1. Introducción al contenido de la tecnología de pruebas microbianas
Módulo 1: Proyecto Básico de Pruebas Microbianas - Descripción General de Microorganismos y Pruebas Microbianas Conocimientos Objetivos Habilidades Objetivos Conocimientos previos 1. ¿Qué son los microorganismos? 2. Características de los microorganismos 3. Contaminación de productos por microorganismos 4. Prevención y control de la contaminación 5. Tareas e importancia de las pruebas microbianas 6. Objetos de las pruebas microbianas 7. Gestión de la calidad de las pruebas microbianas 8. Tendencias de desarrollo de las pruebas microbianas Reflexiones sobre consejos de lectura : Proyecto de denominación y clasificación de microorganismos 2 Estructura morfológica Conocimiento de los microorganismos Objetivo Habilidad Objetivo Conocimiento previo 1. Bacterias 2. Actinomicetos 3. Levadura 4. Moho 5. Virus Preguntas para pensar Consejos de lectura: El pequeño comerciante de telas se convirtió en miembro de la Royal Society El fundador de microorganismos - Proyecto Pasteur Tres características fisiológicas de los microorganismos Conocimiento Habilidades objetivo Conocimientos previos 1. Nutrición de los microorganismos 2. Crecimiento de los microorganismos 3. Metabolismo de los microorganismos Preguntas para pensar Consejos de lectura: Abuso de antibióticos y seguridad alimentaria 2. Módulo Inspección microbiana Tecnología de rutina Microbiológica Código de laboratorio Proyecto de primeros auxilios de laboratorio 4 Preparación de medio de cultivo microbiano Conocimiento Objetivo Capacidad Objetivo Conocimiento previo 1. Clasificación de medios de cultivo 2. Principios básicos para seleccionar o diseñar medios de cultivo Tarea 4 1 Preparación de cultivos microbianos de uso común Pregunta básica 5 Desinfección y esterilización Conocimiento tecnológico Objetivo Capacidad Objetivo Conocimientos previos 1. Conceptos relevantes de esterilización 2. Métodos de desinfección y esterilización Tarea 5 1 Tecnología de esterilización por calor seco y esterilización de cristalería Preguntas Tarea 5 2 Tecnología de esterilización por vapor de alta presión y preguntas de pensamiento sobre esterilización de medios de cultivo Tarea 5 3 Tratamiento de desinfección de salas estériles y el uso de mesas ultralimpias Preguntas de pensamiento Tarea 5 4 Preguntas de pensamiento sobre esterilización por filtración de líquidos Tema 6 Objetivos de conocimiento de la tecnología de separación, purificación y cultivo de microorganismos Objetivos de competencia Conocimientos previos 1, Tecnología de inoculación 2, Tecnología de separación y purificación Tarea 6 1 Inoculación de microorganismos Preguntas para pensar Tarea 6 2 Aislamiento y cultivo de microorganismos puros y observación de las características de las colonias Preguntas para pensar Punto 7 Tinción microbiana y observación morfológica microscópica Conocimiento técnico Objetivos Capacidad Objetivos Conocimientos previos 1. Tecnología de microscopía 2. Tecnología de tinción Tarea 7 1 Preguntas sobre el uso de microscopios ópticos ordinarios Tarea 7 2 Preguntas sobre tinción y observación de estructuras morfológicas de bacterias Tarea 7 3 Preguntas sobre tinción y observación de estructuras morfológicas de levaduras y mohos Lectura pequeña Conocimiento: Proyecto de microscopio 8 Tecnología de conteo microbiano Conocimiento Objetivo Habilidad Objetivo Conocimiento previo 1 Determinación del número de células 2. Determinación de la biomasa celular Tarea 8 1 Preguntas de conteo directo en microscopio Tarea 8 2 Preguntas de conteo de colonias en placa Proyecto 9 Tecnología de preservación de bacterias Objetivo de conocimiento Objetivo de capacidad Conocimientos previos 1. Principios básicos de preservación de cepas 2. Métodos de preservación de cepas Tarea 9. 1 Métodos simples de conservación de cepas comúnmente utilizados en laboratorios Preguntas para pensar Tarea 9 2 Método de preservación de cepas por liofilización al vacío Preguntas para pensar Tarea 9 3 Bacterias Método de criopreservación con nitrógeno líquido de especies Pregunta para pensar Punto 10 Pruebas serológicas Conocimiento técnico Capacidad del objetivo Conocimientos previos del objetivo 1. Antígenos, anticuerpos y reacciones serológicas 2. Características y factores que influyen en las reacciones serológicas 3. Tipos básicos de reacciones serológicas Lectura pequeña Conocimiento: Proyecto de formación práctica integral sobre pruebas microbianas en el tercer módulo de anticuerpos monoclonales y productos de misiles biológicos 11 Flujo de trabajo de pruebas microbianas y conocimientos de control de calidad objetivos de capacidad objetivo Conocimientos previos 1. Flujo de trabajo de pruebas microbiológicas 2. Tareas de control de calidad de las pruebas microbianas 11 1 Análisis de un determinado resultado de prueba y redacción de un informe Preguntas para pensar Elemento 12 Conocimiento de pruebas microbiológicas de los alimentos Capacidad objetiva Objetivo Conocimientos previos 1. Descripción general 2. Colección y preparación de muestras de alimentos 3. Almacenamiento y envío de muestras de alimentos 4. Tecnología de inspección microbiológica de higiene de los alimentos 5. Tecnología de detección de bacterias patógenas en los alimentos 6. Tecnología de inspección de mohos y levaduras en los alimentos 7. Tecnología de detección rápida de microbios Tarea 12 1. Preguntas para la detección del número total de bacterias y coliformes en alimentos Tarea 12 2 Preguntas sobre la detección de esterilidad comercial de alimentos enlatados Tarea 12 3 Preguntas sobre la detección de bacterias ácido lácticas en yogur Tarea 12 4 Preguntas sobre la detección de coliformes fecales en alimentos Tarea 12 5 Detección rápida de Staphylococcus aureus en alimentos mediante el método del disco de papel Pregunta para pensar Proyecto 13 Pruebas microbiológicas de cosméticos Conocimiento Objetivos Capacidad Objetivos
Conocimientos previos estándar 1. Descripción general 2. Estándares de inspección higiénica para cosméticos 3. Recolección y preprocesamiento de cosméticos 4. Tareas de inspección bacteriana higiénica para cosméticos 13 1. Detección de Pseudomonas aeruginosa en cosméticos Preguntas Artículo 14. Inspección microbiológica Conocimiento de medicamentos Capacidad objetiva Antecedentes objetivos Conocimiento 1. Método de prueba de esterilidad de medicamentos 2. Método de prueba de límite microbiano Tarea 14 Prueba de esterilidad de inyección de cloruro de sodio al 10-9% Preguntas para pensar Tarea 14 2 Determinación del número total de bacterias, mohos y levaduras en el jarabe para la tos Preguntas para pensar Proyecto 15 Microbiología ambiental Prueba Conocimiento Objetivo Capacidad Objetivo Conocimientos previos 1. Pruebas microbiológicas de la limpieza del aire 2. Pruebas microbiológicas de la calidad del agua 3. Determinación de la biomasa microbiana en lodos activados Tarea 15 1 Bacterias en el agua potable Detección del número total y coliformes totales Preguntas para pensar Tarea 15 2 Determinación de microorganismos en el aire de fermentación taller Preguntas para pensar Tarea 15 3 Observación de la biofase de lodos activados Preguntas para pensar Apéndice Apéndice 1 Material de vidrio y lavado de uso común en laboratorios de microbiología Apéndice 2 De uso común en laboratorios Preparación de medio de cultivo Apéndice 3 Preparación de soluciones de tinción de uso común en laboratorios Apéndice 4 Normas sanitarias nacionales para productos relacionados con la producción de alimentos Apéndice 5 "Farmacopea de la República Popular China y la República Popular China" (edición de 2005) (Parte 2) Estándares de límites microbianos Apéndice 6 Estándar de higiene cosmética (GB7916-87) Referencias Con el rápido desarrollo económico y la adhesión a la OMC, mi país ha entrado de lleno en el escenario económico mundial. El comercio internacional y nacional se ha desarrollado rápidamente y el comercio de productos básicos ha aumentado rápidamente.
En las empresas de fabricación de productos, los campos de circulación y los departamentos de gestión y supervisión técnica y de calidad, existe una necesidad urgente de profesionales dedicados al control de calidad del producto, la inspección de la calidad de los productos básicos, la supervisión y gestión técnica y de calidad, etc. y calidad de los productos básicos de la escuela técnica La profesión de inspección está diseñada precisamente para adaptarse a esta nueva situación.
2. Conocimiento común sobre los microorganismos
Definición de microorganismos: Se denominan colectivamente a los organismos que son de pequeño tamaño y estructuras simples que suelen requerir un microscopio óptico y un microscopio electrónico para ver con claridad. microorganismos.
(Pero se pueden observar algunos microorganismos, como hongos, setas, Ganoderma lucidum, etc.) 1 Características: Los individuos son diminutos, generalmente <0,1mm.
La estructura es simple, incluyendo unicelular, multicelular simple y no celular. Estado evolutivo bajo.
2 Clasificación: Procariotas: Tribacterias, Trisomía. Eucariotas: hongos, protozoos, algas microscópicas.
No celulares: virus, subvirus (viroides, pseudovirus, priones). 3 Cinco características principales: tamaño pequeño y área grande; gran absorción y rápida transformación de microorganismos; fuerte crecimiento y rápida reproducción; fácil mutación y muchos tipos;
[Editar este párrafo] Grupos de microorganismos Tipos Procariotas: bacterias, actinomicetos, espiroquetas, micoplasmas, rickettsias y clamidia. Eucariotas: hongos, algas, protozoos.
No celulares: virus y subvirus. Generalmente, en los libros de texto de China continental, los microorganismos se dividen en las siguientes ocho categorías: bacterias, virus, hongos, actinomicetos, rickettsias, micoplasmas, clamidia y espiroquetas.
1 Bacteria: (1) Definición: Tipo de procariotas con células cortas y delgadas, estructura simple, pared celular resistente, reproducción por multifisión y fuerte naturaleza acuática (2) Distribución: Lugares cálidos, húmedos y rico en materia orgánica (3) Estructura: Principalmente procariotas unicelulares, con formas esféricas, bastoncillos y espirales. Estructura básica: membrana celular, pared celular, citoplasma, nucleoplasma. Estructuras especiales: cápsula, flagelos, pili y esporas. ) Reproducción: Se reproduce principalmente por fisión binaria (5) Colonia: Una sola bacteria es invisible a simple vista. Cuando una sola o un pequeño número de bacterias se reproducen en grandes cantidades en un medio sólido, se formará una colonia con una determinada estructura morfológica. formado que es visible a simple vista. La colonia de células hijas es una base importante para la identificación de especies bacterianas. Los diferentes tipos de colonias bacterianas tienen diferentes tamaños, formas, brillo, colores, dureza y transparencia. : Tipo de bacteria que crece principalmente en forma de hifas. Procariotas terrestres con fuerte reproducción de esporas (2) Distribución: en suelos ligeramente alcalinos con bajo contenido de agua, rica en materia orgánica (3) Estructura morfológica: compuesta principalmente por hifas, incluidas las intrabasales. hifas y micelio aéreo (algunos micelios aéreos pueden madurar y diferenciarse en filamentos de esporas y producir esporas) (4) Reproducción: Reproducción asexual mediante la formación de esporas asexuales Reproducción asexual Reproducción sexual (5) Colonia: en medio de cultivo sólido: seco, opaco, con una superficie densa y aterciopelada, polvo seco coloreado 3 Virus (1) Definición: Un tipo de "organismo no celular" compuesto por unos pocos componentes como ácidos nucleicos y proteínas, pero su supervivencia debe depender de las células vivas (2) Estructura: proteína. cápside y ácido nucleico (el ácido nucleico es ADN o ARN) (3) Tamaño: el diámetro general es de aproximadamente 100 nm, el virus más grande tiene un diámetro de 200 nm, el virus vaccinia, y el virus más pequeño tiene un diámetro de 28 nm, el poliovirus (4) Proliferación: una característica importante de las actividades vitales de los virus es el parasitismo. Los virus sólo pueden vivir dentro de ciertos tipos de células vivas.
Y utilizar el entorno y las materias primas de la célula huésped para replicarse rápidamente y aumentar el valor. En estado no parasitario, es cristalino y no puede realizar actividades metabólicas independientes.
Tome el fago como ejemplo: Adsorción → Inyección de ADN → Replicación, síntesis → Ensamblaje → Liberación [Editar este párrafo] Características de los microorganismos 1. Composición química de los microorganismos C, H, O, N, P, S y Otros elementos 2. Nutrientes para microorganismos 1 Agua y sales inorgánicas 2 Fuente de carbono: Cualquier fuente de nutrientes que pueda proporcionar los elementos de carbono necesarios para el crecimiento y reproducción de los microorganismos Rol 3 Fuente de nitrógeno: Cualquier fuente de nutrientes que pueda proporcionar el nitrógeno necesario elementos para microorganismos Función: Se utiliza principalmente para la síntesis de proteínas, ácidos nucleicos y metabolitos que contienen nitrógeno 4 Energía: Nutrientes o energía radiante que pueden proporcionar la fuente de energía inicial para las actividades de la vida microbiana Clasificados según la fuente de carbono y la energía: 5 Factores de crecimiento. : Trazas indispensables para el crecimiento microbiano. Los microorganismos que pueden causar enfermedades en humanos y animales debido a la materia orgánica se denominan microorganismos patógenos. Hay ocho categorías principales: 1. Hongos: causan enfermedades de la piel. Infección en tejidos profundos.
2 Actinomicetos: infecciones de piel y heridas. 3 espiroquetas: enfermedades de la piel, infecciones de la sangre como sífilis, leptospirosis.
4 Bacterias: enfermedades de la piel, supuraciones, infecciones del tracto respiratorio superior, infecciones del tracto urinario, intoxicaciones alimentarias, sepsis, enfermedades infecciosas agudas, etc. 5 Rickettsia: tifus, etc.
6. Clamidia: tracoma, infección del tracto urogenital. 7 virus: hepatitis, encefalitis japonesa, sarampión, sida, etc.
8 Micoplasma: neumonía, infección del tracto urinario. Hay decenas de miles de especies de microorganismos en el mundo biológico, la mayoría de los cuales son beneficiosos para los humanos, mientras que sólo un pequeño número puede causar enfermedades.
Algunos microorganismos no suelen ser patógenos pero pueden provocar infección en circunstancias concretas, lo que se denomina patógenos oportunistas. Pueden causar deterioro y corrupción de los alimentos. Precisamente porque descomponen los objetos naturales pueden completar el ciclo material de la naturaleza.
El papel de los microorganismos Uno de los impactos más importantes de los microorganismos en los seres humanos es la prevalencia de enfermedades infecciosas. El 50% de las enfermedades humanas son causadas por virus.
Los datos publicados por la Organización Mundial de la Salud muestran que la tasa de morbilidad y mortalidad de las enfermedades infecciosas ocupa el primer lugar entre todas las enfermedades. La historia de los microorganismos que causan enfermedades humanas es también la historia de la lucha constante de la humanidad contra ellos.
La humanidad ha logrado grandes avances en la prevención y el tratamiento de enfermedades, pero continúan ocurriendo infecciones microbianas nuevas y reaparecidas, y una gran cantidad de enfermedades virales, como una gran cantidad de enfermedades virales, aún carecen de eficacia. medicamentos terapéuticos.
Los mecanismos causantes de algunas enfermedades no están claros.
El abuso de una gran cantidad de antibióticos de amplio espectro ha creado una fuerte presión de selección, provocando que muchas cepas muten, lo que lleva al desarrollo de resistencia a los medicamentos, y la salud humana se enfrenta a nuevas amenazas. Algunos virus segmentados pueden mutar mediante recombinación o recombinación. El ejemplo más típico es el virus de la influenza.
En cada pandemia de gripe, los virus de la gripe mutan a partir de las cepas que causaron infecciones anteriores. Esta rápida mutación crea grandes obstáculos para el diseño y el tratamiento de vacunas. La aparición de Mycobacterium tuberculosis resistente a los medicamentos ha provocado que la infección tuberculosa que había estado casi controlada se haya extendido por todo el mundo.
Los microorganismos vienen en todas las formas y formas, algunos de los cuales son putrefactos, provocando cambios indeseables en el olor y la estructura de los tejidos de los alimentos. Por supuesto, algunos microorganismos son beneficiosos y se utilizan en la producción de queso, pan, encurtidos, cerveza y vino.
Los microorganismos son tan pequeños que hay que verlos a través de un microscopio ampliado aproximadamente 1000 veces. Por ejemplo, en el caso de bacterias de tamaño mediano, 1000 de ellas solo pueden formar una oración cuando se apilan juntas.
3. Detección microbiana
Reglas operativas para el recuento de mohos y levaduras 1 Equipos y materiales 1.
1 Termostato: 25~28℃. 1.
2 osciladores. 1.
3 escalas. 1.
4 Microscopio. 1.
Erlenmeyer de 5 tapones: 300mL. 1.
6 tubos de ensayo: 15mm*150mm. 1.
7 placas de Petri: 9cm de diámetro. 1.
8 pipetas: 1mL y 10mL. 1.
Lámpara de 9 alcoholes. 1.
10 diapositivas. 1.
11 Cubreobjetos. 1.
12 Tarros. 1.
13 Bolsa de papel Kraft: Esterilizada a 121°C durante 20 minutos. 1.
14 Cucharas, cuchillos, etc. de metal. 1.
Gradilla para 15 tubos de ensayo. 1.
16 vacunas. 1.
17 Borrador***. 2 Medios de cultivo y reactivos 2.
1 Medio agar patata-dextrosa, más antibióticos, según GB 4789. 4 de 28.
79 reglamentos. 2.
2 Rojo bengala medio: según GB 4789. 4 sobre 28.
81 reglamentos. 2.
3 Agua destilada esterilizada. 2.
4 Etanol. 3 Siga el paso 3.
1 Muestreo: Al realizar el muestreo se debe prestar especial atención a la representatividad de la muestra y a evitar la contaminación durante el muestreo. Primero prepare recipientes de esterilización y herramientas de muestreo, como bolsas o frascos de papel kraft esterilizados, cuchillos o cucharas de metal, etc.
A partir de la encuesta de higiene se toman muestras representativas. Las muestras deben inspeccionarse lo antes posible después de su recolección; de lo contrario, deben colocarse en un lugar seco a baja temperatura.
Las muestras de grano (incluido el grano almacenado en depósitos de grano, almacenes de grano o pequeñas cantidades de grano almacenado en los hogares) se pueden recolectar en puntos fijos en diferentes capas según el tamaño y el tipo de reservas o pilas de grano. Generalmente, se pueden dividir en tres capas y cinco capas, o tomar muestras al azar de diferentes puntos en capas y, después de mezclarlas bien, tomar aproximadamente 500 gy enviarlas para inspección. Para pequeñas cantidades de grano almacenado, se puede utilizar una cuchara de metal para tomar muestras mezcladas de las partes superior, media e inferior.
Para productos procesados con cereales (incluido arroz cocido, pasteles, pan, etc.), alimentos fermentados, leche y productos lácteos, y otros alimentos líquidos, utilice herramientas de esterilización para recoger 250 g de alimentos sospechosos de tener moho y colocarlos en contenedores esterilizados Enviar para inspección. 3.
2 Pese 25 g (o 25 ml) de la muestra de prueba mediante operación estéril, colóquelos en un matraz Erlenmeyer con tapón de vidrio que contenga 225 ml de agua esterilizada y agítelo durante 30 minutos para obtener una dilución 1:10. 3.
3. Utilice una pajita estéril para absorber 10 ml de la dilución 1:10 e inyéctela en el tubo de ensayo. Utilice una pajita estéril de 1 ml con un tubo de goma para soplar repetidamente 50 veces para dispersar por completo. las esporas de moho. 3.
4. Tome 1 mL de dilución 1:10 e inyéctelo en un tubo de ensayo que contenga 9 mL de agua esterilizada. Utilice otra pajita estéril de 1 mL para soplar y aspirar 5 veces. dilución. 3.
5 Siga la secuencia de operación anterior para realizar diluciones incrementales de 10. Después de cada dilución, utilice una pajita estéril de 1 ml según la estimación de contaminación de la muestra, seleccione 3 diluciones apropiadas, respectivamente. veces la dilución, tome 1 ml del diluyente en una placa de Petri esterilizada. Haga 2 placas de Petri para cada dilución. Luego inyecte el medio de cultivo que se ha enfriado a aproximadamente 45 °C en la placa de Petri. boca abajo durante 25 a 28 horas en la incubadora, comience a observar después de 3 días y finalmente cultive y observe durante 5 días. 3.
6 Método de cálculo: normalmente se selecciona una placa con un número de colonias entre 10 y 150 para el recuento. El número medio de colonias en dos placas con la misma dilución se multiplica por el factor de dilución, que es por. gramo (o mililitro). El número de mohos y levaduras contenidos en la muestra. 3.
Informe 7: El número de mohos y levaduras que contiene cada gramo (o mililitro) de alimento se expresa en unidades/g (unidades/mL).
4. ¿Cuáles son las técnicas o métodos de detección o identificación microbiana?
Observación directa a través de un microscopio.
Por lo general, bajo determinadas condiciones de cultivo (mismo medio, temperatura y tiempo de cultivo), los mismos microorganismos muestran características de colonia estables. Estas características incluyen aspectos como la forma, el tamaño, la elevación y el color de la colonia.
(Ver Figura 2-8 del Departamento 1 de Biología de la escuela secundaria "Práctica de biotecnología") Por lo tanto, el tipo de microorganismos se puede juzgar observando las características de las colonias bajo un microscopio. Utilice medios selectivos para cultivar microorganismos o proporcionar artificialmente condiciones propicias para el crecimiento de la cepa objetivo.
Los medios selectivos, como su nombre indica, permiten que tipos específicos de microorganismos crezcan al tiempo que inhiben o previenen el crecimiento de otros microorganismos. Por ejemplo, utilizar un medio de cultivo con urea como única fuente de nitrógeno puede cultivar microorganismos que puedan sintetizar ureasa; ajustar el pH en el medio de cultivo a la acidez es beneficioso para el crecimiento y la reproducción de moho (inhibiendo las actividades vitales de las bacterias), etc. .
El cultivo selectivo generalmente se juzga indirectamente observando el tipo de asimilación o ciertas características de los microorganismos. A menudo no se obtiene solo un tipo de microorganismos, sino que las características más singulares de la existencia de estos microorganismos se pueden determinar de manera aproximada. Categorizarlo.
5. ¿Cuáles son los métodos de detección para las pruebas microbianas de alimentos?
Las tiras reactivas Easy TestTMEasyTestTM utilizan el principio de reacción entre enzimas específicas y sustratos cromogénicos específicos para generar bacterias objetivo y bacterias no objetivo. Las bacterias presentan diferentes colores específicos que se pueden distinguir claramente; el portador de cultivo de la pieza de prueba EasyTestTM está diseñado con tela no tejida y sustrato nutritivo soluble en agua, que tiene buena absorción de agua y puede absorber rápidamente el líquido de prueba, de modo que la Los microorganismos se pueden distribuir de forma automática y uniforme. En la tela textil, se crea un área de mezcla fija para la solución de prueba y el sustrato nutritivo. La tira reactiva EasyTestTM es un producto desechable y listo para usar, que es fácil de operar y no; Requiere mucha mano de obra para preparar los medios de cultivo, la esterilización en autoclave y la posterior eliminación de residuos. Es simple, respetuoso con el medio ambiente y, lo más importante, puede acortar eficazmente el tiempo de detección y mejorar la eficiencia de la detección. Es muy adecuado para pruebas microbianas de alimentos e higiene ambiental. escucha.
El método de prueba selecciona 100 muestras de alimentos, incluidos productos cárnicos, productos lácteos, verduras, productos de soja, frutas, alimentos fritos, pastas, bebidas, productos acuáticos, alimentos y condimentos congelados rápidamente, y utiliza estándares nacionales. Método: GB4789-2010 "Pruebas de microbiología de alimentos según el estándar nacional de seguridad alimentaria" se utilizaron como base para las pruebas. Se utilizaron piezas de prueba EasyTestTM, piezas de prueba 3MPetrifilmTM y el método de medio de cultivo tradicional estándar nacional para determinar el número total de colonias, E. número de coli y número de grupo coliforme de cada muestra. Los resultados de la pieza de prueba EasyTestTM se comparan con los resultados obtenidos por la pieza de prueba 3MPetrifilmTM y el método de cultivo tradicional en el estándar nacional, y luego la precisión y aplicabilidad de la pieza de prueba EasyTestTM. se juzgan en función de la correlación. Análisis de resultados de la prueba de colonias bacterianas totales La pieza de prueba de colonias bacterianas totales EasyTestTM utiliza TTC (cloruro de trifeniltetrazolio, un indicador redox) como sustancia reveladora de color. El TTC puede formar un trisulfuro rojo insoluble en agua después de recibir el hidrógeno generado por la cadena respiratoria de los microorganismos. La grasa bencilo y la grasa roja de trifenilmetilo formarán puntos rojos en la tela no tejida de la pieza de prueba EasyTestTM mediante la acción de microorganismos (consulte la Figura 3 para ver la distribución de colonias en la pieza de prueba EasyTestTM. Al contar los puntos rojos, la grasa roja de trifenilmetilo formará puntos rojos en la tela no tejida de la pieza de prueba EasyTestTM). Se puede obtener el número total de colonias.
Las condiciones de cultivo de la pieza de prueba de recuento de colonias EasyTestTM son 36 ± 1 ℃, 48 ± 3 h.
6. ¿Cuáles son los métodos de detección microbiológica de infecciones bacterianas?
Métodos de detección microbiológica de infecciones bacterianas: incluido el diagnóstico bacteriológico (detección e identificación de bacterias patógenas); (antígenos) y ácidos nucleicos), además de detectar anticuerpos específicos en la sangre de los pacientes.
① Diagnóstico bacteriológico: incluyendo microscopía directa, tinción bacteriana, aislamiento y cultivo. Los métodos de inspección por tinción bacteriana incluyen principalmente tinción de Gram, tinción acidorresistente y tinción fluorescente seguida de microscopía óptica.
Sin embargo, la morfología y las propiedades de tinción de muchas bacterias carecen de características obvias, y no se puede realizar un diagnóstico preciso basándose únicamente en la morfología. ② Detección de componentes de bacterias patógenas: incluida la detección de antígenos y la detección de ácidos nucleicos.
a. Los métodos comúnmente utilizados para la detección de antígenos incluyen la prueba de aglutinación en portaobjetos, la prueba de aglutinación colaborativa, la prueba de hemaglutinación indirecta, la prueba de aglutinación en látex, el inmunoensayo convectivo, la tecnología de inmunoensayo enzimático, la tecnología de inmunofluorescencia y la tecnología de etiquetado de isótopos. Estas pruebas son específicas, sensibles y simples. Incluso si el paciente toma antibióticos antes de recolectar la muestra y el cultivo bacteriano no es fácil de lograr, los antígenos bacterianos aún pueden detectarse.
b. La detección de ácidos nucleicos es una tecnología de biología molecular que se ha utilizado ampliamente en los últimos años. ③ La detección de anticuerpos es detección serológica. Las pruebas serológicas de uso común incluyen la prueba de aglutinación en portaobjetos o tubos de ensayo, la prueba de precipitación, la prueba de fijación del complemento y la prueba de aglutinación en frío, etc., que pueden seleccionarse según el tipo de bacteria patógena.
7. Qué comprobar en las pruebas de microbiología de los alimentos
Los microorganismos presentes en los alimentos se pueden dividir en dos categorías según si son nocivos para los humanos.
Un tipo son las bacterias beneficiosas, como la levadura, las bacterias del ácido láctico, etc., que se pueden utilizar para elaborar vino fino o encurtidos; el otro tipo son las bacterias dañinas, como los coliformes y otros patógenos intestinales; bacterias, que pueden causar intoxicación alimentaria o causar enfermedades infecciosas. Las pruebas microbiológicas de los alimentos contienen mucho contenido.
Entre ellos, los indicadores de contaminación bacteriana que reflejan la calidad de la higiene de los alimentos son el número total de colonias bacterianas y coliformes. La cantidad de bacterias en los alimentos generalmente se mide por la cantidad de bacterias en los alimentos por unidad (g, ml) y, a menudo, se expresa como la cantidad total de colonias.
Por un lado, el número total de colonias bacterianas se puede utilizar para controlar la limpieza de los alimentos y, por otro lado, se puede utilizar para predecir el período de almacenamiento de los alimentos. Las bacterias coliformes son indicadores de contaminación bacteriana patógena intestinal, que generalmente provienen directa o indirectamente de las heces de humanos y animales de sangre caliente.
Si se detectan bacterias coliformes en los alimentos, significa que el alimento ha sido contaminado. El número total de colonias bacterianas y bacterias coliformes son indicadores higiénicos de los alimentos y la mayoría de los alimentos deben analizarse para ver si están calificados.
Entre ellos, el tiempo total de cultivo de colonias bacterianas es de 48 horas, y el tiempo de detección de coliformes también es de entre 24 y 72 horas. Según los requisitos de la norma nacional, el número total de colonias bacterianas y coliformes son elementos que las empresas de alimentos deben inspeccionar al salir de fábrica.
Además de los indicadores de higiene, también es necesario analizar los alimentos para detectar bacterias patógenas (no se deben detectar bacterias patógenas), incluidos mohos y levaduras, así como salmonella, shigella, Staphylococcus aureus, etc. Hay muchos tipos de bacterias patógenas y no todos los alimentos se analizan para detectar las mismas bacterias patógenas. Las bacterias patógenas comúnmente analizadas incluyen Salmonella, Shigella, Staphylococcus aureus y Streptococcus hemolítico, etc.
Por supuesto, los elementos de prueba también son diferentes según la categoría del producto. Generalmente, los elementos de prueba se pueden determinar de acuerdo con los estándares higiénicos de los productos y materias primas.