Los principios de estas dos pruebas se enumeran a continuación solo como referencia:
1 Principio de la tarjeta de reactivos para la sífilis:
Tecnología patentada
< p. >El reactivo de detección de anticuerpos contra la sífilis se prepara utilizando el principio del método sándwich de doble antígeno y utilizando oro coloidal como indicador.Añadir una gota de suero a analizar y dos gotas de solución tampón al pocillo de muestra de la tarjeta de prueba. Si el suero contiene una cierta cantidad de Syp-Ab, se combinará con el Syp-Ag de la etiqueta dorada para formar un complejo. Cuando la cromatografía alcanza la línea T, el complejo se une inmunológicamente al antígeno de sífilis recombinante incrustado en la línea T, permitiendo que el oro coloidal puenteado desarrolle color en la línea T. A medida que el marcador de oro restante continúa cromatografíando hasta la línea C, el marcador de oro y el anticuerpo policlonal incrustado allí se inmunoconjugan para unir el oro coloidal y desarrollar color. Si el suero no contiene Syp-Ab o es inferior a cierta cantidad, el antígeno recombinante de la malaria de la línea T no reaccionará con la etiqueta dorada y el anticuerpo policlonal de la línea C aún se unirá a la etiqueta dorada, lo que resultará en un solo color.
Explicación de resultados
Positivo: Cuando tanto los rayos T como los rayos C son tiras rojas, el resultado de la prueba es positivo;
Negativo: rayos T no están coloreados, cuando los rayos C están coloreados con una banda roja, es negativo;
No válido: los rayos C no están coloreados, lo que indica que la prueba falló o falló.
2. Principio del reactivo del factor reumatoide:
El factor reumatoide (FR) existe en el suero de los pacientes con artritis reumatoide (AR). Es un autoanticuerpo que utiliza IgG desnaturalizada como antígeno diana y existe principalmente en el suero y el líquido sinovial de pacientes con artritis reumatoide. Es un anticuerpo contra la IgG desnaturalizada y pertenece al tipo IgM. Puede unirse a fragmentos de IgGFC. Existen clones de células B productoras de RF en pacientes con AR y aproximadamente en el 50% de los individuos sanos. La RF se puede sintetizar en grandes cantidades bajo la acción directa de IgG desnaturalizada (o IgG de unión a antígeno) o del virus de Epstein-Barr. Hay muy pocos clones de células que produzcan RF en personas sanas. Los factores solubles secretados por los monocitos pueden inhibir la producción de RF y generalmente son difíciles de detectar. Los RF son principalmente autoanticuerpos IgM, pero también los hay IgG, IgA, IgD e IgE. La importancia clínica de varios FR difiere. La determinación de IgG, IgA y RF similar a IgM generalmente utiliza el método ELISA indirecto, es decir, utilizando IgG de conejo por aglutinación por calor para recubrir los micropocillos de la placa de reacción, agregando la muestra y luego agregando IgG antihumana, IgA, y anticuerpos marcados con enzima IgM respectivamente, de modo que la reacción interactuará con el color del sustrato. Para evitar que los RF de varias clases de Ig interfieran entre sí, los anticuerpos marcados con enzimas utilizan fragmentos de anticuerpo F(ab)2 marcados.
Principio
La IgG desnaturalizada se recubre sobre partículas de látex de poliestireno. Cuando este látex sensibilizado encuentra RF en el suero que se va a analizar, se produce una aglutinación visual, lo que se denomina prueba de aglutinación de látex.
En los micropocillos de la placa de reacción de poliestireno recubiertos con IgG desnaturalizada por aglutinación por calor, agregue el suero a analizar. Si hay RF, se combinarán entre sí y luego agregará la enzima desnaturalizada por aglutinación por calor marcada. IgG para reaccionar con él, el color se puede desarrollar después de agregar el sustrato. Según el grado de desarrollo del color, se puede juzgar la presencia y el nivel de RF. Este es un ELISA tipo sándwich de doble antígeno.
Prueba de aglutinación en látex
RF es un anticuerpo IgG anti-humano desnaturalizado que existe principalmente en pacientes con artritis reumatoide y puede unirse al segmento Fc de IgG. La IgG desnaturalizada está recubierta sobre partículas de látex de poliestireno. Cuando el látex sensibilizado encuentra la RF en el suero que se va a analizar, puede aglutinarse a simple vista.
Funcionamiento
Inactivar a 1 y 56°C durante 30 minutos (inactivar C1q para evitar falsos positivos de aglutinación). El suero a analizar se diluyó a 1:20 con solución salina tamponada con glicina 0,1 mol/l (pH 8,2) (añadir 0,05 ml de suero a 1 ml de solución salina fisiológica).
2. Tome 1 gota (aproximadamente 0,05 ml) de este suero diluido, agregue 1 gota de reactivo de látex RF en el cuadrado de vidrio negro, agite la placa de reacción inmediatamente durante 3 minutos para mezclar bien y luego espera hasta Mirar hacia abajo. Se incluyeron controles positivos y negativos en cada experimento.
Valor de referencia
El suero diluido 1:20 de personas normales es negativo.
Juicio de resultados
La mayoría de las personas con una prueba de aglutinación de látex normal son negativas, y aquellas con una aglutinación obvia dentro de los 3 minutos son positivas. Las muestras de reacción positiva deben diluirse dos veces para determinar el título sérico. Según el grado de desarrollo del color, ELISA se puede comparar con controles positivos y negativos para emitir un juicio positivo o negativo.
3. Análisis del impacto del factor reumatoide en la detección de anticuerpos contra la sífilis. Si estás interesado puedes leer este documento. Captura de pantalla adjunta.