(1) Análisis de enzimas de restricción. Este método utiliza enzimas de restricción y sondas de ADN específicas para detectar la presencia de variaciones genéticas. Cuando la secuencia de ADN que se va a analizar sufre una mutación, algunos sitios de las enzimas de restricción cambiarán y el estado de fragmentos de enzimas de restricción específicos también cambiará en la movilidad electroforética, lo que permitirá el análisis y el diagnóstico.
(2)Análisis del polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción de ADN. En el genoma humano, un promedio de unos 200 pares de bases pueden sufrir un par de mutaciones (llamadas mutaciones neutras), lo que da como resultado diferencias en las secuencias de nucleótidos entre individuos, llamadas polimorfismos del ADN. Muchos polimorfismos del ADN ocurren en los sitios de reconocimiento de las enzimas de restricción. La hidrólisis enzimática de este fragmento de ADN produce fragmentos de longitudes variables, que se conocen como polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP). RFLR se hereda de manera mendeliana. En una familia específica, si un gen que causa la enfermedad está estrechamente relacionado con un fragmento polimórfico específico, este fragmento polimórfico puede usarse como un "marcador genético" para determinar si los miembros de la familia o los fetos son portadores del gen que causa la enfermedad. De esta manera se pueden diagnosticar la hemofilia A, la fibrosis quística y la fenilcetonuria.
(3) Hibridación de sondas oligonucleotídicas específicas de alelo. La base genética de las enfermedades genéticas es una o más mutaciones en la secuencia del gen. A partir de la secuencia de nucleótidos del sitio de mutación del gen conocido, se sintetizaron artificialmente dos sondas de oligonucleótidos: una es un oligonucleótido correspondiente a la secuencia de bases del gen mutante; la segunda es un oligonucleótido que corresponde a la secuencia de bases del gen normal; hibridar con el ADN del sujeto respectivamente. Este detecta si los genes del sujeto han mutado y si existen nuevos tipos de mutaciones.
Dependiendo del significado de la pregunta, es aceptable el primer o el segundo método, por lo que se deben utilizar enzimas de restricción durante el proceso de detección. Pero, de hecho, la situación en este tema es bastante grave. Después del examen de ingreso a la universidad, hice algunas estadísticas simples. En una clase con calificaciones promedio, el número total de estudiantes fue 41. Solo 6 estudiantes eligieron la respuesta correcta de c. la A incorrecta en realidad se considera principalmente Es la tecnología de hibridación de ADN. Saben que la tecnología de hibridación del ADN utiliza ciertos medios técnicos para unir el ADN monocatenario de dos organismos. Si las dos hebras sencillas tienen secuencias de bases complementarias, entonces, cuando no hay secuencias de bases complementarias, todavía quedan dos hebras sencillas libres. La hibridación del ADN utiliza hebras simples de ADN, por lo que los estudiantes consideraron usar helicasa para desenrollar el ADN en hebras simples. Sin embargo, los estudiantes olvidaron que siempre que el ADN de diferentes fuentes se caliente a 100 °C o el pH se ajuste por encima de 13, se duplica el hidrógeno. Los enlaces entre las moléculas de ADN se romperán y degenerarán en hebras simples, por lo que la helicasa en realidad no es necesaria.
Opción c: Endonucleasa de restricción
Endonucleasa de restricción: Endonucleasa que hidroliza el ADN bicatenario en una secuencia de nucleótidos específica. Las endonucleasas de restricción de tipo I catalizan no sólo la metilación del ADN del huésped sino también la hidrólisis del ADN no metilado. Sin embargo, las enzimas de restricción de tipo II sólo catalizan la hidrólisis del ADN no metilado.
Anemia falciforme: el sexto aminoácido en el extremo N de la cadena β de la hemoglobina cambia de ácido glutámico a valina. El nucleótido correspondiente en el gen estructural ha cambiado del CTT normal a CAT, por lo que los codones del ARNm también han cambiado, lo que provoca errores en la síntesis de la cadena polipeptídica de proteínas.
La secuencia de nucleótidos normal alrededor del sexto codón es CCT-GAG-GAG, que es la secuencia de reconocimiento de la endonucleasa de restricción Mst2. El uso de Mst2 para hidrolizar genes normales producirá dos fragmentos de 1,1,5 KB y 0,20 kb, marcados con 32P? -El gen de la globina se utilizó como sonda y se hibridó con el fragmento Mst2 después de hidrólisis y electroforesis. Si hay dos bandas de hibridación en 1,15 kb y 0,20 kb, significa que no hay ninguna mutación en el gen.
Por el contrario, sólo una banda de hibridación indica una mutación en el sitio de modificación.
Helicase simplemente lo desenrolla, pero además, también se puede desenrollar térmicamente. Por tanto, a no es necesario.
Esta pregunta también se ha probado un poco, porque los pacientes con anemia falciforme tienen una mutación en el sitio de corte de la enzima, por lo que el sitio de corte de la enzima desaparece después de la mutación. Después de la digestión enzimática, se producen nuevos fragmentos largos. Si es heterocigoto, habrá dos fragmentos, uno largo y otro corto.
Las personas normales tienen dos cortos y los homocigotos dos largos.