Objetivo: Establecer un método para la determinación de disolventes residuales en cefpiramida. ¿El método utiliza cromatografía de gases, utilizando PEG? Columna empaquetada de 20 M, N2 como gas portador, temperatura de la columna 100 °C, n-butanol como estándar interno, detección FID. Resultados La acetona, el acetonitrilo y la dimetilformamida mostraron buenas relaciones lineales con la correspondiente relación de área de pico de disolvente/pico de estándar interno en el rango de 0,500 ~ 2,000 μg, 0,041 ~ 0,1,64 μg y 0,088 ~ 0,352 μg respectivamente (r respectivamente son 0,9997, 0,9994 y 0,99994). ). Las recuperaciones promedio de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida fueron 101,0, 97,7 y 100,4, respectivamente, y las RSD de las áreas de picos de inyección repetida fueron 0,31, 1,28 y 0,73 (n = 5), respectivamente. Conclusión El método establecido es altamente específico, simple y preciso, y puede usarse para la determinación de solventes residuales en cefpiramida.
Cromatografía de gases; disolvente residual de cefpiramida; acetona; acetonitrilo; dimetilformamida
Objetivo establecer un método para la determinación del contenido de disolvente residual en cefpiramida. Método El análisis se realizó en una columna recubierta de polietilenglicol. 20 M, temperatura de la columna 100°C, gas portador N2. ¿Resultados para acetona, acetonitrilo y N,N? La dimetilformamida mostró una relación lineal en el rango de 0,500~2,000 μg, 0,041~0,164 μg y 0,088~0,352 μg respectivamente (r=0,9997, 0,9994 y 0,9999). Acetona, acetonitrilo y N,N? La dimetilformamida fue 101,1, 97,7 y 100,4 respectivamente, y las desviaciones estándar relativas de mediciones repetidas fueron 0,31, 1,28 y 0,73 (n=5) respectivamente. Conclusión Este método es muy específico, simple y preciso, y puede usarse para el control de calidad de las materias primas de cefpiramida.
Palabras clave: GC; cefpiramida; disolvente residual; acetonitrilo; Dimetilformamida
La cefpiramida es un antibiótico cefalosporínico de amplio espectro de tercera generación que puede procesarse posteriormente en sal de sodio o usarse directamente en clínica. La cefpiramida tiene una fuerte actividad antibacteriana contra las bacterias Gram positivas, las bacterias negativas y las bacterias anaeróbicas. Tiene una fuerte actividad antibacteriana contra las β? La lactamasa tiene buena estabilidad y buen valor clínico [1]. Dado que diferentes fabricantes utilizan diferentes procesos y disolventes para producir cefpiramida, y los tipos de disolventes residuales también son diferentes, es necesario desarrollar métodos adecuados para una determinación precisa. Este estudio se basa en el producto cefpiramida producido por Baiyunshan Chemical Pharmaceutical Factory. En el proceso productivo se utilizan los solventes Clase II acetonitrilo y dimetilformamida y el solvente Clase III acetona estipulados por ICH y deben ser monitoreados en los estándares de calidad. La literatura [2-3] ha informado sobre el método de determinación de disolventes residuales en variedades similares de cefpiramida sódica, pero debido a los diferentes tipos de disolventes residuales, no se puede citar directamente. La cromatografía de gases descrita en este artículo es muy específica y puede determinar simultáneamente el contenido de tres disolventes en el mismo experimento sin necesidad de programar la temperatura. El método es simple y preciso.
1 Instrumento y test de reactivos
¿Shimadzu GC? ¿Cromatógrafo de gases 14A; PEG recubierto producido por Dalian Park Jung Su Company? Columna de vidrio empacado de 20M (3,2 mm×2 m). La acetona y la dimetilformamida (ambos son reactivos analíticamente puros, el contenido es 100,0), el acetonitrilo (reactivos cromatográficamente puros, el contenido es 100,0) y las materias primas de cefpiramida son proporcionadas por Guangzhou Baiyunshan Chemical Pharmaceutical Factory, y el nitrógeno de alta pureza lo proporciona Guangzhou. Producción de fábricas de gas.
2 Métodos y resultados
2.1 Condiciones cromatográficas y métodos de determinación
¿PEG recubierto? Columna de vidrio llena de 20 M, nitrógeno como gas portador, caudal de 10 ml/min, temperatura de entrada de 210 °C, temperatura de la columna de 100 °C y temperatura del detector de ionización de llama de hidrógeno de 250 °C.
Pesar una cantidad adecuada de n-butanol y añadir agua para preparar una solución de 50 μg/ml como solución de estándar interno. Pese con precisión aproximadamente 100 mg de sustancia de referencia acetona, 8 mg de sustancia de referencia acetonitrilo y 18 mg de sustancia de referencia dimetilformamida, colóquelos en un matraz volumétrico de 100 ml, agregue la solución de estándar interno para disolver y diluir hasta la marca, agite bien y el control se solución obtenida.
Pese con precisión aproximadamente 65438 ± 0 g de cefpiramida, colóquelo en un tubo de ensayo con tapón, agregue con precisión 5 ml de solución de estándar interno, agite vigorosamente durante 5 minutos, filtre y tome el filtrado continuo como solución de prueba. Mida con precisión 65.438 ± 0 μl de la solución de control y de la solución de prueba respectivamente, inyéctelas en el cromatógrafo de gases, registre el cromatograma y calcule el área del pico utilizando el método del estándar interno.
2.2 Parámetros cromatográficos, límite de detección y límite de cuantificación
El cromatograma de la solución problema de cefpiramida se muestra en la Figura 1. Las eficiencias máximas de la columna de acetona, acetonitrilo, n-butanol (estándar interno) y dimetilformamida son 850, 800, 600 y 1000 respectivamente, y los coeficientes de cola son 1,4, 1,2, 1,3 y 6544 respectivamente. Los límites de detección (SNR 3:1) de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida fueron 1 ng, 0,5 ng y 0,5 ng respectivamente, y los límites de cuantificación (SNR 10:1) fueron 2 ng, 1 ng y 2 ng respectivamente.
A. Acetona; b. Acetonitrilo; c. n-Butanol; d. Dimetilformamida
Figura 1 Cromatograma de gases residuales en cefpiramida. Figura 1 Cromatograma de GC de disolventes residuales en materias primas
2.3 Prueba de precisión
Área del pico y pico del estándar interno de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida Las desviaciones estándar relativas de las relaciones de área son 0,365438± 0, 65438±0,28 y 0,73 respectivamente. Para la misma muestra homogénea, los resultados se midieron tres veces con diferentes instrumentos y diferentes operadores. La reproducibilidad calculada de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida fue 65438 ± 0,5, 65438 ± 0,9 y 65438 ± 0,7 respectivamente.
2.4 Relación lineal y rango
Pese con precisión las sustancias de referencia de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida respectivamente, utilice una solución de estándar interno para preparar cuantitativamente según el método de "2.1" y diluya hasta Las concentraciones másicas de acetona son 500, 750, 1000 y 1500 μg/ml respectivamente. Inyecte con precisión soluciones de 41, 61,5, 82, 123 y 164 μg/ml de acetonitrilo y 88, 132, 176, 264 y 352 μg/ml de dimetilformamida. Resultados Las ecuaciones de regresión lineal del volumen de inyección (m) y la relación entre el área del pico de disolvente a medir y el área del pico del estándar interno (a) son, respectivamente, acetona a 1 = 9,4826 m 1-0,2456 (r = 0,9997) y acetonitrilo A2. = 13,4495m2 0,0366 . Los rangos de medición de cantidades de muestra para acetona, acetonitrilo y dimetilformamida son de 0,500 a 2000 μg, de 0,041 a 0,164 μg y de 0,088 a 0,352 μg, respectivamente.
2.5 Prueba de tasa de recuperación
De acuerdo con el método de "2.1", utilice la solución de estándar interno para preparar la solución de control, la solución de prueba, el producto de prueba y la solución de control, acetona, acetonitrilo. y dihidrógeno. Las concentraciones de metilformamida son equivalentes a 80, 100 y 120 de la solución de control respectivamente. Calcular las cantidades de adición de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida según la ley.
Acetona: 100.1, 104.6, 100.5, 101.4, 102.9, 99.3, 65438.
Acetonitrilo: 97,1, 97,5, 96,1, 99,8, 96,6, 96,3, 99,0, 99,2, 97,9, el valor medio es 97,7 (RSD 1,40.
Dimetilformamida: 101,2, 99,3, 100,8 , 101,4, 99,6, 99,3, 98,6
2.6 Determinación de la muestra
Se midieron tres lotes de muestras de cefpiramida según el método "2.1" y el contenido de acetona fue 0,015, 0,013, 0,011. Los contenidos de acetonitrilo son 0,013, 0,011 y 0,010 respectivamente. Los contenidos de dimetilformamida son 0,005, 0,002 y 0,001, respectivamente, que están en línea con los límites recomendados por ich (0,5, 0,041, 0,088).
3.1 Los tres disolventes tienen buena solubilidad en agua. La muestra de cefpiramida se agita vigorosamente con agua para formar una suspensión de partículas extremadamente finas, que pueden garantizar la disolución del disolvente residual.
3.2 La dimetilformamida es un disolvente de alto punto de ebullición y su solución acuosa es difícil de medir mediante muestreo del espacio de cabeza. Además, la inyección directa de dimetilformamida es perjudicial para la columna capilar, por lo que se utiliza una columna empaquetada para la inyección directa. . Ley.
3.3 En este experimento, la medición a temperatura constante de la columna favorece la estabilidad de la medición y el método estándar interno favorece la reducción del error de la operación de inyección.
3.4 Los experimentos anteriores muestran que el cromatógrafo de gases tiene una fuerte especificidad y puede medir simultáneamente el contenido de tres disolventes residuales bajo la condición de que la temperatura de la columna permanezca sin cambios. Este método es rápido y preciso y se puede utilizar para controlar los disolventes residuales de cefpiramida.
Referencia
Zhou Le, Wang Minggui. Efectos antibacterianos in vitro de la cefpiramida [J]. Chinese Journal of Antibiotics, 1997, 22 (4): 275-278.
Wang, Zhou Hailun, et al. Determinación del residuo de disolvente en cefpiramida sódica mediante el método del espacio de cabeza [J]. Journal of Sun Yat-sen University: Natural Science Edition, 2004, 43 (4): 122-. 124 .
Li Hongtao, Yang Min, Wan Jiangling, et al. Determinación de residuos de disolventes orgánicos en cefpiramida sódica mediante cromatografía de gases y microextracción en fase sólida en espacio de cabeza [J]. 1): 37-39.
[4]Comité Nacional de Farmacopea. Farmacopea de la República Popular China: Parte 2[S]. Beijing: Chemical Industry Press, 2005: Apéndice V E y Apéndice VIII P.
Análisis cromatográfico de gases del disolvente residual cefpiramida
Objetivo Establecer un método para la determinación del contenido de disolvente residual en cefpiramida. Método El análisis se realizó en una columna recubierta de polietilenglicol. 20 M, temperatura de la columna 100°C, gas portador N2. ¿Resultados para acetona, acetonitrilo y N,N? La dimetilformamida mostró una relación lineal en el rango de 0,500~2,000 μg, 0,041~0,164 μg y 0,088~0,352 μg respectivamente (r=0,9997, 0,9994 y 0,9999). Acetona, acetonitrilo y N,N? La dimetilformamida fue 101,1, 97,7 y 100,4 respectivamente, y las desviaciones estándar relativas de mediciones repetidas fueron 0,31, 1,28 y 0,73 (n=5) respectivamente. Conclusión Este método es muy específico, simple y preciso, y puede usarse para el control de calidad de las materias primas de cefpiramida.
Palabras clave: GC; cefpiramida; disolvente residual; acetonitrilo; Dimetilformamida
La cefpiramida es un antibiótico de cefalosporina de amplio espectro de tercera generación que puede procesarse aún más en sodio o usarse directamente en clínica. Es eficaz contra las bacterias grampositivas y gramnegativas y las bacterias anaeróbicas tienen fuertes propiedades anti. -β? La lactamasa tiene buena estabilidad y alto valor clínico [1]. Dado que la fábrica utiliza un método solvente para producir cefpiramida y utiliza diferentes tipos de solventes residuales, también es diferente. Es necesario desarrollar un método adecuado para una determinación precisa. En este estudio, los solventes de segunda clase acetonitrilo y dimetilformamida especificados por la Organización Internacional de Armonización (ICH) y la cetona C solvente de tercera clase se utilizaron en el proceso de producción de productos de cefpiramida de Baiyunshan basados en Guangzhou Pharmaceutical. Todos deben incluirse en. estándares de calidad para el seguimiento. La literatura [2-3] informó la determinación de disolventes residuales en variedades similares de cefpiramida sódica, pero debido a los diferentes tipos de disolventes residuales que se medirán, no se pueden citar directamente. Este artículo utiliza cromatografía de gases, que tiene una gran especificidad y puede determinar experimentalmente el contenido de tres disolventes al mismo tiempo. No es tan simple y preciso como el método TPD.
1Instrumento que contiene fármacos de prueba
¿GC? ¿Cromatógrafo de gases Shimadzu 14A; revestimiento de PEG pequeño de Dalian producido por la empresa? Columna de vidrio empacado de 20m (3,2mm×2m). Sustancias de referencia de acetona y ácido retinoico (ambos reactivos analíticamente puros, contenido 100,0), sustancias de referencia de acetonitrilo (reactivos cromatográficamente puros, contenido 100,0), las materias primas son proporcionadas por Cefpiramide Chemical Guangzhou Baiyunshan Pharmaceutical Co., Ltd. y nitrógeno de alta pureza. Se produce en Guangzhou.
2 Métodos y resultados
2.1 Determinación de las condiciones cromatográficas
¿Recubrimiento con PEG? Columna de vidrio llena de 20 M, nitrógeno como gas portador, caudal 65438 ± 00 ml/min, temperatura de entrada 265438 ± 00 ℃, temperatura de la columna 65438 ± 000 ℃, temperatura del detector de ionización de llama de hidrógeno 250 ℃.
Comprobar y añadir agua para preparar una solución con un contenido de n-butanol de 50 μg/ml como solución de estándar interno. Pesar aproximadamente 65438±000 mg de sustancia de referencia acetona, aproximadamente 8 mg de sustancia de referencia acetonitrilo y aproximadamente 65438±08 mg de sustancia de referencia dimetilformamida en un matraz volumétrico de 65438±000 ml, agregar solución de estándar interno para disolver y diluir hasta la marca, agitar bien y usar. la solución como control Sabor. Pese con precisión aproximadamente 65438 ± 0 g de la muestra de prueba de cefpiramida, colóquela en un tubo de ensayo, agregue con precisión 5 ml de solución de estándar interno, agite vigorosamente durante 5 minutos, filtre y agregue el filtrado a la solución de prueba para su inspección. Extraiga con precisión el volumen de 65438 ± 0 μL de la solución de prueba y la solución de referencia respectivamente, inyéctelas en el cromatógrafo de gases, registre el cromatograma y calcule el área del pico utilizando el método del estándar interno.
2.2 Parámetros cromatográficos, límite de detección y límite de cuantificación
La solución de muestra de HPLC de cefpiramida se muestra en la Figura 1, acetona, acetonitrilo, n-butanol (estándar interno) y formiato de dimetilo. Los picos de La amida es 850, 800 y 600 respectivamente, la eficiencia de la columna es 1000, los factores de cola son 1,4, 1,2, 1,3 y 1,3 respectivamente. La resolución máxima de acetona y acetonitrilo, acetonitrilo y n-butanol y dimetilformamida está entre 3,9. de m-acetona, acetonitrilo y dimetilformamida (relación señal-ruido 3:1) son 1 ng, 0,5 ng y 0,5 ng respectivamente, y los límites de cuantificación (relación señal-ruido 10:1) son 2 ng, 1 ng y 2 ng respectivamente.
a. Acetona; b. Acetonitrilo; c. n-Butanol; d. Dimetilformamida
Figura 1 Análisis por cromatografía de gases de disolventes residuales en cefpiramida. >Figura 1 Cromatograma GC de disolventes residuales en materias primas
Precisión 2.3
Tome la solución de referencia de la muestra y repita 5 veces para medir la acetona, el acetonitrilo y las RSD del área del pico de la La relación entre dimetilformamida y áreas de pico del estándar interno fue de 0,365438 ± 0, 65438 ± 0,28 y 0,73 respectivamente. Utilizando la misma muestra, los resultados se midieron tres veces en las condiciones de diferentes instrumentos y diferentes operadores. La reproducibilidad calculada de los resultados del contenido de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida fue 65438 ± 0,5, 65438 ± 0,9 y 65438 ± 0,7 respectivamente.
2.4 Rango de relación lineal
Pesar con precisión las sustancias de referencia acetona, acetonitrilo y dimetilformamida, preparar la solución de patrón interno según el método "2.1" y diluirla hasta una concentración cuantitativa. de acetona 500, 750, 1.000, 1.500μg/mL, acetonitrilo 41.582, 1.23, 1.64μg/mL y dimetilformamida 88 Volumen de muestra de oro (m) y la relación área de pico del disolvente de prueba/área de pico estándar interno (A) Los resultados de la prueba La ecuación de regresión lineal es la siguiente: Acetona A 1 = 9,4826 m 1-0,2456 (r = 0,9997), Acetonitrilo A2 = 13,4495 m2 0,03646 (r = 0,9994), Dimetilformamida A3 = 4,3421 m3 0 Acetona, acetonitrilo y dimetilo La cantidad de muestra para metilformamida la determinación está en el rango de 0.500 ~ 2.000 μg, 0.041 ~ 0.1.064 μg y 0.088 ~ 0.352 μg
2.5 Prueba de Recuperación
Según la opción "2.1", el estándar interno La solución consiste en utilizar la solución de referencia como solución de prueba y agregar 3 partes de las soluciones de prueba de acetona, acetonitrilo y dimetilformamida respectivamente equivalentes a la concentración de 80, 100 y 120 de la solución de referencia, e inyectar muestras para medir de acuerdo con Los resultados de recuperación de muestra calculados para acetona, acetonitrilo y dimetilformamida son los siguientes:
Acetona: 100,1, 104,6, 100,5, 101,4, 102,9, 99,3, 100,0, 99,3 y 100,8, con una media de 1065438. .
Acetonitrilo: 97,1, 97,5, 96,1, 99,8, 96,6, 96,3, 99,0, 99,2 y 97,9, con una media de 97,7 (RSD 1,40).
Dimetilformamida: 101,2, 99,3, 100,8, 102,8, 101,4, 99,6, 99,3, 98,6 y 101,0, promedio 100,4 (RSD 1
2,6 muestra
Según con el método “2.1”, se midieron tres lotes de muestras de cefpiramida y los contenidos de acetona fueron 0.015, 0.013 y 0.011 respectivamente; los contenidos de acetonitrilo fueron 0.013, 0.011 y 0.010, los contenidos de grupos dimetoxiformamida fueron 0.005, 0.002 y 0.001; Los límites recomendados de ICH (0,5, 0,041 y 0,088)
3 discusiones
3.1 son tres muy buenos disolventes solubles en agua, y la muestra de Cef piramide se pasa mediante la adición de agua. Se forma una agitación muy vigorosa de la suspensión de partículas finas para garantizar que la solución residual en la solución sea
3.2 La dimetilformamida es un disolvente de alto punto de ebullición y las soluciones acuosas son difíciles de usar para el muestreo del espacio de cabeza. es más dañino para la columna capilar, por lo que se utiliza el método de inyección directa en columna.
3.3 La estabilidad medida en condiciones de temperatura constante de la columna es beneficiosa para la medición y el uso del método estándar interno es útil. Reducir los errores de operación de muestreo.
Los experimentos muestran que la cromatografía de gases con una especificidad de 3,4 o superior tiene una fuerte especificidad y puede medir simultáneamente el contenido de tres disolventes residuales bajo la condición de temperatura constante de la columna, lo cual es más rápido y forma más precisa de controlar las cefalosporinas. Métodos para disolventes residuales de pilamida.
Referencias
Zhou Le, Wang Minggui Estudio in vitro de cefpiramida [J]. 22 (4): 275-278.
[2], Yan, Yun, et al. Determinación de disolventes residuales en cefpiramida sódica mediante el método del espacio de cabeza [J]. 2004, 43 (4): 122-124.
[3] Li, Yang, Jiang Lingwan, et al. Determinación de residuos de cefpiramida sódica en diversos disolventes orgánicos mediante cromatografía de gases de microextracción en fase sólida en espacio de cabeza [ J]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2005, 25 (1): 37-39.
[4] Comité Nacional de Farmacopea de la República Popular de China: 2 [S] Prensa, 2005: Apéndice VE y Apéndice VIII P.