El reactivo utilizado para analizar las proteínas se llama reactivo de biuret.
El reactivo de Biuret puede verificar la presencia de proteínas. Primero, agregue el reactivo de biuret A al líquido de la muestra de tejido y agite uniformemente (se debe crear un ambiente alcalino. Luego agregue el reactivo de biuret B y agite uniformemente).
Si el tejido contiene proteínas, verás que la solución se vuelve violeta. Los compuestos con dos o más enlaces peptídicos pueden reaccionar de color púrpura con el reactivo de biuret. El enlace peptídico de la proteína puede formar complejos con Cu2+ en solución alcalina para formar un compuesto de color rojo púrpura. La profundidad del color es directamente proporcional a la concentración de proteínas.
Reactivo de Biuret:
Es un reactivo químico analítico utilizado para identificar proteínas. Es una solución de prueba alcalina que contiene cobre, de color azul, preparada a partir de 0,1 g/ml de hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, 0,01 g/ml de sulfato de cobre y tartrato de potasio y sodio. El reactivo de biuret se utiliza originalmente para detectar biuret, porque las moléculas de proteínas contienen muchos enlaces peptídicos similares a las estructuras de biuret.
Por lo tanto, la reacción de biuret también puede ocurrir con iones de cobre en solución alcalina. Cuando el sustrato contiene enlaces peptídicos, el cobre de la solución de prueba se coordina con el péptido y el complejo se vuelve violeta. La concentración se puede analizar mediante colorimetría, con una longitud de onda de 540 nm en el espectro UV-visible. La sensibilidad de la reacción de identificación es de 5-160 mg/ml.
La función real en el reactivo de biuret es el sulfato de cobre, y el hidróxido de potasio es únicamente el de proporcionar un ambiente alcalino, por lo que puede ser sustituido por otras bases, como el hidróxido de sodio. Agregar yoduro de potasio al reactivo prolongará la vida útil del reactivo. La función del tartrato de sodio y potasio es proteger los iones complejos generados por la reacción para que no se precipiten y precipiten, lo que hace que el reactivo sea ineficaz.