Precauciones de funcionamiento específicas de la cromatografía de capa fina

Embalaje

El homogeneizado utilizado para el pavimento no debe ser ni demasiado grueso ni demasiado fino: si es demasiado grueso, el tablero será propenso a formar capas por arrastre o parada; Si es demasiado delgada, la tabla se volverá delgada después de que el agua se evapore. La superficie será rugosa. La proporción de homogeneizado es generalmente gel de sílice g: agua = 1:2~3, gel de sílice g: solución acuosa de carboximetilcelulosa sódica = 1:2. El tiempo para moler el homogeneizado se determina según la experiencia y está relacionado con la humedad del aire. Generalmente se juzga por el goteo del homogeneizado al levantar el mortero. Cuanto más espeso es el homogeneizado, más difícil es que gotee. Además de afectar la suavidad de la placa, el espesor del homogeneizado también afecta el espesor del recubrimiento de la placa, lo que afecta aún más la cantidad de muestra cargada. Si el revestimiento es fino, el patrón se sobrecargará fácilmente; si el revestimiento es grueso, el color no será evidente. Normalmente, la calidad de la placa no tiene un gran impacto en la identificación de capas finas. El mayor impacto es la preparación del agente revelador y la saturación del sistema de revelado.

Manchado

Intenta utilizar pequeños tubos quitamanchas. Si tiene suficiente tolerancia, lo mejor es utilizar sólo tubos de 1 μl. De esta forma, las manchas de los puntos son más pequeñas y el cromatograma ampliado tiene buena separación y colores claros. Cuanto menor sea el contenido de agua de la solución de muestra, mejor. Cuanto mayor sea el contenido de agua de la solución de muestra, mayor será la dispersión de las manchas. Los disolventes de las soluciones de muestra son generalmente etanol absoluto, metanol, cloroformo y acetato de etilo. Utilice un secador de pelo para secar la tabla de capa fina o colóquela en una secadora para que se seque.

Preparación del agente revelador

Seleccione un dispositivo de medición adecuado y transfiera cada componente del disolvente a un embudo de decantación. Agite vigorosamente para mezclar bien la mezcla. Déjelo a un lado. tomar el volumen. Una capa grande actúa como agente esparcidor. Nunca debe verter la solución de cada componente en el cilindro de desarrollo y agitar el cilindro de desarrollo para preparar el revelador. La mezcla desigual y la imposibilidad de separar el disolvente de desarrollo provocarán un fallo total de la cromatografía. La precisión proporcional de cada componente de disolvente tiene diferentes requisitos para diferentes tareas de análisis. Intente lograr la mayor precisión de los instrumentos de laboratorio. Por ejemplo: para tomar 1 ml de disolvente, se debe utilizar una pipeta de etiqueta única de 1 ml y la pipeta debe cumplir con los requisitos. Requisitos de medición. Se requiere certificación, aunque la mayoría de las veces no es necesaria.

Saturación del sistema de desarrollo

Generalmente, se utiliza un tanque de desarrollo de doble tanque. Un tanque se usa para contener el agente revelador y el otro tanque se puede agregar con amoníaco o. ácido sulfúrico. Coloque la placa a desplegar en la plataforma entre las dos ranuras, sujétela en diagonal y cierre la tapa del depósito de expansión. Deje que el vapor del agente revelador llene el cilindro de revelado y permita que la placa de capa delgada absorba el vapor hasta alcanzar la saturación para evitar efectos de borde. El tiempo de saturación es de aproximadamente media hora. Al desplegarlo, es inevitable abrir la tapa y colocar la placa de TLC en el agente revelador. Sin embargo, esto tiene poco efecto en el equilibrio de adsorción entre la placa de TLC y el vapor. Por supuesto, la acción debe ser lo más ligera y rápida posible. .

Control de temperatura y humedad

La temperatura y la humedad tienen una gran influencia en la capa fina. Bajo la premisa de no congelarse, generalmente cuanto más baja sea la temperatura, mejor será la separación. Las separaciones más difíciles deben separarse a bajas temperaturas, como los ginsenósidos. Se estima que la influencia de la humedad afecta principalmente la capacidad de adsorción de la placa de capa delgada, lo que resulta en cambios en la selectividad (el factor de capacidad debe determinarse en función de las condiciones reales). La temperatura se controla mediante un acondicionador de aire o un congelador, y la humedad se controla colocando ácido sulfúrico de la concentración correspondiente en otro tanque de expansión.

Revelado del color

Lo más importante para pulverizar revelador de color es tener un buen atomizador.