Introducción básica Nombre chino: biliverdina mbth: clasificación de biliverdina: una característica morfológica de biliverdina: escamas de color verde oscuro o cristales columnares. Localización: Precursores en bilis e ictericia: bilirrubina biliverdina, bilirrubina biliverdina, vías metabólicas, biliverdina sérica y biliverdina. La bilirrubina también se llama deshidrobilirrubina. pigmentos biliares. Se encuentra en la bilis y la orina ictérica. Cristales en escamas o columnares de color verde oscuro. Se vuelve negro a unos 300 ℃, se descompone sin derretirse y no tiene punto de fusión. Soluble en metanol, éter, cloroformo, disulfuro de carbono, benceno, insoluble en agua. Se obtiene mediante la oxidación de la bilirrubina. Para investigaciones bioquímicas. La estructura específica se muestra en la Figura 1. Figura 1 Bilirrubina Generalmente se considera que la bilirrubina es el principal metabolito final del hemo y el principal pigmento biliar en las aves de corral. Los pollos y los pavos excretan bilis en forma de sal sódica de biliverdina. Las aves carecen de la enzima biliverdina reductasa necesaria para reducir la biliverdina a bilirrubina, por lo que la bilirrubina constituye un porcentaje muy bajo del pigmento biliar total en las aves. Las aves normales tienen poca o ninguna bilirrubina o biliverdina en su suero o plasma. Los estudios han encontrado que las concentraciones de bilirrubina y biliverdina en la vesícula biliar de pollo son casi las mismas, pero en la bilis del conducto biliar hepático, la bilirrubina es un 75% más que la biliverdina. Cuando se liga el conducto biliar de un lado del hígado, no hay hiperbilirrubinemia, pero cuando se ligan ambos conductos biliares, se producirán trazas de biliverbinemia y una hiperbilirrubinemia evidente; La bilirrubina de la bilis de las aves es muy similar a la que se encuentra en los perros. Este estudio muestra que en los pollos, la biliverdina formada fuera del hígado o en los conductos biliares intrahepáticos se reduce a bilirrubina en el sistema biliar extrahepático. La bilirrubina sérica elevada en aves carnívoras puede ocurrir debido a obstrucción biliar o enfermedad hemolítica intravascular, mientras que la ictericia en loros es extremadamente rara clínicamente. Por lo tanto, tiene poca importancia utilizar la bilirrubina sérica para detectar enfermedades hepáticas en loros. El suero de los loros con enfermedades hepáticas o en estado de inanición suele ser verde y contiene urato, generalmente causado por hipercolesterolemia e hipercolesterolemia. Ocasionalmente, los loros con enfermedad hepática crónica desarrollan ictericia, que puede ser causada por una reducción inespecífica de biliverdina a bilirrubina. Si el suero de las aves normales es amarillo, se cree que esto no está relacionado con la bilirrubina, sino que es causado por los pigmentos carotenoides en los alimentos. La hemooxigenasa (HO) es la enzima limitante de la velocidad de degradación del hemo, que puede convertir el hemo en biliverdina, CO y hierro, y luego reducir la biliverdina a bilirrubina. Se sabe que el HO tiene tres isoenzimas, a saber, HO-1, HO-2 y HO-3. HO-2 y HO-3 se expresan constitutivamente en grandes cantidades y pueden desempeñar sus funciones respectivas en la unión del hemo en células normales. HO-1 es inducible y está ampliamente distribuido en diversos tejidos y células de mamíferos. HO-1 puede ser inducido por una variedad de factores, como estrés oxidativo, choque térmico, irradiación ultravioleta, isquemia-reperfusión, metales pesados, lipopolisacáridos bacterianos, citocinas, NO y su sustrato hemo, etc. Investigaciones recientes se han centrado en los efectos biológicos de los productos de reacción enzimática (biliverdina, cobalto y hierro), que tienen actividades antioxidantes, antiinflamatorias, antiapoptóticas, de transducción de señales y de modulación inmune, además de inhibir la expresión de moléculas de adhesión. La fuerte respuesta adaptativa de HO-1 a varios ** sugiere que puede desempeñar un papel importante en la prevención de respuestas inflamatorias y daño tisular oxidativo. La bilirrubina es uno de los productos de la reacción enzimática HO-1 y es un pigmento biliar del triclosán. Es un pigmento de color verde oscuro y precursor de la bilirrubina. Sólo se encuentra en la bilis de aves, anfibios o herbívoros, pero no en la bilis ni en el suero de humanos normales. En los últimos años, se han realizado muchos estudios sobre la correlación entre biliverdina y HO-1 en experimentos con animales sobre otras enfermedades, pero los resultados han sido mixtos. Algunos estudios han encontrado que la biliverdina puede reaccionar con HO-1 e inhibir la expresión de HO-1 mediante regulación por retroalimentación negativa, pero otros estudios han encontrado que no tiene ningún efecto significativo sobre la expresión de HO-1. Una gran cantidad de estudios han confirmado que la HO-1 tiene efectos antioxidantes, antiinflamatorios, antiapoptóticos y otros efectos neuroprotectores sobre la lesión por isquemia-reperfusión cerebral.
Al mismo tiempo, cada vez más estudios experimentales en animales han demostrado que la biliverdina tiene un poderoso efecto antiinflamatorio. No solo puede inhibir la respuesta inflamatoria inducida por lipopolisacárido y proteger a las ratas de una lesión pulmonar aguda, sino que también reduce la producción y liberación de. mediadores inflamatorios Inhibe el empeoramiento y el desarrollo de la adenotoxicosis, y también inhibe la expresión del receptor tipo Toll-4 y los factores inflamatorios en los macrófagos. Además, la administración exógena de biliverdina puede regular negativamente la expresión de moléculas de adhesión e inhibir la agregación de leucocitos, reduciendo así la producción de citocinas y quimiocinas o inhibiendo la producción de proteínas proinflamatorias como la ciclooxigenasa-2 y el citocromo P450, inhibiendo en última instancia. la respuesta inflamatoria. En los últimos años, ha habido cada vez más informes sobre la aplicación de la vaina de biliverdina en la protección de diversas enfermedades como lesiones vasculares y trasplantes de órganos, y su mecanismo de acción está relacionado principalmente con su efecto antiinflamatorio. Puede desempeñar un papel antiinflamatorio en la aparición y desarrollo de diversas enfermedades y ralentizar o mejorar la progresión o el pronóstico de la enfermedad al inhibir la respuesta inflamatoria. Sin embargo, existen pocos informes sobre su efecto protector sobre la lesión por isquemia-reperfusión cerebral. . La biliverdina sérica es un producto intermedio de la hemoglobina y la bilirrubina. Una función hepática intacta y una nutrición adecuada son necesarias para la conversión de biliverdina en bilirrubina, dijo Lemberg. La bilirrubina también puede ser oxidada por la bilirrubina, especialmente después del estancamiento del tracto biliar en el hígado. La presencia de biliverdina en la sangre en este momento puede deberse a reflujo. La bilirrubina vuelve la piel verde. La inyección intradérmica de una pequeña cantidad de solución de ferrocianuro de potasio al 0,1% puede provocar un color azul verdoso cuando hay biliverdina presente. La bilirrubina no muestra la reacción de Van den Berg y se mide utilizando un espectrofotómetro especializado. Normalmente, la bilirrubina sérica y la biliverdina son paralelas, pero la biliverdina está ausente en la ictericia hemolítica. Obstrucción biliar extrahepática completa, concentración extremadamente alta de biliverdina y piel verde. La mejora del estado nutricional parece reducir las concentraciones séricas de biliverdina. El proceso de producción de conversión de biliverdina en bilirrubina. El principal producto de la oxidación de la bilirrubina es la biliverdina. El rendimiento de bilirrubina se puede aumentar ajustando el proceso para convertirla nuevamente en bilirrubina. Basado en bilis fresca de cerdo, el rendimiento de extracción de bilirrubina de este método puede alcanzar el 0,045%. 1. Método de operación (1) Preparación de calcio biliar: Tome bilis de cerdo fresca, fíltrela y agregue agua de cal saturada mientras revuelve hasta que el pH = 13 ~ 14. Luego se calienta rápidamente cuando la temperatura alcanza aproximadamente 40°C, se eliminan las impurezas como la espuma y los lípidos, y la mezcla se mantiene a 95°C durante 65438±05 minutos sin hervir y se filtra para obtener colato de calcio. El filtrado se utiliza para recuperar ácidos biliares porcinos conjugados crudos y las sales biliares de calcio se acidifican inmediatamente. Los requisitos para el agua saturada de cal son los mismos que los del método anterior. (2) Acidifique, agregue 10 veces el volumen de agua destilada a la sal de calcio, luego agregue NaHSO 3 al 2,0% y muela hasta obtener una pasta. Cuando la temperatura sea inferior a 20 °C, agregue gota a gota una solución de ácido clorhídrico 1:1 mientras agita (ácido clorhídrico: hielo = 1:1) hasta que el valor del pH sea de 1 a 1,5. Durante el proceso de acidificación, la velocidad de adición de ácido puede ser ligeramente más rápida al principio y luego disminuir gradualmente. Si el fondo acidificado no está tapiado, es fácil que se formen grumos duros, por lo que se deben tomar precauciones. A medida que la acidificación se acerca al final, se vuelve cada vez más concentrado. Para evitar una acidificación incompleta, muela y tamice y luego continúe con la acidificación. (3) Tratamiento con etanol: agregue 10 veces la cantidad de etanol al pigmento biliar acidificado a temperatura ambiente, revuelva uniformemente y ajuste el pH a 3. Agregue 0,5% de nahso_3, mezcle bien y coloque en capas a baja temperatura para evitar la luz. En las mismas condiciones, si tratas una vez más, obtendrás mil puntos. Tenga en cuenta que el pigmento biliar viscoso debe molerse y dispersarse uniformemente para permitir el contacto total con el etanol. El pH no debe ser superior a 4. (4) Enjuague con agua. Coloque el pigmento biliar en 10 veces la temperatura de agua caliente a 80 °C, revuelva uniformemente y manténgalo caliente durante 10 minutos. Recoja la bilirrubina flotante y deshidrátela con etanol. (5) Use cloroformo para extraer pigmentos biliares deshidratados, agregue NaHSO 3 al 0,5% y use cloroformo para reflujo y extraiga a 60 ° C hasta que el extracto sea incoloro (se usa menos cloroformo y la extracción repetida logrará buenos resultados). (6) Destilar y recuperar cloroformo, recolectar al menos una cierta cantidad de extracto destilado de cloroformo de bilirrubina refinada a presión reducida, enfriar a temperatura ambiente, agregar NaHSO 3 al 1% y etanol absoluto, ajustar el pH a ácido y colocarlo en un lugar oscuro. colocar a 4°C durante 12 horas o más para cristalizar la bilirrubina. Recoger la bilirrubina cristalizada, lavarla con agua destilada caliente, lavarla con éter dietílico y secarla al vacío para obtener bilirrubina refinada. 2. Condiciones para convertir biliverdina en bilirrubina. (1) Se deben agregar antioxidantes, (2) el pH debe ser ácido, (8) Almacenar a baja temperatura y protegido de la luz durante más de 12 horas. Bajo la garantía de las tres condiciones anteriores, parte de la biliverdina se puede convertir nuevamente en bilirrubina.