¿Por qué la hematoxilina se diferencia y se vuelve azul? ¿Cómo afrontarlo?

En la solución de colorante de hematoxilina, la cromatina del núcleo es principalmente ácido desoxirribonucleico (ADN). En la estructura de doble hélice del ADN, los grupos fosfato de las dos hebras miran hacia afuera, están cargados negativamente y son ácidos. Se tiñen fácilmente mediante enlaces iónicos o de hidrógeno con el tinte básico de hematoxilina cargado positivamente. La hematoxilina es azul en solución alcalina, por lo que los núcleos celulares se tiñen de azul.

Diferenciación: después de la tinción con hematoxilina, la solución de tinte que no está unida a las células se lava con agua, pero se debe eliminar el tinte que está demasiado unido al núcleo y el tinte adsorbido en el citoplasma. con alcohol de ácido clorhídrico al 1% en solución de diferenciación, para asegurar una tinción clara del núcleo y el citoplasma. Este proceso se llama diferenciación de tintes.

Debido a que el ácido puede destruir la estructura de quinona de la hematoxilina, el pigmento puede liberarse del tejido y la diferenciación no debe ser excesiva.

Color azulado: Después de la diferenciación, la hematoxilina presentará un estado de ión rojo en condiciones ácidas y un estado de ión azul en condiciones alcalinas, por lo que después de la diferenciación, enjuague con agua para eliminar el ácido, detenga la diferenciación y luego hematoxilina. Los núcleos de las células teñidas de esperma se vuelven azules con agua débilmente alcalina, lo que se llama azulado. Generalmente, puede volverse azul sumergiéndolo en agua del grifo, o puede volverse azul usando agua tibia (lo mejor es agua tibia a 50 grados).