1. Después de agregar etanol absoluto al tampón de lavado, la concentración final es de casi un 70% de solución de etanol en el ADN precipitado, debido a la presencia de demasiadas impurezas salinas, afecta la digestión enzimática y otras. reacciones del ADN. El tampón de lavado se utiliza para eliminar estas impurezas de la sal. 2. Utilice etanol absoluto para precipitar el ADN. Este es el método más utilizado para precipitar el ADN en experimentos. en cualquier proporción, y el etanol no interactuará con los ácidos nucleicos. Cualquier reacción química es muy segura para el ADN, por lo que es un precipitante ideal para una existencia estable de ADN en estado hidratado. elimina las moléculas de agua alrededor del ADN, lo que hace que el ADN pierda agua y se polimerice fácilmente. Generalmente en el experimento, se mezcló 2 veces el volumen de etanol absoluto con ADN y el contenido final de etanol representó aproximadamente el 67%. También se puede utilizar etanol en lugar de etanol absoluto (debido a que el precio del etanol absoluto es mucho más alto que el del 95% de etanol es caro. Sin embargo, agregar 95% de etanol aumenta el volumen total y el ADN se disuelve hasta cierto punto en la solución). por lo que la pérdida de ADN también aumenta, especialmente cuando se utilizan múltiples precipitaciones con etanol, el rendimiento se verá afectado. Un compromiso es usar etanol al 95% en lugar de etanol anhidro al precipitar el ADN por primera vez y usar etanol absoluto en el paso de precipitación final. También puede utilizar 0,6 veces el volumen de alcohol isopropílico para precipitar selectivamente el ADN. Generalmente, dejarlo a temperatura ambiente de 15 a 30 minutos es suficiente. Si no agrega etanol absoluto, el ácido nucleico no puede precipitar y se desechará con el. 3. El dodecilsulfato de sodio (dodecilsulfato de sodio) se convierte en dodecano cuando encuentra iones de potasio (PDS), los iones de potasio reemplazan a los iones de sodio en SDS para formar PDS insoluble y la alta concentración de sal hace que la precipitación sea más completa. Todo el mundo sabe que al SDS le gusta específicamente unirse a las proteínas, con un promedio de dos aminoácidos combinados con una molécula de SDS, la gran cantidad de precipitación producida por el reemplazo de iones de potasio y sodio precipitará naturalmente la mayoría de las proteínas. Lo feliz es que el ADN genómico de E. coli también es precipitado por ***. Este proceso no es difícil de imaginar, porque el ADN genómico es demasiado largo y el PDS precipita fácilmente el ADN largo, aunque el SDS no se une al ADN. Cabe señalar que se agrega ácido acético para neutralizar el NaOH, porque las condiciones sexuales alcalinas a largo plazo romperán el ADN, por lo que debe neutralizarse una vez que el ADN genómico se rompe, siempre que el fragmento tenga un tamaño de 50 a 100 kb. , no hay forma de precipitarlo con PDS. Por lo tanto, el tiempo de tratamiento con álcali debe ser corto y no agitar vigorosamente, de lo contrario siempre se mezclará una gran cantidad de ADN genómico con el plásmido final.