Según la homología y estructura de la secuencia de ADNc del receptor de citocinas y la secuencia de aminoácidos de la región extracelular del receptor, los receptores de citocinas se pueden dividir principalmente en cuatro tipos: Superfamilia de inmunoglobulinas (IGSF), superfamilia de receptores de citocinas hematopoyéticas, superfamilia de receptores del factor de crecimiento nervioso y receptores de quimiocinas. Además, las estructuras de algunos receptores de citoquinas no se comprenden completamente, como IL-10R, IL-12R, etc. La estructura de algunos receptores de citocinas se ha aclarado pero aún no se ha clasificado, como la cadena IL-2Rα (CD25). (A) Superfamilia de inmunoglobulinas
Todos los miembros de esta familia tienen una o varias estructuras similares a las inmunoglobulinas. Se sabe que los receptores de citoquinas de IL-1 RTI (CD121A), IL-1 rtii (CD 121B), cadena IL-6Rα (CD 126) y GP 6556 son miembros del IGSF. M-CSFR (CD115), SCFR (CD117) y PDGFR se pueden dividir en varios tipos estructurales diferentes, y las vías de transducción de señales de diferentes tipos estructurales de IGSF también son diferentes.
(1) M-CSFR, SCFR y PDGFR: la región de la membrana externa contiene 5 dominios similares a Ig, de los cuales 1 estructura similar a V está cerca de la región de la membrana y los otros 4 son estructuras similares a C2. . Los receptores normalmente se unen como dímeros a los ligandos homodiméricos correspondientes. La región citoplasmática del propio receptor contiene la estructura de una proteína tirosina quinasa (PTK).
(2)IL-1RtI e IL-1RTII: hay tres estructuras similares a C2 en la región de la membrana externa, y la fosforilación de serina/treonina en la región citoplasmática del receptor puede estar relacionada con la transducción de señales mediada por receptores. .
(3) Cadena IL-6Rα, gp130 y G-CSFR: El extremo N de la región extracelular contiene una región similar a C2 y un dominio de la superfamilia del receptor de eritropoyetina cerca de la membrana. La región contiene de 2 a 4 dominios de fibronectina. La fosforilación de tirosina citoplasmática de gp130 está asociada con la transducción de señales. Los ligandos correspondientes de este receptor estructural, IL-6, OSM, LIF y G-CSF, también son muy similares en secuencia de aminoácidos y estructura molecular.
(II) Superfamilia de receptores de citocinas hematopoyéticos
La superfamilia de receptores de citocinas hematopoyéticos, también conocida como superfamilia de receptores de citocinas, se puede dividir en superfamilia de receptores de eritropoyetina (ERS) y superfamilia de receptores de interferón.
Dominio extracelular de todos los miembros de 1. ERSERS y el dominio extracelular del receptor de eritropoyetina (EPO) tienen un alto grado de homología en la secuencia de aminoácidos y una gran similitud en la estructura molecular, de ahí el nombre.
(1) Miembros de ERS: Los miembros de ERS incluyen EPOR, trombopoyetina R, cadena IL-2β (CD122), cadena IL-2Rγ, cadena IL-3Rα (CD123), IL-3Rβ y IIL- 4R (CDW 65438). Cadena IL-6Rα (CD126), gp130 (CDw123), IL-7R, IL-9R, subunidad IL-11 de 240 kDa, g.
(2)2) Características estructurales de ERS: los miembros de la superfamilia de receptores de eritropoyetina tienen un péptido de sacrificio que contiene aproximadamente 265.438+00 residuos de aminoácidos fuera de la membrana celular en el sitio de unión del ligando. Las características principales son las siguientes: ① Cerca del extremo N de la región de homología, entre Cys65, 438+0 y Cys2, hay 4 residuos de cisteína altamente conservados Cys 1, Cys2, Cys3, Cys4 y 65,438+0 Paladio conservado aminoácidos. ② Hay un motivo triptófano-serina-X-triptófano-serina en la región de homología cercana a la membrana celular, que se encuentra entre 18 y 22 grupos de aminoácidos fuera de la membrana celular. El llamado Trp-Ser-Xaa-Trp-Ser es el motivo WSXWS y su función biológica aún se desconoce. La cadena IL-3α, la cadena IL-3Rβ, la cadena GM-CSFRβ y LIFR tienen dos dominios ERS. La primera estructura ERS de la cadena GM-CSFRβ tiene un motivo similar al WSXWS, a saber, prolina-serina-lisina-triptófano-serina (PSKWS). motivo. Utilizando el oligonucleótido correspondiente al motivo WSXWS sintetizado por Hilton et al. en 1994 como sonda, se clonó el ADNc de la cadena α del receptor de IL-11 de ratón a partir de la biblioteca de ADNc de hígado de ratón adulto.
La cadena IL-6Rα, gp130 y G-CSFrN tienen la estructura IGSF. Solo Cys1 y Cys3 están ubicados cerca del lado N-terminal de IL-7R, que carece de Cys2 y Cys4, así como de residuos de triptófano, en comparación con otros miembros. La subunidad de IL-1240 kDa tiene la estructura homóloga de ERS, pero no está unida a la membrana y forma un heterodímero con otra subunidad de 35 kDa de IL-12 a través de un enlace disulfuro. En ERS, se puede considerar que el extremo FRN de GM-CSFrN está compuesto por dos fibronectinas de tipo III, y cada dominio de fibronectina de tipo III consta de siete cadenas de láminas β antiparalelas que forman una estructura de barril. El surco entre las dos estructuras en forma de barril es una región conservada fuera de la membrana del ligando, que tiene una homología evolutiva obvia, y el grado de homología es similar al de los miembros del IGSF. Eporroideae tiene una alta homología con otros miembros de la familia y puede estar en una posición dominante en la evolución. La longitud de la región citoplasmática de ERS varía de 54 a 568 residuos de aminoácidos. Excepto que la cadena IL-2Rβ tiene cierta homología con EPOR, otros miembros no tienen homología obvia en la región citoplasmática. La región citoplasmática de los miembros de ERS no tiene una estructura PTK y sus vías y mecanismos de señalización también son diferentes. La dualidad intrínseca de la región citoplasmática de la cadena IL-2Rβ está asociada con tirosina quinasas en el citoplasma, y la región rica en serina está asociada con vías independientes de quinasas. La región citoplasmática de la cadena IL-2Rγ tiene una estructura SH2 y participa en la transmisión de señales. PTK y PKC en el citoplasma pueden estar implicadas en la señalización mediada por IL-4R. Las regiones ricas en serina y la fosforilación de tirosina en el citoplasma de gp130 están asociadas con la transducción de señales mediada por gp130. Además, la fosforilación de tirosina está relacionada con la transducción de señales mediada por IL-7R, cadena GM-CSFRβ, cadena IL-3Rβ y cadena IL-5Rβ.
2. El IFN-α/βR, el IFN-γR y el factor tisular (TF) pertenecen a esta familia. Sus estructuras son similares a la familia de receptores de eritropoyetina, pero solo hay dos Cys N-terminales conservados. , hay 7 aminoácidos en el medio. También hay dos Cys conservadas cerca de la membrana, con 20-22 aminoácidos entre ellas. IFN-α/βR consta de los dos dominios anteriores.
(III) Miembro de la superfamilia de receptores del factor de crecimiento nervioso
1. La superfamilia NGFR pertenece a esta familia. Además del receptor del factor de crecimiento nervioso NGFR, también existen TNF-Rⅰ (CD 120 a), TNF-Rⅱ (CD 120 b), OX40, CD27 y cDNA-465433 de células T.
2. Características estructurales de la superfamilia NGFR. Los miembros de la superfamilia NGFR están compuestos por 3-6 regiones ricas en Cys de aproximadamente 40 aminoácidos fuera de la membrana celular. Rⅱ tiene 4 dominios estructurales, CD95 tiene 3 dominios y CD30 tiene 6 dominios. Todos los miembros tienen 6 Cys conservados y 1 residuo Tyr, Gly y Thr en la primera región del extremo N, y 4-6 Cys en otras regiones. Las moléculas TNF-Rⅰ, CD95 y CD40 comparten aproximadamente entre un 40 y un 50 % de homología en el citoplasma.
(4) Receptores de quimiocinas
Desde que el gen IL-8 se clonó con éxito en 1988, se ha formado una familia de quimiocinas. Hasta el momento, existen al menos 19 miembros de la familia de las quimiocinas. Algunos receptores de quimiocinas se han aclarado básicamente y todos pertenecen a receptores acoplados a proteínas de unión G, porque estos receptores tienen siete dominios transmembrana, también conocidos como superfamilia de receptores de siete dominios transmembrana (STRSUPERFEMILY). Existe una amplia gama de receptores acoplados a proteína G (o STR). Además de los receptores de quimiocinas, como ciertos receptores de aminoácidos, acetilcolina y monoaminas, los receptores de quimiocinas clásicos (C5a, fMLP y PAF) pertenecen todos a los receptores acoplados a proteína G/STR.
Tipos y estructuras de receptores de quimiocinas
(1) Tipos de receptores de quimiocinas: Los receptores de quimiocinas descubiertos incluyen IL-8RA, IL-8RB, MIP-1α/RANTEsR, NCP-1R y receptor de quimiocinas (receptor de quimiocinas de eritrocitos bcckr). Algunas personas clasifican IL-8RA, IL-8RB y RBCCKR (antígeno Duffy) que pueden unirse a IL-8 como la familia de receptores de IL-8.
(2) Estructura de los receptores de quimiocinas: todos los receptores de quimiocinas son receptores/STR acoplados a proteína G, con el extremo N fuera de la membrana celular y el extremo C en el citoplasma. Los siete dominios transmembrana (TMD) son hélices alfa. En los TMD ⅱ, ⅳ, ⅴ, ⅵ y ⅶ, la timina conservada en la hélice α está retorcida. Hay tres noe compuestos de aminoácidos hidrófilos fuera de la membrana celular y en el citoplasma, que se denominan E1-E3 (E: bucle conector extracelular). Dos Cys conservadas forman un enlace disulfuro entre e1 y e2, y algunos receptores también forman un enlace disulfuro entre el extremo N extracelular y e3, como IL-8Ra30Cys y 277ys. En la superfamilia STR, los receptores de quimiocinas y los receptores de quimiocinas clásicos tienen las siguientes características: (1) Su longitud es la más corta en la superfamilia STR, alrededor de 350 aminoácidos, lo que se debe principalmente a los extremos N-terminal y C-terminal más cortos. , el bucle i3 solo contiene 16-22 aminoácidos; (2) La homología a nivel de aminoácidos es superior al 20% (3) i3 es rico en aminoácidos básicos y tiene una carga positiva; el terminal es similar a un ácido y el electrodo negativo es un electrodo; (5) El citoplasma contiene muchas serina y treonina, que pueden ser sitios de fosforilación (6) el ARNm se expresa principalmente en los glóbulos blancos;
2. Familia de receptores de IL-8 La familia IL-8R es un término general para diferentes receptores de quimiocinas que pueden unirse a IL-8, incluidos IL-8RA, IL-8RB y RBCCKR.
(1)IL-8RA: El gen IL-8 RAC DNA 1991 fue clonado y aislado con éxito de la biblioteca de expresión de ADN del neutrófilo C por Holmes et al. El gen IL-8RA humano está ubicado en el cromosoma 2q35. , que está estrechamente relacionado con IL-8RA. El gen -8RB está estrechamente vinculado y es altamente homólogo, y es probable que se haya copiado del mismo gen ancestral. Inferido del ADNc, el IL-8RA consta de 350 aminoácidos y tiene 5 sitios de glicosilación unidos por N. El peso molecular del péptido desnudo después de la glicosilación es de 40 kDa, de 55 a 69 kDa, y su homología con IL-8RB a nivel de aminoácidos es del 77%. IL-8RA sólo se une al ligando IL-8 (básico, PI8.0-8.5), que está relacionado con la estructura de IL-8RA. El aminoácido ácido en el extremo ran de IL-8 es el sitio de unión de IL-8 Gly275 y Arg280 en Asp11 y e3 en el extremo N son muy importantes para unir ligandos porque Cys30 y Arg280 están relacionados entre sí. El gen IL-8RA se expresa en una variedad de células, como neutrófilos, monocitos, células T activadas por PGA, líneas celulares similares a monocitos, células de melanoma, fibroblastos sinoviales, células HL60 y células promieloides. Línea celular THP-1.
(2) IL-8rb: El ADNc de IL-8rb se clonó con éxito a partir de células HL60 por primera vez. El número deducido de residuos de aminoácidos es 335 y tiene un sitio potencial de glicosilación ligado a N. IL-8RB puede unirse a IL-8, GROα, GROβ, GROγ y NAP-2 en la subfamilia CXC. La IL-8RB humana se expresa principalmente en células mieloides, como neutrófilos, células HL60, THP-1 y AML193.
(3)RBCCKR: este ligando de unión al receptor también se denomina receptor multiespecífico. Tiene una amplia especificidad y puede unirse a la subfamilia IL-8, NAP-2 y CC de la subfamilia CXC de MCP. -1 y RANTES. El RBCCKRcDNA1993 humano se clonó con éxito y el gen se ubicó en 1q21-q25. La molécula del receptor maduro consta de 338 aminoácidos, tiene un peso molecular de 39 kDa y tiene una homología del 27 % con IL-8RB y MIP-1α/RANTESR respectivamente. La región exterior de la membrana celular tiene 66 aminoácidos, contiene 2 sitios potenciales de glicosilación ligados a N y es ácida. Hay 24 residuos de aminoácidos en el citoplasma C-terminal. RBC-CKR no parece estar regulado por la proteína G y puede ser un receptor desacoplado de la proteína G. RBCCKR es el antígeno Duffy (gpD) de los glóbulos rojos humanos y es el receptor de Plasmodium. Los individuos Duffy negativos no expresan el antígeno Duffy/RBCCKR a pesar de la presencia de este tipo de sangre. Como receptor eliminador, RBCCKR elimina las quimiocinas de la sangre. La afinidad Kd de este receptor por la unión del ligando es 5 nM y el nivel de IL-8 en suero normal es el nivel pM.
En el síndrome de dificultad respiratoria del adulto (SDRA) y la sepsis, los niveles séricos de IL-8 pueden aumentar a 8 nM y el exceso de IL-8 puede eliminarse uniéndose a RBCCKR. Las quimiocinas como la IL-8 pierden su efecto sobre las células diana después de unirse a los glóbulos rojos. La importancia de esta eliminación de glóbulos rojos es mantener concentraciones apropiadas de quimiocinas y asegurar un movimiento sensible de los neutrófilos desde la sangre a los sitios de inflamación con altas concentraciones de quimiocinas. RBCCKR se expresa no sólo en los glóbulos rojos, sino también en el riñón y el cerebro, y también tiene expresión genética en el bazo, el pulmón y el timo.
3. Transducción de señales del receptor En IL-8RA e IL-8RB, el segundo bucle intracelular (i2) inmediatamente adyacente al tercer dominio transmembrana (TMD) tiene una secuencia DRYLAIVHA altamente conservada, estrechamente relacionada con el receptor. transducción de señales, en la que se requiere DRY para que los receptores se acoplen eficientemente a las proteínas G. Si esta secuencia se altera por mutación perderá casi por completo la actividad biológica estimulada por el ligando, aunque no afectará a la unión del receptor y el ligando. Después de que IL-8R se une a su ligando, la proteína G heterotrimérica unida al receptor se descompone en subunidades α y subunidades β γ. La subunidad α activa la fosfolipasa C (fosfolipasa PLC), lo que lleva a un aumento de trifosfato de inositol (IP3) y diacilglicerol (DAG) en el citoplasma, e induce la liberación del depósito de calcio intracelular Ca2 y la activación de PKC, respectivamente. Además, la fosforilación de residuos de serina y treonina en IL-8RA e IL-8RBC puede estar relacionada con la transducción de señales.
4. La investigación sobre receptores de quimiocinas y virus ha descubierto que ciertos productos de marco de lectura abierto de infecciones virales en humanos o primates son altamente homólogos a ciertos receptores de quimiocinas. Esto puede estar relacionado con la patogenicidad del virus y ciertos. Características biológicas del virus.
(1) El citomegalovirus humano (HCMV) es un beta-herpesvirus que puede infectar células epiteliales, células mieloides y células linfoides humanas. Las secuencias de aminoácidos deducidas de los tres marcos de lectura abiertos de HCMV3 v3, US27, US28 y UL33 pueden simular STR en estructura molecular. Entre ellos, el producto US28 tiene aproximadamente un 30% de homología con MIP-1α/RANTESR humano y está estrechamente relacionado. con el receptor. El extremo N del cuerpo tiene una homología del 56%. El producto US28 puede unirse a MIP-1α, MIP-1β, MCP-1 y RANTES en la subfamilia de quimiocinas β, pero no puede unirse a la subfamilia de quimiocinas α.
(2) El herpesvirus del mono ardilla es un herpesvirus gamma que infecta las células T de los primates. El producto de HVS ECRF3 tiene casi un 30% de homología con IL-8R y un 44% de homología con el extremo RBN de IL-8R. Los productos ECRF3 pueden unirse a IL-8, GROα y NAP-2 hasta cierto punto.
Las sondas HCMV-US28 y HVS-ECRF3 no pueden hibridarse con el ADN genómico humano, lo que sugiere que los virus del herpes no sólo obtienen una copia del gen del receptor de quimiocinas del huésped, sino que también lo modifican. Se puede observar un fenómeno similar en el virus gammaherpesvirus Epstein-Barr (EBV), que es un linfocito B humano similar. El marco de lectura abierto BCRF1 del EBV es el gen de IL-10 obtenido del huésped. El producto BCRF1 también se llama IL-10 viral (vIL-10), que puede imitar la IL de los mamíferos. En segundo lugar, * * * cadenas compartidas en los receptores de citocinas
La mayoría de los receptores de citocinas son heterodímeros o multímeros compuestos por dos o más subunidades, que generalmente incluyen una cadena alfa y una cadena beta que participan en la señalización. Los ligandos específicos se unen. La cadena α constituye un receptor de baja afinidad y la cadena β no puede unirse a las citoquinas solas, sino que participa en la formación y transducción de señales de receptores de alta afinidad. Utilizando experimentos de unión por competencia de ligandos, análisis de similitud funcional y tecnología de clonación molecular, se descubrió que diferentes receptores de citoquinas * * * comparten la misma cadena.
(1) Tipos de cadenas de receptores de citocinas * * *
Entre muchas citocinas, algunas tienen efectos similares, como IL-3, IL-5, GM-CSF, etc. , todos actúan sobre el sistema hematopoyético y promueven la proliferación de células madre hematopoyéticas o células madre comprometidas. IL-6, IL-11, LIF y OSM pueden actuar sobre hepatocitos, megacariocitos y plasmocitoma y ejercer efectos biológicos similares. IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 e IL-13 pueden estimular la proliferación de células T o células B.
Las similitudes funcionales de las citocinas mencionadas anteriormente se explican parcialmente a nivel de receptor, que está determinado en gran medida por la distribución de cadenas de los receptores de citocina. Se sabe que las citoquinas * * * incluyen principalmente gp310, cadena GM-CSFRβ y cadena IL-2Rγ.
1. gp130/LIFR es IL-6R El anticuerpo monoclonal MT18 obtuvo una glicoproteína de 130 kDa denominada gp130 en la línea celular de mieloma U266**. Hibi fue clonado con éxito en 1990. gp130 pertenece a la familia de receptores del factor hematopoyético. IL-6 e IL-11 pueden estimular la proliferación de la línea celular de plasmocitoma de ratón T1165 basada en IL-6, acortar la fase Go de las células madre pluripotentes de la médula ósea bajo la acción de IL-3 y GM-CSF y mejorar la IL-3. dependencia. La formación de colonias de megacariocitos en humanos y ratones promueve el crecimiento in vivo e in vitro. Anti-gp130 puede bloquear la proliferación de células TF1 inducida por IL-6 e IL-11 respectivamente, mientras que anti-IL-5R solo puede bloquear la proliferación de células TF1 inducida por IL-6, lo que indica que IL-6 e IL-16544 . Hay dos tipos de receptores OSM: receptor de baja afinidad (gp130) y receptor de alta afinidad (LIFR). A diferencia de IL-6R e IL-1130, gp130 solo forma un receptor de baja afinidad en OSMR y no puede transducir señales de citocinas por sí sola. El receptor LIF de alta afinidad consta de LIFR y gp130. OSM y LIF compiten por unirse a receptores LIF de alta afinidad pero no a receptores LIF de baja afinidad.
(4) La homología de aminoácidos entre la cadena IL-11Rα (ratón), la cadena IL-6Rα y la cadena CNTFRα es del 24% y 22% respectivamente.
2. IL-3R, IL-5R y GM-CSFR utilizan KH97/AIC2B. En la hematopoyesis, tanto la IL-3 como el GM-CSF pueden promover la formación de células inmaduras, células mixtas y colonias de granulocitos-macrófagos, activar monocitos y promover la formación de colonias de eosinófilos. La IL-5 no sólo promueve la diferenciación y secreción de anticuerpos por parte de las células B, sino que también estimula la diferenciación de los eosinófilos. La transfección de la cadena GM-CSFRβ con la cadena IL-3, IL-5 y GM-CSFRα** mostró que las cadenas β de estas tres citoquinas son AIC2B y KH97 en ratones y humanos, respectivamente, y tienen un 56 % de sexo homólogo. .
3. Además de la cadena γ de IL-2R, la cadena γ del receptor de IL-2 también utiliza la cadena γ de IL-2R, IL-7R, IL-9R e IL-13R. Los ligandos correspondientes a estos receptores son un grupo de factores de crecimiento que actúan principalmente sobre las células T. Los pacientes con síndrome de inmunodeficiencia grave ligado al cromosoma X caracterizado por anomalías en la cadena de IL-2γ muestran un desarrollo anormal de células T, con células T faltantes o con un número significativamente reducido, lo que sugiere que la cadena de IL-2γ desempeña un papel crucial en el desarrollo de las células T. Tanto la IL-4 como la IL-7 desempeñan un papel en el desarrollo de las células T. Transmiten señales de proliferación de células T a través de una cadena de transducción de señales, IL-2Rγ. En el sistema receptor de IL-2, la cadena α constituye un receptor de baja afinidad, el receptor de afinidad media está compuesto por cadenas β y γ, y el receptor de alta afinidad está compuesto por cadenas α, β y γ, de las cuales la cadena γ es equivalente a otros receptores de citoquinas. La cadena β del cuerpo participa en la transmisión de señales, mientras que la cadena α β es equivalente a la cadena α y desempeña principalmente la función de reconocer y unir ligandos.
(B) * * *Transducción de señales de la cadena de disfrute y del receptor de citocinas
La transducción de señales de citoquinas requiere primero que el ligando se una al receptor e induzca la formación de dímeros (o trímeros) del receptor que permite la formación de dímeros (o trímeros) del receptor. parte del dímero (o trímero) interactúe, provocando así la transducción de señales de diferentes maneras. En el sistema IL-2R, la dimerización de las cadenas β y γ es necesaria para la transducción de señales, y el IL-2R que carece de la región citoplasmática de la cadena β no puede transducir señales estimuladas por IL-2. La estimulación y transducción de señales de las células por la mayoría de las citoquinas están relacionadas con la activación de tirosina quinasas y la fosforilación de tirosina de proteínas intracelulares. La unión de citocinas a receptores provoca la fosforilación de tirosina de los componentes del receptor. Los 60 residuos de aminoácidos cerca del extremo de la membrana del dominio citoplásmico ERS están altamente conservados. Esta secuencia homóloga desempeña un papel clave en la transducción de señales de IL-6, G-CSF, EPO e IL-7, lo que sugiere que estos receptores pueden utilizar receptores similares. Mecanismo de transducción de señales intracelulares.
Transducción de señales mediada por 1 y gp130 En la cadena de transducción de señales gp130 de IL-6R, IL-11R, OSMR, LIFR y CNTFR, su citoplasma contiene aproximadamente 277 residuos de aminoácidos, incluida la región de enriquecimiento de serina, nucleótidos región de unión, y cuatro. G-CSFR, IL-2Rβ, IL-4R y EPOR también tienen regiones ricas en serina, que tienen una homología obvia con otros miembros de ERS. Un segmento se conserva entre todos los miembros de ERS y el otro segmento está presente en G-CSFR, EPOR y KH97. No importa cuál de estos dos fragmentos cortos esté mutado, gp130 no podrá llevar a cabo la fosforilación de tirosina y perderá su función de transducción de señales. El heterodímero LIFR/gp130 no puede sufrir fosforilación de tirosina con fosfotirosina gp130 y pierde su función de transducción de señales. El heterodúplex LIFR/gp130 también está asociado con la fosforilación de tirosina. Aunque la mayoría de los miembros de la familia de receptores del factor hematopoyético no tienen un dominio de tirosina quinasa, se parecen a los receptores del factor de crecimiento de tipo tirosina quinasa. Los factores de crecimiento causan la formación y activación de los dímeros de tirosina quinasa del receptor asociados, mientras que los factores hematopoyéticos pueden inducir la formación de sus dímeros de receptor y conducir a la activación de las tirosina quinasas asociadas. Se descubrió que en las células TF1 estimuladas con IL-6 e IL-11, una proteína con un peso molecular de 97/95 kDa estaba fosforilada en tirosina, lo cual es importante en la transducción de señales contra gp130. Se encontró fosforilación de tirosina de proteínas de diferentes pesos moleculares en diferentes líneas celulares 3T3-L1, hibridomas de células B y leucemias mieloides, lo que sugiere la existencia de tirosina quinasas específicas de células en diferentes líneas celulares y sus respectivas especificidades de sustrato sexual, posiblemente IL. -65438 con IL-6, IL-11, LIF y gp130. JAK2 es una tirosina quinasa no receptora que puede activarse mediante EPO, IL-3, G-CSF, IL-6 y otras citocinas. JAK2 puede ser un cofactor en estas diferentes vías de señalización del receptor de citoquinas. Debido a las diferentes estructuras del receptor, esta quinasa JAK2 asociada al receptor puede catalizar diferentes sustratos, lo que da como resultado que JAK2 medie muchas funciones biológicas y químicas diferentes. Además, gp130 también produce su propio fosfato de tirosina después de ser estimulada por IL-6, IL-11, CNTF y LIF.
2. Transducción de señales mediada por KH97/AIC2B También hay dos regiones en el citoplasma de KH97/AIC2B en la cadena de transducción de señales de IL-3, IL-5 y GM-CSF, que producen diferentes necesarias. para la señal: una tiene aproximadamente 60 aminoácidos cerca de la membrana aguas arriba de Glu517, que es necesaria para la inducción de c-myc y pim-1, la otra región es una región citoplasmática de aproximadamente 140 aminoácidos de Leu623 a Ser763; es Ras, necesaria para la activación de Raf y MAP (proteína quinasa activada por mitógenos) y la inducción de c-fos y C-jun. Las cadenas alfa y beta de HGM-CSFR no tienen el dominio catalítico de ninguna enzima conocida. , la transfección de HGM-CSFRα Los resfriados en células Ba/F3 con cadenas β se asocian con elevaciones sostenidas en los niveles de C-Myc y pim-1. La transfección de cadenas α y β de GM-CSF en líneas de linfocitos de ratón puede inducir la fosforilación de tirosina de varias proteínas en los linfocitos y provocar una respuesta de proliferación. La transfección de las cadenas α y β * * * en células NIH3T3 de ratón para expresar el receptor de alta afinidad GM-CSFR puede fosforilar rápidamente la tirosina en la región citoplásmica de la cadena β expresada y otra proteína de 40-45 kDa en el pericardio. tres. Receptores de citocinas solubles
En el estado natural, los receptores de citocinas (R) existen principalmente en dos formas: receptores de citocinas (R) unidos a la membrana y receptores de citocinas solubles presentes en el suero y otros fluidos corporales (R). ). Las complejas actividades biológicas de las citocinas están mediadas principalmente por la unión de bases al correspondiente mCK-R, y el sCK-R tiene un significado biológico único. La relación entre los cambios en los niveles de sCK-R y determinadas enfermedades ha atraído cada vez más la atención de los estudiosos. Algunos productos de ingeniería genética de sCK-R recombinante (rsCK-R) han entrado en verificación clínica y la investigación básica sobre el mecanismo de acción, las características estructurales y la función inmune básica de sCK-R también ha logrado grandes avances.
(1) El mecanismo y las características de sCK-R
HUT102B2, MT-2, etc. son utilizados por el virus de la leucemia de células T humana tipo I (HTLV-I), las células de leucemia mieloide (HL-60, KG1) y las células infectadas por algunas líneas de células B humanas (Raji) también pueden producir sCK-R de diferentes maneras, como HUT65438. La PMC humana estimulada con PHA también produjo grandes cantidades de sCK-2R y sCK-6R in vitro.
1. La producción de sCK-R proviene principalmente de la descamación de los receptores de membrana, por lo que la disolución de las células receptoras de membrana es una forma de obtener una gran cantidad de sCK-R la mayoría de las secuencias de aminoácidos de sCK. -R son similares a mCK. La región de la membrana externa de -R es homóloga, solo faltan la región transmembrana y la región citoplasmática, pero aún puede unirse específicamente al ligando correspondiente. Además de la forma de sCK-R producida por escisión y desprendimiento de receptores de membrana, otro mecanismo para producir sCK-R es mediante el corte y empalme diferencial del ARNm del receptor para producir ARNm secretado, que se secreta directamente en la célula después de la traducción. Se ha demostrado que las células pueden contener diferentes formas del mismo ADNc de CK-R. De esta forma se pueden producir SIL-4R, cadena sIL-5Rα, cadena sIL-6Rα, sIL-7R y sG-CSFR.
2. Los efectos biológicos de sCK-R La afinidad de unión de la mayoría de sCK-R a las citoquinas correspondientes es menor que la de mCK-R. Esto puede estar relacionado con la estructura monocatenaria de SCK. -R o la falta de ciertas regiones estructurales relacionadas. Algunos receptores de SCK, como sIL-4R, tienen la misma afinidad que el mIL-4R natural y pueden unirse a los ligandos correspondientes. Incluso dosis bajas de sIL-4R pueden inhibir específicamente la proliferación celular inducida por IL-4. Los receptores SCK ejercen sus funciones inmunes únicas de muchas maneras.
(1) Como transportador de citocinas, transporta citocinas a sitios de producción relevantes en el cuerpo para producir áreas locales de alta concentración de citocinas para ejercer plenamente los efectos biológicos de las citocinas.
(2) Es la vía metabólica normal de los receptores de membrana, que favorece el retorno de las células activadas a niveles normales.
(3) Se une competitivamente al ligando correspondiente de MCK-R e inhibe los efectos biológicos mediados por mCK-R.
(B) sCK-R y la práctica clínica
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1. Aplicación clínica de la detección del nivel de sCK-R. La detección de ciertos niveles de sCK-R puede ayudar en el diagnóstico temprano de ciertas enfermedades, comprender el desarrollo y el pronóstico de la enfermedad, evaluar la función inmune y el pronóstico del paciente y también tiene cierta importancia orientadora para el tratamiento clínico.
(1) Detección de sIL-2R: en los últimos años, académicos nacionales y extranjeros han realizado muchas investigaciones sobre sIL-2R y han descubierto que los cambios en sus niveles en el suero y otros reconocimientos corporales están relacionados con El rechazo de trasplantes de órganos y las infecciones virales, tumores malignos, traumatismos, enfermedades autoinmunes y otras enfermedades clínicas están estrechamente relacionados con la condición y el curso de la enfermedad.
(2) Detección de otros sCK-R: se encontró en orina una molécula de IL-6R de 50 kDas, llamada IL-6R-SUP, que puede promover células plasmáticas de ratón inducidas por pequeñas dosis de IL-6. Crecimiento del tumor T1165. Los niveles plasmáticos de sIL-6R están significativamente elevados en pacientes con mieloma múltiple. El nivel sérico de sTNFR en pacientes con enfermedades reumáticas está anormalmente elevado y también se pueden detectar niveles altos de sTNF-R en el líquido sinovial después del trabajo, siendo los niveles en la fase activa significativamente más altos que en la fase inactiva. Sólo el TNF-R ⅱ sTNFR se puede detectar en la orina de mujeres normales, mientras que tanto el TNF-rI como el TNF-R ⅱ sTNFR se pueden detectar en la orina de mujeres embarazadas. A medida que aumenta la edad gestacional, los niveles de sTNFR aumentan gradualmente y luego disminuyen después del parto, lo que puede ser un mecanismo protector para proteger al feto del daño del TNF. También se pueden detectar niveles elevados de sTNFR en ascitis infecciosa y ascitis cancerosa en el hígado. Además, también se encontró que los niveles elevados de sTNFR estaban estrechamente relacionados con la disminución de la función renal en los pacientes.
2. Perspectivas de aplicación clínica de sCK-R La mayoría de sCK-R se une a citocinas, rompiendo la unión entre las citocinas y los receptores de membrana, inhibiendo así la actividad biológica de las citocinas. La aplicación de SCK-R proporciona un nuevo enfoque terapéutico para reducir o prevenir el daño patológico causado por citocinas inflamatorias. Los resultados experimentales en animales muestran que la inyección local de sIL-1R puede inhibir la respuesta inflamatoria mediada por IL-1. SIL-1R reduce el rechazo de trasplantes de corazón de aloinjertos en ratones y la artritis experimental y la encefalitis alérgica en ratas. SIL-1R puede inhibir significativamente la proliferación de células de la médula ósea en pacientes con leucemia mieloide aguda in vitro.
La aplicación de productos de ingeniería genética IL-1R ha comenzado a entrar en verificación clínica para el tratamiento de la artritis, la diabetes y la prevención y el tratamiento del rechazo de trasplantes de órganos. La inyección de sIL-4R en animales puede prolongar la supervivencia del injerto, inhibir GVHR y reducir las reacciones de hipersensibilidad tipo I. La aplicación de sTNFR puede reducir el daño patológico mediado por TNF en enfermedades autoinmunes y reducir el shock séptico.