(1) La herramienta utilizada para cortar el gen de la amilasa es unir el gen de la amilasa y el vector en una nueva molécula de ADN y luego unir las moléculas de ADN para completar la construcción de las bacterias de ingeniería.
(2) Para identificar si el gen de la amilasa se ha insertado en Saccharomyces cerevisiae, se puede utilizar el siguiente método de detección: Para identificar si el gen de la amilasa se ha traducido a amilasa, podemos utilizar
Prueba. Las bacterias de ingeniería se inoculan en un medio de cultivo en placa sólido que contiene almidón. Después de cultivar durante un cierto período de tiempo, se agrega una solución de yodo y aparece un círculo transparente alrededor de las bacterias de ingeniería. Por favor explique el motivo de este fenómeno.
Para identificar si el gen de la amilasa está insertado en Saccharomyces cerevisiae, se puede utilizar la hibridación molecular del ADN como método de detección. Si desea identificar si el gen de la amilasa se traduce en amilasa, puede utilizar pruebas a nivel de organismo individual (o inocular las bacterias de ingeniería en un medio de cultivo en placa sólida que contenga almidón y, después de cultivar durante un período determinado, agregar una solución de yodo para comprobar si el entorno de las colonias de bacterias de ingeniería cambia. Azul, si hay un círculo transparente alrededor de la colonia de bacterias de ingeniería)
Inocular las bacterias de ingeniería en un medio de cultivo de placa sólida que contenga almidón después de cultivar durante un período determinado. agregue una solución de yodo y verifique que el área circundante de la colonia de bacterias de ingeniería no cambie a azul; aparece un círculo transparente alrededor de la colonia de bacterias de ingeniería. Las razones son las siguientes:
El gen diana (gen de amilasa de hongos filamentosos) generalmente se expresa en células bacterianas modificadas genéticamente, y las células bacterianas modificadas genéticamente sintetizan amilasa. La amilasa descompone el almidón alrededor de las colonias bacterianas modificadas, por lo que las colonias bacterianas modificadas no se volverán azules ni aparecerán como círculos transparentes.
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Debido a la falta de enzimas que descomponen el almidón, el almidón es difícil de usar y no habrá un anillo transparente a su alrededor, por lo que no es necesario descomponer completamente el almidón. .