Los pasos principales son los siguientes:
1. Principio de construcción del vector: la construcción del vector se refiere a la introducción de fragmentos de ADN exógeno en un vector específico para entregarlo a las células objetivo. Los vectores más utilizados son los plásmidos, que tienen la capacidad de replicarse y transmitirse de forma autónoma. Los plásmidos están compuestos de múltiples regiones funcionales, incluidos iniciadores, genes marcadores seleccionables, múltiples sitios de clonación, etc. Las regiones pueden usarse para insertar y manipular ADN extraño.
2. Método de construcción de vectores: conectar fragmentos de ADN exógenos a plásmidos linealizados para formar plásmidos recombinantes. Utilice métodos de transformación apropiados para transformar el plásmido construido en células objetivo para que pueda ingresar a las células. Seleccione células transformadas con éxito mediante métodos de detección apropiados, como medios selectivos o expresión de genes marcadores, y confirme el éxito de la construcción del vector identificando la presencia de plásmidos y ADN exógeno en las células transformadas. A través de este paso, se puede completar el proceso de construcción del vector, se puede introducir ADN exógeno en las células objetivo y se pueden lograr fines de investigación como la ingeniería genética y la modificación genética.