El CO2 es a la vez un metabolito celular y un componente requerido por las células. Está principalmente relacionado directamente con el mantenimiento del pH del medio de cultivo. La mayoría de las células animales requieren un ambiente ligeramente alcalino, con un pH de aproximadamente 7,4. Durante el cultivo celular, a medida que aumenta la cantidad de CO2 liberado, el medio se vuelve ácido, por lo que a menudo se agrega NaHCO3 para ajustar el pH. El NaHCO3 tiende a liberar CO2 y agregar CO2 puede inhibir esta reacción.
La concentración de CO2 en la incubadora debe equilibrarse con la concentración de NaHCO3 en la solución de cultivo. El ambiente de gas de la incubadora de CO2 es generalmente 95% aire y 5% CO2.
Por lo tanto, el cultivo celular debe realizarse en una incubadora de CO2