Una revisión de la determinación del contenido de aspirina 08 Clase de farmacia 1: Ran Xianfei
Las tabletas de aspirina son antipiréticos y analgésicos de uso común y están incluidas en el segundo volumen de la Farmacopea China 2000. Edición. El método de determinación del contenido original es el método de titulación por neutralización de ácidos y álcalis. Entre los fármacos antipiréticos y analgésicos que circulan actualmente en el mercado, la mayoría contiene aspirina o utiliza aspirina como fármaco principal. Además del método de determinación del contenido original de la Farmacopea China, existen varios métodos de determinación del contenido para cada forma farmacéutica. Si se utiliza el método de fase líquida de alto rendimiento para determinar su contenido, se puede eliminar la interferencia de otras sustancias que contienen ácidos y álcalis en su determinación y se puede controlar más eficazmente la calidad de la preparación. El método es simple de operar, muy específico y tiene resultados precisos. Los modelos matemáticos también se utilizan para los cálculos, como la tecnología de reflectancia difusa del infrarrojo cercano. El principio es utilizar métodos quimiométricos para establecer la relación matemática entre los valores característicos espectrales (como la absorbancia) y el componente a medir en función del cercano. -espectro infrarrojo de la muestra concentrada estándar (denominada modelo matemático)
1. Determinación del contenido de aspirina y preparaciones de aspirina
Existen muchos métodos para determinar el contenido de aspirina y preparaciones de aspirina, incluido el método de valoración por neutralización de ácidos y álcalis
y la espectrofotometría ultravioleta, como se describe en la Método de farmacopea, método de cromatografía líquida de alta resolución, etc.
1.1 Método de valoración ácido-base de aspirina:
Valoración directa: Método: Tomar 0,4 g de este producto, pesarlo con precisión, añadir 20 ml de etanol neutro, disolver y añadir fenolftaleína. Instrucciones Líquido 3d, valorar con solución valorante de hidróxido de sodio (0,1 mol/l). Cada 1ml de valorante equivale a 18,02mg de C9H8O4
Valoración restante después de la hidrólisis: Método: Tome 1,5g de este producto, pese con precisión y agregue 50,0ml de valorante de hidróxido de sodio (0,5mol/l), y mezclar, hervir lentamente durante 10 minutos, dejar enfriar, agregar solución indicadora de fenolftaleína y titular el hidróxido de sodio restante con valorante de ácido sulfúrico (0,25 mol/l).
Método de titulación en dos pasos: tomar 10 comprimidos de este producto, pesarlos con precisión, molerlos finamente, pesar una cantidad adecuada de comprimido en polvo (aproximadamente equivalente a aspirina), añadir 20 ml de etanol neutro y agitar. para disolver la aspirina, agregue la solución indicadora de fenolftaleína durante 3 días y agregue el valorante de hidróxido de sodio (0,1 mol/l) gota a gota hasta que la solución se torne rosa. Añadir un exceso cuantitativo de 40 ml de valorante de hidróxido de sodio (0,1 mol/l), calentar en un baño de agua durante 15 minutos y agitar de vez en cuando, enfriar rápidamente a temperatura ambiente y valorar el álcali restante con valorante de ácido sulfúrico (0,05 mol/l). prostituta). Calcule el contenido en función del volumen y título del valorante consumido
1.2 Determinación de preparaciones de aspirina mediante el método de electrodo
Instrumentos y reactivos: el tipo pHs-loC se utiliza para pruebas de potencial de electrodo y acidez de solución Medidor de iones de acidez digital; el electrodo de referencia es un electrodo de calomel saturado tipo 232; todos los reactivos son de grado analítico y el agua experimental es agua desionizada destilada después del tratamiento con permanganato de potasio.
Preparación del electrodo: combinar el material portador octanoato de tribencilestaño 20 mgl cloruro de polivinilo (PVC) 0,33 g y el plastificante o-nitrofenil octil éter o. Disolver 65 g en 3 g de tetrahidrofurano (THF), agitar y aclarar, luego verterlo sobre una placa de vidrio horizontal de 40 mm × 40 mm. Después de que el THF se evapora por completo (tarda aproximadamente 1 2 horas), se obtiene una película elástica de PVC. Utilice una perforadora para cortar un disco con un diámetro de 10 mm y péguelo al extremo de la varilla del electrodo de PVC con una solución de THF que contenga 5% de PVC. Después del secado, la varilla del electrodo se llena con 0,1. solución de salicilato de sodio mol/L. La solución de referencia interna se exporta al medidor de iones utilizando un cable Ag/AgCl como electrodo de referencia interno. Antes de su uso, el electrodo debe remojarse en una solución de salicilato de sodio de 0,01 mol/l durante 2 horas para su activación. Los electrodos y las membranas de repuesto se pueden lavar si no se utilizan durante un período prolongado. Almacenar bajo atmósfera de nitrógeno. Cuando se almacena en estas condiciones, los indicadores de rendimiento del electrodo pueden permanecer estables durante al menos 5 meses.
Análisis de preparados de aspirina: Procesamiento de las muestras a analizar: La aspirina se hidroliza fácilmente para obtener iones salicilato, y la reacción es cuantitativa. Por tanto, el contenido de aspirina en la muestra se puede obtener midiendo los iones salicilato. Las tabletas de aspirina (A) y las tabletas de aspirina compuesta (B) se procesan de la siguiente manera: se muele una cantidad adecuada de medicamento (10 tabletas) hasta convertirlo en polvo y se pesa con precisión entre 1 y 1,5 g. Calentar y refluir en 25 ml de solución de NaOH 0,5 mol/L durante 1 hora, luego filtrar y ajustar el volumen a 250 ml.
Absorber 10 ml de filtrado, ajustar a pH 5,5 con ácido sulfúrico diluido y luego ajustar a 100 ml con tampón fosfato a pH 5,5 como solución de espera. Utilice el electrodo equipado para pasar el método de solución estándar y el método de adición de muestra. Determinar la concentración de iones salicilato en las muestras obtenidas tras el tratamiento antes mencionado de los fármacos A y B respectivamente, y calcular el contenido de aspirina en el fármaco mediante conversión
1.3 Determinación del contenido de comprimidos de aspirina mediante HPLC
Instrumentos y reactivos: cromatógrafo líquido de alta resolución; estación de trabajo CLASS-LC. Columna cromatográfica: columna ODS C18 (150 mm x 4,6 mm, empaque: Kromasil, tamaño de partícula: 5 um). Reactivo: Sustancia de referencia aspirina, metanol (reactivo cromatográficamente puro), ácido acético glacial, ácido clorhídrico (reactivo analíticamente puro).
Tomar 20 comprimidos de este producto, pesarlo con precisión, triturarlo finamente, pesar con precisión una cantidad adecuada (equivalente aproximadamente a 10 mg de aspirina), ponerlo en un frasco medidor de 100m1, agregar una cantidad adecuada de Solución de ácido clorhídrico de 0,1 mol/l y sonicar. Disolver la aspirina, dejar enfriar a temperatura ambiente, agregar solución de ácido clorhídrico de 0,1 mol/l para diluir hasta la marca, agitar bien, filtrar, medir con precisión 5 ml del filtrado adicional y colocarlo. En un matraz aforado de 25 m1, agregar solución de ácido clorhídrico de 0,1 mol/l y diluir hasta la marca, mezclar uniformemente, tomar 20 ul e inyectarlo en el cromatógrafo de líquidos y registrar el cromatograma. Tome otra cantidad adecuada de sustancia de referencia de aspirina, agregue una solución de ácido clorhídrico de 0,1 mol/l para disolverla y dilúyala para obtener una solución que contenga aproximadamente 20 ul de aspirina por ml, tome 20 ul y mida de la misma manera. Se calcula por el área del pico según el método estándar externo.
1.4 Determinación de trazas de ácido acetilsalicílico mediante fotometría cinética
Principio: el yodo tiene un efecto catalítico obvio en la reacción redox de Ce4+ y As, y el ácido acetilsalicílico y el yodo son propensos a reacciones de sustitución, lo que reduce la concentración de yodo y debilita el efecto catalítico del yodo. Por lo tanto, se estableció un nuevo método para la determinación de trazas de ácido acetilsalicílico mediante fotometría cinética.
Instrumentos y reactivos: espectrofotómetro 721; acidómetro PHS-3C; baño María a temperatura súper constante. 0,01 mol/lCe(SO4)2 0,013 mol/l AS2O3, 5 mol/l H2S04, 5 mg/l KI deben diluirse a 0,25 mg/l; 150 mg/l de solución estándar de ácido acetilsalicílico deben diluirse hasta la concentración requerida de estricnina al 5 %; acetato; el agua experimental es agua bidestilada.
Método experimental: agregue con precisión 1,0 ml de solución de KI de 0,25 mg/l, 1,25 ml de solución de H2S04 de 5 mol/l, 1,0 ml de solución de AS2O3 de 0,013 mol/L y ácido acético en una serie de 25 Tubos colorimétricos de ml de solución estándar de ácido salicílico (o solución de muestra), agregar agua destilada hasta la marca de 25 m1. Agite bien y colóquelo en un baño de agua a 35 ± 0,1 grados. Después de una temperatura constante, agregue 1,0 ml de 0,01 mol/l de Ce[S04)2, agite bien inmediatamente y vuelva a colocarlo rápidamente en el baño de agua. Después de reaccionar durante 10 minutos, añadir 0,5 mol/l, 0,5% de acetato de estricnina para terminar la reacción y desarrollar color con Ce4+-, colocarlo en un baño de agua hirviendo y hervir durante 3 minutos, sacarlo y enfriarlo a temperatura ambiente. Utilice una cubeta de 1 cm para medir la absorbancia A a una longitud de onda de 520 nm, utilizando agua destilada como referencia.
2． Determinación del contenido de aspirina como fármaco principal
Aunque su composición es diferente, la mayor parte de la aspirina se separa y su contenido se determina en función de sus propiedades químicas o cromatográficas.
2.1 Determinación del contenido de aspirina en comprimidos de aspirina codeína mediante cromatografía de alta resolución en fase reversa
Instrumentos y reactivos: cromatógrafo líquido HP-1050 y detector UV, instrumento integral HP3396. Sustancia de referencia fosfato de codeína, sustancia de referencia aspirina. El metanol, el acetato de sodio y el ácido acético glacial son reactivos analíticamente puros y se utiliza la preparación del compuesto de fosfato de codeína y aspirina (producto de prueba).
Condiciones de LC: columna cromatográfica ODS C18 (10 mm, 300 mm×4 mm) Fase móvil: metanol-0,03 mol/L-l de acetato de sodio (ácido acético glacial para ajustar el pH = 3,5) (1:2,5 longitud de onda de detección); : 280 nm; Caudal: 1 ml/min.
Método de medición
Prepare la solución de referencia mixta y pese con precisión el ácido fosfórico secado a 105 °C hasta obtener un peso constante. sustancia de referencia codeína. Disolver en agua y preparar una solución con una concentración de 0,8mol/l. Pese con precisión unos 40 ml de sustancia de referencia de aspirina y colóquelos en un matraz aforado de 10 ml.
Agregue 2-3 ml de metanol para disolver, agregue exactamente 1,0 ml de la solución de fosfato de codeína anterior, diluya a volumen con agua y agite bien.
Preparación de la solución de prueba: Pesar con precisión una cantidad adecuada de muestra en polvo fino (equivalente aproximadamente a 8 mg de fosfato de codeína y 400 mg de aspirina) y colocarla en un matraz aforado de 100 mL, agregar 50 mL de Solución de metanol al 25% y disolver con ultrasonido durante 5 minutos. Diluir a volumen con solución de metanol al 25% y mezclar bien. Filtrar a través de una membrana microporosa de 0,45 um y tomar el filtrado restante como solución de prueba.
Medición: extraiga con precisión 10 uL de la solución de referencia mixta y de la solución de prueba e inyéctelas en el cromatógrafo líquido respectivamente. Registre el área del pico. Según las áreas de los picos de fosfato de codeína y aspirina en la solución de referencia mixta, calcule el contenido de los dos en la solución de prueba.
2.2 Determinación del espectro de reducción de UV de las tabletas pediátricas de Tufelix
Principio: El método de análisis de curva quebrada es un método de transformación matemática (su propiedad matemática es una nueva transformación derivada compuesta). Basado en el principio del análisis armónico, considera la curva de absorción espectral como una combinación ponderada de múltiples componentes matemáticos. Debido a que proporciona una gran cantidad de información y puede mostrar diferencias sutiles en las curvas de absorción para reducir la correlación matemática de componentes similares, tiene ventajas obvias en los aspectos cualitativos de sustancias y la cuantificación de mezclas.
Instrumentos y reactivos: espectrómetro de falda tipo UV/VIS W y software de espectro de falda; aspirina (1) sustancia de referencia (contenido 99,89%), fenobarbital (2) sustancia de referencia (contenido 99,92%) y excipientes ( Jiamusi Chemical Pharmaceutical Factory); tabletas antipiréticas pediátricas
Métodos y resultados: Preparación de la solución de la sustancia de referencia: Pese con precisión las cantidades apropiadas de las sustancias de referencia 1 y 2 respectivamente, y use 0 ．Disolver y diluir una solución de NaOH de 1 mol/l. (disolvente) para preparar una solución madre de 1 mg/m1. Luego diluya con disolvente para obtener una solución de concentración adecuada (aproximadamente 120 ug/m1, 22,0 ug/m1, de modo que la absorbancia de 1 y 2 sea 0,2-0,8) y reserve. La preparación de la muestra simulada se basa en la proporción de prescripción de medicamentos estándar local original de Heilongjiang. Pese 1 y 2 y mezcle con una cantidad adecuada de excipientes. Pese con precisión 0,2 gy colóquelo en un vaso de precipitados pequeño. Volumen a 100m1. Dejar reposar 10 minutos. Tomar 5m1 y diluir a 250m1. Pipetee 16, 17, 18, 19 y 20 m1 respectivamente en cada matraz volumétrico de 25 m1 y diluya a volumen con disolvente para obtener una solución de muestra simulada con una concentración de 20-25 ug/m1 y una concentración de 2,0-2,5 ug/m1 (hacer la absorción de 1 y 2 entre 0,2-1,2), máx.
Medición de la muestra: Tomar 12 tabletas de este producto, pesarlas con precisión, triturarlas finamente, pesar una cantidad adecuada de polvo fino (equivalente aproximadamente a 10.110g, 20.011g), disolverlo con una pequeña cantidad de Disolver y diluir a un volumen de 50 m1. Según el mejor intervalo de conversión (245-295 nm) seleccionado mediante el método descrito en "2.3", la información espectral de este intervalo se recopila automáticamente a través del espectro de conversión y el software del sistema de análisis cuantitativo de dos componentes se utiliza para realizar el cálculo y calcular el contenido.
2.3 La tecnología de reflexión difusa del infrarrojo cercano determina el contenido de arginina aspirina
Principio: el análisis cuantitativo del infrarrojo cercano requiere un conjunto de muestras estándar con componentes conocidos para medir ( denominado conjunto de muestra estándar), basado en el espectro de infrarrojo cercano del conjunto de muestra estándar, el método quimiométrico se utiliza para establecer la relación matemática entre el valor característico espectral (como la absorbancia) y el componente a medir (denominado como modelo matemático). Al medir una muestra desconocida, solo necesita medir el espectro de infrarrojo cercano de la muestra y luego usar el modelo matemático establecido para predecir el contenido del componente que se va a medir. La diferencia con el análisis cuantitativo espectral convencional es que las muestras utilizadas en el análisis espectral del infrarrojo cercano se pueden cuantificar sin preprocesamiento resolviendo la matriz espectral y la matriz de concentración del componente a medir para establecer un modelo matemático. La tecnología de reflexión difusa se utiliza generalmente para detectar muestras sólidas y métodos de transmisión para detectar muestras líquidas. Los principales métodos para establecer modelos matemáticos incluyen: regresión lineal múltiple, método de componentes principales, método de mínimos cuadrados parciales, etc. El algoritmo de pegado es una tecnología de procesamiento de datos multivariante relativamente nueva. Su diferencia significativa con la regresión por pasos y la regresión de componentes principales es que, si bien considera cada longitud de onda en la región del espectro completo como un parámetro espectral, también tiene en cuenta los componentes internos de la muestra. Por lo tanto, la relación entre ellos se utiliza ampliamente en el análisis NIR.
Instrumento: Espectrómetro de infrarrojo cercano Bruker VECTOR22/N, con sonda de fibra óptica de reflexión difusa, rango de longitud de onda 4000-11000cm-1
Muestra: Arginina Aspirina en polvo sólido que contiene aspirina 48,0 %- 53,0 %, éster de sacarosa (excipiente en tableta, usado como lubricante)
Método experimental: use una balanza de torque 1/1000 para pesar con precisión diferentes proporciones de arginina aspirina y éster de sacarosa, ** *10 partes, mézclelas uniformemente y presiónelos con una prensa para tabletas para obtener tabletas con diferentes contenidos de arginina-aspirina (use este contenido como contenido teórico de las tabletas de arginina-aspirina y el valor real), 100 tabletas de cada tipo. Seleccione aleatoriamente 10 tabletas de 100 tabletas de cada tipo, presione las tabletas con la sonda de fibra de reflexión difusa del instrumento, mida el frente y la parte posterior de cada tableta una vez y tome el espectro promedio como espectro de muestra. El rango de escaneo es de 4000-11000 cm-1 y la resolución es de 8 cm-1. Se analiza con el software quant/2 de Bruker, y los datos espectrales se preprocesan con corrección de dispersión aditiva para eliminar errores causados por diferencias en la superficie de la tableta, y luego se pueden obtener los valores medidos.
2.4 Determinación del contenido de sal de aspirina arginina inyectable
Instrumentos y reactivos: Instrumento agitador electromagnético de 79 l; espectrofotómetro UV-visible. La arginina, la aspirina y otros reactivos eran de calidad analítica.
Dibujo de la curva estándar: Pesar con precisión 250,0 mg de cristales de aspirina, suspenderlos en 250 ml de agua destilada, agitar continuamente en un baño de agua a 40-50 grados hasta que se disuelva, enfriar y transferir a un recipiente de 500 ml. botella medidora, agregue agua destilada hasta la marca y agite bien. Extraiga con precisión 1, 2, 3, 4 y 5 ml en matraces medidores de 50 ml, agregue 25 ml de agua destilada y use o. Ajustar el pH a 9-10 con una solución de NaOH de 1 mol/L, calentarlo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos, después de enfriar, ajustar el pH a 3,0-4,0 con una solución de ácido clorhídrico de 0,1 mol/L, agregar 5 gotas de amonio férrico. solución indicadora de sulfato y agregue agua destilada hasta la marca. Agite bien. La absorbancia A se mide a una longitud de onda de 530 nm. Obtenga la ecuación a partir de regresión lineal.
Medición del contenido: Pese con precisión 400,0 mg de sal de aspirina y arginina en un matraz medidor de 100 ml, agregue agua destilada para disolver, diluya hasta la marca, agite bien y filtre. Tomar 5 mL del filtrado continuado, colocarlo en un matraz aforado de 50 mL, calentarlo al baño maría en ebullición por unos minutos, enfriar, agregar 25 mL de agua destilada, proceder con el mismo proceso que la curva estándar, medir la absorbancia A a una longitud de onda de 530 nm y calcular el contenido de sal de aspirina y arginina. El contenido de sal de aspirina y arginina = (valor medido / valor de pesaje) × 100%, sustituya los datos para obtener el contenido de sal de aspirina y arginina.
3. Análisis de fármacos in vivo de aspirina:
3.1 Determinación de la concentración plasmática de aspirina mediante cromatografía ondulatoria de alta resolución en fase reversa
1 Instrumentos y reactivos: Cromatógrafo líquido de alta resolución Waters2690, equipado con detector de matriz de diodos 996 y sistema de procesamiento de datos Millennium (fábrica de instrumentos de Shanghai Qingpu Huxi); centrífuga de alta velocidad TGL-16 (fábrica de instrumentos médicos de Shanghai). Sustancias de referencia de ácido salicílico y ácido benzoico (Instituto Chino para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos); el ácido fosfórico es de grado analítico, el acetonitrilo es de grado cromatográfico;
Condiciones cromatográficas: La columna cromatográfica es una columna Diamonsil C18 (4,6 mm×250 mm, 5 um), la fase móvil es formazán-acetonitrilo-ácido fosfórico al 0,2 % (18:32:50) y la detección La longitud de onda es de 237 nm y el caudal es de 1,0 ml/min.
Preparación de la solución: Pesar con precisión 10,10 mg de sustancia de referencia de ácido salicílico, disolverla con formazán y diluir a 10 ml para obtener una solución madre de ácido salicílico de 1,010 mg/L y diluirla con metanol serie A. de soluciones de diferentes concentraciones. Pesar con precisión 10,44 mg de ácido benzoico, disolverlo con formosano y ajustar el volumen a 10 ml para obtener una solución madre de 1,044 mg/l de ácido benzoico. Tome 1 ml de la solución madre y dilúyalo a 1 ml con metanol para obtener una solución de trabajo estándar interno de 104,4 ug/ml.
Procesamiento y determinación de la muestra: mida con precisión 0,5 nl de muestra de suero, agregue 50 ul de solución estándar interna de ácido benzoico (104,4 ug/m1), 2 ml de acetonitrilo, agite durante 2 minutos, centrifugue a 15000 r/min durante 5 minutos Tome 20 ul del sobrenadante e inyecte una muestra en las condiciones cromatográficas anteriores y registre los cromatogramas y las áreas de los picos del estándar interno y la muestra respectivamente.
Se calcula por el área del pico según el método estándar externo.
Discusión
Existen muchos métodos de análisis para la aspirina y sus preparados, pero tienen sus propias similitudes. En el análisis de HPLC, la columna de detección generalmente utiliza una columna C18 y la longitud de onda de detección es de aproximadamente 280. El método de titulación se basa en la acidez del ácido carboxílico libre del fármaco o se titula con ácido después de la hidrólisis. Otras mediciones que utilizan métodos como los modelos matemáticos también se basan en la estructura química y las propiedades de la aspirina.
Referencias:
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