Los métodos de análisis cromatográfico se dividen en cromatografía en columna, cromatografía en capa fina, cromatografía líquida, cromatografía de gases y cromatografía de fluidos supercríticos.
La cromatografía, también conocida como cromatografía, cromatografía y cromatografía, es un método de separación y análisis muy utilizado en química analítica, química orgánica, bioquímica y otros campos. Los métodos de cromatografía comunes incluyen principalmente: cromatografía en columna, cromatografía en capa fina, cromatografía líquida, cromatografía de gases y cromatografía de fluidos supercríticos.
1. Cromatografía en columna
El método de cromatografía original, este método inyecta la fase estacionaria en un tubo de vidrio con algodón o papel de filtro tapado en el extremo inferior y esparce el polvo de la fase estacionaria. saturado con la muestra. Colóquelo en la parte superior del tubo de vidrio y eluya con la fase móvil.
Existen dos métodos de elución comunes: uno es la elución de arriba hacia abajo que depende de la gravedad del propio disolvente y el otro es la elución de abajo hacia arriba que depende de la acción capilar.
También existen dos métodos diferentes para recolectar los componentes puros después de la separación: un método consiste en aceptar directamente la solución que sale al final de la columna y el otro método consiste en secar la fase estacionaria y separar mecánicamente. cada color, remoje la fase estacionaria en un solvente adecuado para extraer las moléculas componentes. La cromatografía en columna se usa ampliamente en la separación de mezclas, incluida la separación de productos sintéticos orgánicos, extractos naturales y macromoléculas biológicas.
2. Cromatografía en capa fina
Un método de cromatografía muy utilizado. Este método de cromatografía recubre la fase estacionaria sobre una lámina de metal o vidrio para formar una capa delgada, utilizando un tubo capilar y. O use otras herramientas para detectar la muestra en un extremo de la placa delgada y luego sumerja el extremo de la mancha en la fase móvil, confiando en la acción capilar para hacer que el solvente de la fase móvil se extienda por la muestra a lo largo de la placa delgada. La cromatografía de capa fina es económica y sencilla de utilizar, y se utiliza para realizar pruebas aproximadas de muestras y detectar el progreso de reacciones de síntesis orgánica.
3. Cromatografía Líquida (HPLC)
Actualmente se utilizan muchos métodos de análisis cromatográficos. El sistema de cromatografía líquida consta de una botella de almacenamiento en fase móvil, una bomba de infusión, un muestreador. La composición general de una columna cromatográfica, un detector y un registrador es similar a la de un cromatógrafo de gases, pero se han realizado muchos ajustes para tener en cuenta el hecho de que la fase móvil es un líquido.
La bomba de infusión HPLC requiere un volumen de infusión estable y equilibrado; el sistema de muestreo requiere una inyección conveniente y una conmutación ajustada ya que la viscosidad de la fase móvil líquida es mucho menor que la del gas, para reducir la columna; Las columnas de cromatografía líquida a presión son generalmente gruesas y mucho más cortas que una columna de cromatografía de gases. La HPLC se utiliza ampliamente en casi todos los campos del análisis cuantitativo y cualitativo.
4. Cromatografía de gases
La cromatografía de gases utiliza gases como helio o argón como gas portador (llamado fase móvil) e inyecta la muestra de la mezcla en una muestra llena de relleno (llamada fase estacionaria), un método de separación mediante una columna cromatográfica. El detector convierte los componentes separados en señales eléctricas y los registra con un registrador.
5. Cromatografía de fluidos supercríticos
La cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) utiliza fluido supercrítico como fase móvil y se basa en la capacidad de solvatación de la fase móvil para la separación, el proceso cromatográfico de. El análisis es una nueva tecnología desarrollada y perfeccionada en la década de 1980.
La cromatografía de fluidos supercríticos tiene las características tanto de la cromatografía de gases como de la cromatografía líquida. No solo puede analizar muestras de alto punto de ebullición y baja volatilidad para las que la cromatografía de gases no es adecuada, sino que también tiene una velocidad y condiciones de análisis más rápidas que la cromatografía líquida. La temperatura de funcionamiento está determinada principalmente por el fluido seleccionado. Los fluidos comúnmente utilizados incluyen dióxido de carbono y óxido nitroso.
El fluido supercrítico es fácil de controlar y ajustar. Puede convertirse en gas, líquido o mantener su estado de fluido supercrítico antes de ingresar al detector. Por lo tanto, se puede conectar a cualquier detector en fase líquida o gaseosa existente. Se puede combinar con varios tipos de detectores, ampliando su alcance de aplicación y capacidades de clasificación, y tiene una amplia gama de opciones en aspectos cualitativos y cuantitativos.