Determinación de la concentración de proteínas por método de Bradford: principio experimental.
Las obvias deficiencias y muchas limitaciones del método biuret (método duBiuret) y del método del reactivo de folin-fenol (método Lowry) han llevado a los científicos a buscar mejores óvulos.
Tomar 6 tubos de ensayo y etiquetarlos por separado. Agregar soluciones de proteínas estándar de diferentes concentraciones a los primeros 5 tubos de ensayo. Agregar la solución de proteínas a analizar al último tubo de ensayo sin agregar la solución de proteínas estándar. pasa la cantidad de líquido en cada tubo de ensayo. Agregue agua destilada para lograr consistencia.
Mezclar el líquido uniformemente y colocarlo a temperatura ambiente durante 30 minutos. Utilice el primer tubo de ensayo sin solución de proteínas como control en blanco y mida el valor de absorbancia de la solución en cada tubo a una longitud de onda de 650 nm.
Información ampliada:
Método de absorción UV:
La mayoría de las proteínas tienen una absorción máxima característica a una longitud de onda de 280 nm, que se debe a la presencia de tirosina en La proteína, en presencia de triptófano y fenilalanina, puede utilizarse para determinar soluciones proteicas con un contenido de 0,1 a 0,5 mg/mL.
Tome 9 tubos de ensayo y etiquételos respectivamente. Agregue soluciones de proteínas estándar de diferentes concentraciones a los primeros 8 tubos de ensayo. No se agrega ninguna solución de proteínas estándar al tubo de ensayo 1. El último tubo de ensayo se agrega a la proteína. solución que se va a probar sin agregar estándar el valor de absorbancia.
Enciclopedia Baidu-Determinación de proteínas