Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se refieren a una cierta cantidad de sangre extraída para completar uno o más elementos de la prueba de química clínica, incluida la anticoagulación y la no anticoagulación.
En segundo lugar, el uso de muestras de sangre
(1) Toma de partes
1. Extracción de sangre venosa: el método de extracción de sangre más utilizado. Las venas más utilizadas son la vena antecubital y la vena dorsal del carpo, y la vena yugular y la vena bregma a veces se utilizan en niños y recién nacidos.
2. Extracción de sangre arterial: utilizada principalmente para análisis de gases en sangre. Las arterias comunes incluyen la arteria femoral, la arteria braquial, la arteria radial y la arteria umbilical.
3. Extracción de sangre capilar: adecuada para experimentos o para bebés que solo requieren una pequeña cantidad de sangre. Los sitios comunes son los lóbulos de las orejas y las yemas de los dedos y, a veces, el dedo gordo y el talón en los niños. La aguja de extracción de sangre debe penetrar la piel hasta una profundidad de 2 mm. 2,5 mm), no debe haber inflamación, edema, etc. en la zona de la sangre.
(2) Tipos de muestras
Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se dividen en suero, plasma y sangre completa. No existe diferencia en la mayoría de los componentes químicos entre el suero y el plasma comúnmente utilizados en la práctica clínica, excepto que el primero no contiene fibrinógeno. La sangre completa se utiliza sólo cuando la composición de los glóbulos rojos es similar a la del plasma; la sangre completa se utiliza para análisis de gases en sangre y electroforesis de hemoglobina, pero no para análisis de química clínica general.
3. La sangre entera se considera suero o plasma.
Las muestras de sangre deben recolectarse lo antes posible para permitir la separación natural del suero (plasma) de la sangre completa en contacto con las células sanguíneas. Generalmente, el suero o el plasma deben separarse dentro de las 2 horas posteriores a la extracción de sangre. El procesamiento de sangre total se divide en tres etapas: antes de la centrifugación, durante la centrifugación y después de la centrifugación. Cada etapa tiene requisitos específicos.
(1) Etapa de precentrifugación
Es decir, un periodo de tiempo previo a la recogida y centrifugación de los libros índice.
1. Suero: Generalmente, se debe dejar que la muestra se aglutine por sí sola antes de la centrifugación, y los coágulos de sangre no se pueden despegar con un palo de madera. Por lo general, las muestras de sangre se pueden aglutinar de forma completamente espontánea cuando se colocan a temperatura ambiente (22 ~ 25 °C) durante 30 ~ 60 minutos. La reacción de aglutinación de las muestras refrigeradas es lenta y la adición de un coagulante acelerará la aglutinación (después de recolectar la muestra, se debe invertir suavemente y agitar de 5 a 10 veces para asegurar el efecto del coagulante).
2. Plasma: Cuando se necesitan muestras de plasma, se deben usar tubos de recolección de muestras de sangre que contengan anticoagulantes. Inmediatamente después de la recolección de sangre, los tubos de recolección de sangre se deben invertir y mezclar suavemente de 5 a 10 veces (para garantizar que). los anticoagulantes son eficaces). El plasma se puede separar después de 5 a 10 minutos.
3. Refrigeración de la muestra: la refrigeración de la muestra puede inhibir el metabolismo celular y estabilizar algunos componentes que dependen de la temperatura, pero las muestras de sangre completa generalmente no pueden refrigerarse; el tiempo de refrigeración de las muestras utilizadas para medir el potasio sérico no debe exceder las 2 horas; . Las pruebas de catecolaminas en sangre, pH/gases en sangre, amoníaco, lactato, piruvato, gastrina y hormona tiroidea requieren muestras congeladas.
Cuando las muestras deben refrigerarse (2 ~ 8 ℃), se deben colocar en cubitos de hielo o en una mezcla de agua helada inmediatamente después de sacarlas (no se permiten cubitos de hielo grandes). estar en pleno contacto con el refrigerante para evitar Asegúrese de que el refrigerante alcance la altura de la muestra.
4. Inhibidores del metabolismo y conservantes: Algunos aditivos pueden inhibir el metabolismo celular y prevenir cambios en la concentración del analito cuando se almacenan muestras de sangre. Al medir el azúcar en sangre, si se agrega fluoruro de sodio a la sangre, la glucosa puede permanecer estable durante 24 horas a 22 ~ 25 ℃ y 48 horas a 2 ~ 8 ℃ sin separar las células sanguíneas. Sin embargo, debido al alto hematocrito de recién nacidos y niños, es difícil controlar la glucólisis celular con fluoruro de sodio. El conservante anticoagulante formaldehído-oxalato de potasio no es adecuado para la determinación de glucosa en sangre; la mezcla de fluoruro de sodio y timol no es adecuada para la determinación enzimática porque inhibe la actividad enzimática.
5. Lugar de recolección de muestras: (1) Las muestras deben enviarse al laboratorio lo antes posible después de la recolección, especialmente cuando la temperatura en el área de recolección excede los 22 °C. (2) Después de tomar las muestras de sangre; recolectados, los vasos sanguíneos y las aberturas de los tubos deben taparse. Colóquelo verticalmente hacia arriba para reducir la vibración del contenido del tubo, promover la solidificación completa y evitar la evaporación, la contaminación y las salpicaduras de la muestra. (3) Las muestras de sangre recolectadas deben manipularse con cuidado para evitar que la hemólisis causada por el balanceo del tubo de muestra afecte los resultados de la medición;
Los elementos que tienen un impacto grave (aumento del rendimiento) incluyen: lactato deshidrogenasa, aspartato aminotransferasa sérica, potasio sérico y hemoglobina; los elementos que tienen un impacto significativo incluyen: hierro sérico (?), alanina aminotransferasa sérica (?) y tiroxina sérica (? ); levemente afectados (aumentados) son: proteína total, albúmina, fósforo sérico, magnesio sérico, calcio sérico, fosfatasa ácida (4) Exposición de analitos sensibles a la luz a luz artificial o bajo luz solar (ultravioleta); ¿Como VA, VB6? -Al medir caroteno, porfirina, bilirrubina, etc. , el tubo de muestra debe envolverse en papel de aluminio o material similar para protegerlo.
6. Transporte de muestras: Las muestras de sangre completa deben transportarse desde el punto de recolección de sangre al laboratorio lo antes posible. Si la distancia de transporte es larga, especialmente porque se ve afectada la estabilidad del analito, el suero o plasma se puede separar en el punto de extracción de sangre y enviarse al laboratorio si es necesario; se debe prestar atención al embalaje, los requisitos de temperatura y los métodos de manipulación; etc. Estabilidad de la muestra durante el transporte para garantizar la estabilidad de los componentes analizados durante el transporte, el tubo de muestra debe mantenerse cerrado y colocado verticalmente hacia arriba;
7. Aceptación de muestras de laboratorio y preparación para la centrifugación: (1) Mantenga registros de aceptación de muestras (verifique la lista cuidadosamente durante la inspección, registre cuidadosamente la información relevante y firme la aceptación y el procesamiento de las muestras); las muestras deben clasificarse y prepararse para la centrifugación; (3) Después de que el laboratorio acepte la muestra, el tubo de la muestra aún debe mantenerse sellado, con la boca del tubo hacia arriba y colocado verticalmente. Después de retirar el tapón, la pérdida de CO2 en la sangre hará que el valor del pH aumente y que el calcio ionizado y la fosfatasa ácida disminuyan. En particular, el cambio en el valor del pH afectará la precisión de algunos resultados de la prueba. (4) El tiempo de coagulación de la muestra debe ser suficiente; las muestras de sangre que contengan anticoagulantes se pueden centrifugar inmediatamente; las muestras que contengan coagulantes se pueden centrifugar entre 5 y 15 minutos después de la extracción de muestras de sangre entera anticoagulada (para la determinación de zinc y litio); , protoporfirina, etc.) no se pueden centrifugar; (5) Las muestras refrigeradas (2 ~ 8°C) deben mantenerse a esta temperatura hasta que estén listas para la centrifugación. Se recomienda utilizar una centrífuga con temperatura controlada; (6) Antes de la centrifugación, no se recomienda utilizar pequeños palos de madera o equipos similares para despegar los coágulos adheridos a las paredes y tapones del tubo de ensayo. El pelado manual puede inducir hemólisis. Si necesitas exponer la pared del tubo de ensayo o quitar el tapón, debes tener mucho cuidado y hacerlo con cuidado.
(2) Etapa de centrifugación
Es decir, el indicador ha estado colocado en la centrífuga durante un periodo de tiempo.
1. Tiempo de centrifugación y fuerza centrífuga relativa (RCF): al centrifugar muestras de sangre en análisis de química clínica, ¿cuál es la RCF (1000 ~ 1200)? g, el tiempo de centrifugación es de 5 ~ 65438 ± 00 min.
2. Centrifugación con temperatura controlada: el calor generado durante el proceso de centrifugación no favorece la estabilidad de los analitos. Se debe utilizar una centrífuga con temperatura controlada al centrifugar muestras de sangre para análisis químicos clínicos. Algunos analitos que dependen de la temperatura (como la hormona adrenocorticotrópica, el AMP cíclico, las catecolaminas, etc.) deben separarse a 4 °C; para los analitos sin requisitos especiales de temperatura, la temperatura de centrifugación debe establecerse entre 20 °C y 22 °C; la temperatura es baja El valor medido del potasio sérico se puede aumentar artificialmente a 65438 ± 05 ℃; las muestras transportadas en condiciones refrigeradas deben centrifugarse a la temperatura requerida.
3. Centrifugar nuevamente: Es mejor centrifugar la muestra una vez. Si es necesario volver a centrifugar, el intervalo de tiempo desde la última centrifugación no debe centrifugarse. de nuevo.
(3) Etapa post-centrifugación
Se refiere al periodo de tiempo posterior a la centrifugación y antes de extraer una determinada cantidad de suero o plasma para su detección.
1. La separación del suero o plasma de las células sanguíneas y coágulos sanguíneos debe completarse lo antes posible (dentro de las 2 horas) después de la extracción de sangre.
2. Almacenamiento del suero o plasma separado: La temperatura ambiente del laboratorio y la temperatura y tiempo de almacenamiento del suero o plasma son parámetros importantes para la estabilidad del analito y la precisión de los resultados de la medición.
(1) El suero o plasma no debe almacenarse a 22 °C ~ 25 °C durante más de 8 horas (2) Si el experimento no se puede completar en 8 horas, el suero o plasma debe almacenarse a 2 °C ~ 8 °; C; (3) No dentro de las 48 horas Los proyectos experimentales completados, o el suero o plasma separado que deba almacenarse durante más de 48 horas, deben almacenarse a -20°C (4) Las muestras no deben congelarse ni descongelarse repetidamente ( sólo una vez) y no debe almacenarse en un refrigerador libre de escarcha (puede causar cambios en la temperatura de la muestra (5) El suero en el gel (barrera de gel) después de la centrifugación se puede almacenar de 2 a 5 días (también lo tiene); Se ha informado que se puede almacenar a 4 °C durante 24 horas), pero se debe garantizar la integridad del gel. Sin embargo, cuando se utilizan sustancias que no separan el gel, el suero o el plasma deben eliminarse inmediatamente después de la centrifugación; (6) El suero o el plasma deben almacenarse en tubos de ensayo sellados.
IV.Sustancias de separación de suero o plasma
Se refiere a sustancias que separan el suero o plasma de la sangre total, incluidas las sustancias gel y no gel.
(1) Sustancia en gel
¿Es una sustancia en gel inerte con viscosidad específica y gravedad específica (la gravedad específica entre suero o plasma y coágulo), como (1000 ~ 1100)? La centrifugación G RCF durante 10 minutos crea una barrera de gel impermeable entre el suero o plasma y el coágulo, separando así el suero o plasma de las células sanguíneas y el coágulo con el que entra en contacto.
(2) Material no gel
Consta de perlas, discos, filtros, tapones de fibra y otros materiales inertes (vidrio, plástico, fibra, fieltro, etc.). Utilice una gravedad específica entre el suero o plasma y el coágulo, agréguelo suavemente al vaso sanguíneo, utilícelo (1000 ~ 1100). Cuando RCF g se centrifuga durante 10 minutos, puede moverse a través de la sangre entre el suero o plasma y las células sanguíneas y coágulos, formando una interfaz, de modo que el suero o plasma se pueda separar.
(3) Sistema completo de tubos de gel
El sistema consta de tubos de extracción de sangre al vacío (tubos de plástico siliconados), que contienen sustancias de gel inertes, aceleradores o anticoagulantes. Tenga en cuenta que el producto debe tener la certificación de rendimiento y la fecha de vencimiento correspondientes, y debe usarse correctamente dentro de su fecha de vencimiento.