Muchas biomoléculas están cargadas, y la carga depende de la estructura molecular y del pH y composición del medio. Dado que las propiedades de carga, las cantidades de carga y las masas moleculares relativas de cada componente de la mezcla son diferentes, bajo la acción del mismo campo eléctrico, las direcciones de nado y las velocidades de cada componente también son diferentes. Por lo tanto, dentro de un cierto período de tiempo, la distancia de movimiento de cada componente también es diferente, logrando así el propósito de separar e identificar cada componente.
La tecnología de electroforesis se utiliza principalmente para separar diversas sustancias orgánicas (como aminoácidos, péptidos, proteínas, lípidos, nucleótidos, ácidos nucleicos, etc.) y sales inorgánicas. También se puede utilizar para analizar la pureza; y pureza de sustancias. Determinar el peso molecular. La electroforesis combinada con otras técnicas de separación (como la cromatografía) se puede utilizar para analizar la estructura de las proteínas. La "huella digital" es una combinación de electroforesis y cromatografía. El uso de principios inmunológicos para detectar resultados de electroforesis mejora la capacidad de distinguir proteínas. La combinación de electroforesis y tecnología enzimológica descubrió isoenzimas y proporcionó una comprensión profunda de las funciones catalíticas y reguladoras de las enzimas. Por lo tanto, la tecnología de electroforesis es una tecnología de investigación importante en la ciencia médica.
Electroforesis en papel y electroforesis en película fina de acetato de celulosa
La electroforesis en papel se ha utilizado para separar proteínas séricas durante mucho tiempo y se utiliza ampliamente en pruebas clínicas y de laboratorio. Desde que Kohn utilizó por primera vez la membrana de acetato de celulosa como soporte de electroforesis en 1957, la electroforesis en papel ha sido reemplazada por la electroforesis en membrana de acetato de celulosa. Porque este último tiene las ventajas de una electroósmosis más pequeña, una velocidad de separación más rápida, una separación más clara, un menor consumo de suero y un funcionamiento más sencillo que la electroforesis en papel.
Electroforesis en gel de agarosa
La agarosa se procesa para eliminar la pectina del agar. Dado que el contenido de sulfato en la agarosa es menor que el del agar, el efecto electroosmótico se debilita, por lo que el efecto de separación mejora significativamente. Por ejemplo, las lipoproteínas séricas sólo se pueden separar en dos bandas (α-lipoproteína y β-lipoproteína) mediante electroforesis en gel de agarosa, mientras que las lipoproteínas séricas se pueden separar en tres bandas (α-lipoproteína) mediante electroforesis en gel de agarosa, pre-β-. lipoproteína y β-lipoproteína). Por tanto, la agarosa es un material ideal para la electroforesis en gel.
Los lípidos del suero se combinan con las apolipoproteínas para formar lipoproteínas solubles en agua. Los tipos y cantidades de apolipoproteínas contenidas en varias lipoproteínas son diferentes, y los tamaños de las partículas de lipoproteínas son diferentes, lo que hace que se muevan a diferentes velocidades en un campo eléctrico, por lo que pueden separarse mediante electroforesis.
Electroforesis en gel de poliacrilamida
El gel de poliacrilamida es un gel sintético con buena resistencia mecánica, alta elasticidad, transparencia, alta estabilidad química y sin electroósmosis, equipo simple, tamaño de muestra pequeño (1~ 100ug), alta resolución y otras ventajas. Controlando la concentración de monómero o la proporción de monómero a agente reticulante, se pueden polimerizar geles con diferentes tamaños de poro, que pueden usarse para proteínas, ácidos nucleicos y otras sustancias de diferentes tamaños moleculares. El agente disociante dodecilsulfato de sodio (SDS) también se puede utilizar para determinar el peso molecular relativo de las subunidades de proteínas.
Principio de electroforesis:
La electroforesis se refiere al movimiento de iones de recubrimiento cargados hacia el cátodo bajo la acción de un voltaje aplicado al ánodo y al cátodo.
Reacciona con el álcali producido en la superficie del cátodo para formar materia insoluble, que se deposita en la superficie de la pieza.
Incluye cuatro procesos:
1) Electrólisis (descomposición)
En primer lugar, la reacción catódica es una reacción de electrólisis, que produce gas hidrógeno e iones hidróxido OH, Esta reacción conduce a la formación de la superficie del cátodo.
Capa límite altamente alcalina, cuando los cationes reaccionan con los grupos hidroxilo para convertirse en sustancias insolubles en agua, se deposita el recubrimiento, la ecuación
es H2O → OH H
2) Electroforesis (natación y migración)
Bajo la acción del campo eléctrico, la resina catiónica y el H se mueven hacia el cátodo y los aniones se mueven hacia el ánodo.
3) Electrodeposición (precipitación)
En la superficie de la pieza recubierta, la resina catiónica reacciona con la superficie del cátodo de forma alcalina, neutralizándose y sin precipitar depósitos.
Se acumula sobre la pieza recubierta.
4) Electroósmosis (deshidratación)
El sólido de recubrimiento y la película en la superficie de la pieza de trabajo son translúcidos y tienen muchos poros capilares, y el agua se recubre desde el cátodo.
Se filtra de la película y, bajo la acción del campo eléctrico, el recubrimiento se deshidrata y el recubrimiento se adsorbe en la superficie de la pieza de trabajo, y
completa el todo el proceso de electroforesis.
Características del proceso de tratamiento de superficies electroforético 6?1:
La película de pintura electroforética tiene las ventajas de un recubrimiento completo, uniforme, plano y liso, y su dureza, adherencia,
La resistencia a la corrosión, la resistencia al impacto y la permeabilidad son significativamente mejores que otros procesos de recubrimiento.