtener una vista previa de todos los parámetros, como la simetría y los factores de cola.
9. Detectar picos cuando el programa se está ejecutando:
Seleccione la opción "Instantánea" en el menú "Archivo".
10. Imprima el informe:
1. Seleccione "Modo de informe" en el menú "Informe" y seleccione "Usar informes clásicos"
2. Desde Seleccione "Imprimir informe" en el menú "Informe" y se imprimirán los resultados del informe.
11. Apagar:
1. Después de limpiar la columna y el sistema, salga de ChemStation y otras ventanas y apague la computadora. abajo Agilent 1260 Interruptor de alimentación para cada módulo.
Información ampliada
Definición: La cromatografía líquida es un tipo de tecnología de separación y análisis, que se caracteriza por utilizar líquido como fase móvil, y la fase estacionaria puede tener muchas formas. como
Papel, sábanas y camas empaquetadas, etc. En proceso de desarrollo de la tecnología de cromatografía. Para distinguir los distintos métodos, se ha desarrollado la nomenclatura respectiva según la forma de la fase estacionaria, como cromatografía en papel, cromatografía en capa fina y cromatografía líquida en columna.
Principio básico: Cuando se utiliza cromatografía líquida de alta resolución, el líquido a detectar se inyecta en la columna cromatográfica y se mueve en fase estacionaria a través de la presión debido a la interacción entre diferentes sustancias y la fase estacionaria. las especies que se miden,
Diferentes interacciones, diferentes sustancias abandonan la columna cromatográfica secuencialmente y obtienen diferentes señales de pico a través del detector. Finalmente, las sustancias contenidas en el analito se determinan analizando y comparando estas señales. La cromatografía líquida de alta resolución, como método analítico importante, se utiliza ampliamente en análisis químicos y bioquímicos. En principio, la cromatografía líquida de alta resolución no se diferencia esencialmente de la cromatografía líquida clásica. Se caracteriza por el uso de una bomba de infusión de alta presión, un detector de alta sensibilidad y una fase estacionaria de partículas de alta eficiencia, que es adecuada para. p>
p>
Analizar compuestos orgánicos con altos puntos de ebullición que no son fácilmente volátiles, grandes pesos moleculares y diferentes polaridades.
El sistema de cromatografía líquida de alta resolución consta principalmente de una botella de almacenamiento de fase móvil, una bomba de infusión, un muestreador, una columna cromatográfica, un detector y un registrador de su composición general.
Es similar a la de una cromatografía en fase gaseosa, pero con muchos ajustes realizados para tener en cuenta el hecho de que la fase móvil es líquida. La bomba de infusión de cromatografía líquida de alto rendimiento requiere un volumen de infusión constante y estable, y el sistema de muestreo requiere una inyección de muestra conveniente y una conmutación estricta. Al mismo tiempo, dado que la viscosidad de la fase móvil líquida es mucho mayor que la del gas, para reducir la presión de la columna, las columnas de HPLC son generalmente más gruesas y mucho más cortas que las columnas de cromatografía de gases.
Referencia: Enciclopedia Baidu-Cromatografía líquida