③ Cuando no se considera la adsorción no polar de la resina, la velocidad de elución se determina según el número de carga negativa de los nucleótidos. El orden de elución es CMP >; de hecho, los nucleótidos y las resinas de intercambio aniónico de poliestireno tienen una adsorción no polar, y la adsorción no polar de las bases purínicas es tres veces mayor que la de las bases pirimidínicas. Debido a la interacción entre la adsorción electrostática y la adsorción no polar, el orden de elución es CMP >: AMP > UMP > gtGMP.
¿Se pueden separar los ácidos nucleicos mediante electroforesis? ¿Por qué?
① La separación electroforética de los cuatro nucleótidos debe utilizar una solución tampón con pH 3,5. A este valor de pH, las cargas negativas entre estos cuatro tipos de nucleótidos individuales son muy diferentes y todos se mueven hacia el electrodo positivo, pero a diferentes velocidades. El orden es: UMP & gtGMP & gtAMP & gtCMP( 2) Se debe utilizar un pH de 8,0 para que los nucleótidos lleven más cargas negativas y faciliten la adsorción en la columna de resina de intercambio aniónico. Aunque los nucleótidos tienen más cargas negativas a un pH de 11,4, un pH demasiado alto no favorece la separación.