Con el desarrollo de la tecnología de mapeo genético, la connotación de su concepto también se profundiza constantemente. El mapeo genético temprano se refiere principalmente a distinguir si los genes están vinculados y si están ubicados en autosomas o cromosomas sexuales. Actualmente, incluye mapeo genético para comprender la posición relativa de un gen en un grupo de enlace y mapeo físico para comprender la ubicación específica de un gen en un cromosoma. El contenido del mapeo incluye genes QTL y marcadores genéticos moleculares (principalmente loci microsatélite, RFLP, etc.), además de genes de rasgos de calidad. Existen muchos métodos para la localización cromosómica de genes, entre los cuales los principales métodos físicos incluyen la hibridación in situ por fluorescencia tradicional (FISH) y la hibridación por radiación (RH). Aunque la tecnología FlSH puede localizar cromosomas genéticos, desde un punto de vista molecular, su trabajo de posicionamiento sigue siendo relativamente difícil. La precisión del posicionamiento RH es mayor que la del posicionamiento FlSH. Es un nuevo método de bajo costo y alta eficiencia para el posicionamiento de cromosomas genéticos. La genética juega un papel cada vez más importante en la investigación.
Entonces el mapa genético se puede analizar desde una dirección:
Por ejemplo, rice:/periodic _ xmdxxb200706023.aspx.
Cerdo: Actualmente, las líneas celulares híbridas somáticas utilizadas para el mapeo físico de genes porcinos incluyen: ¿Cerdo francés? El Panel de clonación por hibridación por radiación (Panel de hibridación por radiación porcina INRA-Minnesota) fue desarrollado por el Panel de hibridación de células somáticas (SCP) de cerdo x roedor, la Academia de Ciencias Agrícolas y la Universidad de Minnesota, IMpRH), el Panel de hibridación por radiación Susscrofa de Japón (SSRH), Roslin, UK Research y la Universidad de Cambridge construyeron conjuntamente un panel de hibridación por radiación para cerdos (Li Lin, 2004). Los dos primeros se utilizan ampliamente en la actualidad. La similitud entre los dos es que ambos se basan en la tipificación por PCR, lo cual es conveniente y rápido.
¿Cerdo? El panel híbrido somático de roedores fue construido por el Instituto Francés de Ciencias Agrícolas (Labatoire de Géné tique celluare, INRA, Castanet-Tolosan, Francia) y consta de 27 líneas celulares híbridas (Yerle et al., 1996). Las células donantes utilizadas en las placas de hibridación de células somáticas son linfocitos o fibroblastos porcinos, que luego se combinan con la línea celular deficiente en xantina fosforribosiltransferasa (HPRT-) de hámster chino (línea celular híbrida 1-19) y la línea celular deficiente en timidina quinasa de ratón (TK-). Se fusionaron líneas celulares (20-27 líneas celulares híbridas) y finalmente se identificaron mediante métodos citogenéticos. Usando PCR para detectar los resultados del genotipado de un determinado gen en 27 líneas celulares híbridas, y luego realizando el análisis correspondiente usando los cromosomas de cerdo o fragmentos de cada especie de células híbridas, se pueden obtener los resultados de la ubicación regional del gen en los cromosomas de cerdo (Chevaliet et al., 1997). Este método sólo puede asignar genes a una ubicación cromosómica aproximada.
La placa de clonación híbrida por radiación porcina IMpRH fue construida por la Academia Francesa de Ciencias Agrícolas y la Universidad de Minnesota (Yerle et al., 1998). Después de 7000 rads de irradiación, se fusionaron células donantes de fibroblastos o linfocitos de cerdo con células receptoras de hámster chino para obtener 152 clones de células híbridas. Después de la identificación citogenética del tamaño y longitud de los cromosomas o fragmentos en cada línea celular híbrida mediante tecnología PRINS utilizando FISH (pequeños elementos repetidos intercalados) como sonda y SINE específicos como cebadores, se obtuvo un conjunto de genes que cubren todo el genoma porcino. placa de hibridación por radiación (Yerle et al., línea celular híbrida 198+08). Hawken et al. (1999) utilizaron IMpRH para analizar más de 900 marcadores I tipo I y II para construir un mapa de hibridación por radiación de todo el genoma porcino de primera generación.
El mapa * * * consta de 128 grupos de enlace (el valor mínimo LOD de las coordenadas es 4,8) y 59 marcadores individuales, que cubren todos los autosomas y cromosomas X, con una resolución teórica de 145 kb, una tasa de supervivencia promedio del 29,3% y un promedio de aproximadamente 70 kb/cR. La construcción del primer mapa de hibridación por radiación porcina proporcionó abundantes coordenadas de ADN para el posicionamiento de nuevos marcadores de ADN y sentó las bases para la construcción de un mapa físico de alta resolución del genoma porcino. Por lo tanto, este conjunto de placas de clonación ha sido ampliamente utilizado. . Dado que el método RH es un método de posicionamiento basado en una combinación de tecnología de detección de tipificación por PCR e Internet, para la placa IMpRH de 118 clones, los resultados del análisis se pueden enviar en un día si los cebadores son específicos y la eficiencia de amplificación es alta. y las condiciones son estables Vaya al sitio web correspondiente y obtenga el resultado final del posicionamiento, por lo que es rápido, sencillo, muy preciso en el posicionamiento y los resultados son comparables. En comparación con los mapas de ligamiento, las placas de clones de hibridación por radiación pueden posicionar y organizar marcadores con relativa precisión, y pueden agrupar y clasificar marcadores que son difíciles de distinguir dentro de 5 cM en los mapas de ligamiento genético (Rohrer et al., 1996; Hawken et al., 1999; Li Lin, 2004). Además de localizar marcadores de ADN específicos, con el enorme crecimiento de la base de datos de tecnologías ecológicamente racionales, el método RH también muestra amplias perspectivas de aplicación en la localización de tecnologías ecológicamente racionales. Cirera et al. (2003) mapearon con éxito 214 EST de la biblioteca de ADNc del intestino delgado utilizando IMpRH. Tuggle et al. (2003) también utilizaron IMpRH para localizar 64 EST expresadas principalmente en órganos reproductivos de cerdas.
Espero que esto ayude