A mediados del siglo IV a.C., el rey Felipe II de Macedonia llegó al poder y el país creció rápidamente. Cuando era joven, Felipe fue rehén en la ciudad-estado griega de Tebas y también ganó el campeonato de carreras de carros olímpicos de la antigua Grecia. Debido a que tenía un conocimiento más profundo de la situación en los estados griegos, los griegos ya no lo consideraban el rey de los bárbaros.
Después de que Felipe llegó al poder, primero se propuso fortalecer el poder real, eliminar el separatismo militar de los líderes tribales, limitar el poder del parlamento aristocrático y concentrar todo el poder militar y financiero en manos de el rey.
En el 338 a.C., Macedonia derrotó a la coalición de ciudades-estado como Tebas, Atenas y Corinto. Al año siguiente, Felipe convocó una reunión de estados y anunció la formación de una alianza entre las ciudades-estado griegas para atacar Persia. En 336 a. C., Felipe fue asesinado en la recepción de boda de su hija. El trono fue sucedido por Alejandro, el hijo de Felipe de 20 años, conocido como Alejandro Magno.
Después de conquistar Egipto, Alejandro lideró una invasión a gran escala de Asia Central, donde encontró una tenaz resistencia por parte de las tribus locales. A partir del año 330 a. C., pasó casi tres años luchando en Asia Central. Durante este período, hubo constantes objeciones entre los macedonios y los griegos para continuar avanzando hacia el este. Alejandro reprimió a los disidentes y en 327 a. C. condujo a su ejército a abandonar Asia Central e invadió la India hacia el sur, ocupando una vasta zona en el noroeste de la India. Originalmente quería marchar al valle del río Ganges y conquistar el corazón de la India, pero los soldados, cansados de la larga guerra y la nostalgia, junto con el calor, las fuertes lluvias y las enfermedades de la India, se negaron a seguir adelante. El ejército de Alejandro se amotinó y los pueblos indígenas de la India se rebelaron. Sumado a la muerte repentina de su caballo Blufalus, que lo había acompañado en las batallas desde su niñez, Alejandro se sintió descorazonado. Desesperado, ordenó retirarse de la India en el año 325 a.C.
A principios del 324 a.C., los ejércitos que se retiraban en dos grupos se reunieron en la ciudad de Opis en Babilonia. Debido al largo viaje, las tropas sufrieron grandes daños. Alejandro hizo de Babilonia su nueva capital y estableció un enorme imperio.
Antes de la expedición, Alejandro creía que sólo la nación griega era verdaderamente civilizada. Con la Expedición al Este, Alejandro gradualmente se dio cuenta de que los persas y los griegos también tenían una sabiduría y talentos sobresalientes, por lo que sus conceptos ideológicos cambiaron y creyó que todos los grupos étnicos debían vivir en armonía e igualdad. Para promover la integración de los macedonios con los persas y los orientales, Alejandro se casó con Roxana, una noble bactriana, y alentó a los macedonios a casarse con mujeres orientales. En la ciudad de Susa, Alejandro celebró una gran ceremonia nupcial. Se casó personalmente con Estatila, la hija del rey Darío III de Persia. El mismo día, unas 10.000 parejas de soldados macedonios celebraron bodas con mujeres de los países conquistados.
En Babilonia, Alejandro también organizó un enorme ejército, integrando 30.000 jóvenes persas en el ejército macedonio, y se preparó para continuar la expedición. Planeaba invadir las tierras al norte de los imperios árabe y persa, y también quería invadir nuevamente la India y conquistar Roma, Cartago y la costa occidental del Mediterráneo.
En junio de 323 a. C., Alejandro sufrió repentinamente de malaria falciparum y falleció 10 días después del inicio. Ese año solo tenía 33 años.
Debido a la repentina proximidad de la muerte, Alejandro no identificó a su sucesor, lo que resultó en una feroz competencia por el poder real. Durante la lucha, la oposición mató a su madre, su esposa y sus hijos. Sus tribus competirán por el territorio y lucharán entre sí. En 307 a. C., el Imperio macedonio, que se extendía por tres continentes de Europa, Asia y África, se dividió en el Reino de Macedonia, el Reino Seléucida y el Reino de Egipto bajo la Dinastía Ptolemaica.
La Expedición al Este de Alejandro promovió el intercambio de las culturas oriental y occidental. En las ciudades orientales aparecieron hermosas esculturas y arquitectura de estilo griego, y el conocimiento oriental de la astronomía y las matemáticas también se introdujo en Grecia y Occidente, enriqueciendo el tesoro escondido de conocimientos de Occidente. La expedición de Alejandro también abrió la ruta comercial entre Oriente y Occidente. Las docenas de ciudades que Alejandro fundó en Oriente se convirtieron gradualmente en centros comerciales.