Diseñe un plan experimental para eliminar del suelo el Bacillus subtilis productor de amilasa y realice un mejoramiento por mutaciones para seleccionar cepas mutantes de alto rendimiento.

1. Muestreo

Lo mejor es elegir suelo rico en almidón y tomar muestras de otros lugares.

2. Disolución en agua pura

3. Tratamiento a alta temperatura

La muestra se trata a una temperatura alta de 60 grados durante 65,438 ± 0 horas para matar los microbios. nutrientes y deja esporas.

4. Preparar el medio de cultivo

El medio de cultivo se prepara con almidón. Los gramos específicos están al final del libro para facilitar la esterilización. (Yodo)

5. Diluir T-cross

Utilice un tubo en T para diluir la muestra disuelta.

6. Injerto

Inocular la muestra en el medio de cultivo según los métodos de recubrimiento, vertido y estriado del libro.

7. Cultivo

2~3 días

8. Detección y purificación preliminares

Seleccione colonias individuales con zonas de degradación y Purifique 3. veces en placas y almacenar en posición inclinada a 4°C. Reconstruir el cultivo

7. Volver a realizar el cribado

Mida la actividad de amilasa y finalmente identifique la cepa mutante.

9. Cambios

Para seleccionar una fuente de mutagénesis adecuada, se puede utilizar un método de mutagénesis compuesta que combine mutagénesis física y mutagénesis química.

10. Cribado

La identificación de mutaciones se realiza mediante esquemas de cribado primario y secundario.

11. Identificación de la estabilidad genética

Después de múltiples pases, se debe identificar más a fondo si la capacidad de la cepa analizada para producir amilasa ha cambiado. Si se produce una reversión, es necesario repetir el proceso de detección de mutaciones hasta que se seleccione una cepa genéticamente estable y de alto rendimiento.

Este es el framework, ¡mira si te ayuda! !