El desarrollo de la vacuna contra la rabia humana ha pasado por el proceso desde la vacuna tradicional de tejido nervioso hasta la vacuna actual de cultivo de tejidos. , y tiene La aplicación de la biotecnología moderna se mejora y desarrolla continuamente.
*Uso temprano de vacunas tradicionales;
En 1882, Pasteur aisló un virus de la rabia del cerebro de ganado vacuno, que se ha propagado en el cerebro de conejos durante 90 generaciones. Cuando el virus alcanza la 50.ª generación, el período de incubación se acorta de 15 días a 7 días, la virulencia se debilita y se convierte en un virus fijo. En 1885, Pasteur intentó infectar conejos con un virus fijo. Siete días después del inicio de la enfermedad, se extrajo la médula espinal y se secó para producir una vacuna viva atenuada. La vacuna curó con éxito a un niño de 9 años. En 1908, Fermi mejoró el método de Pasteur, pero la toxicidad residual seguía siendo tan alta como 100 MLD50. Provoca encefalomielitis aguda causada por virus fijos. En 1973, el Comité de Expertos en Rabia de la OMS recomendó que las vacunas antirrábicas que contienen virus vivos no se utilizaran en humanos. Por lo tanto, la vacuna viva atenuada puso fin a su misión histórica. En 1911, Semple mejoró aún más sobre esta base, inactivó el tejido cerebral y preparó una vacuna Semple inactivada de tejido cerebral no tóxica. Aunque la seguridad ha mejorado mucho en comparación con la vacuna viva atenuada, todavía se producen accidentes graves de parálisis nerviosa después de usar la vacuna Semple, con una tasa de incidencia que oscila entre 1/500 y 1/2000. La vacuna todavía se usa ampliamente en los países en desarrollo. La vacuna Semple preparada a partir de cerebro de oveja se utiliza en China desde 1949. Su uso se suspendió en 1980 y se reemplazó por la vacuna original de células de riñón de hámster. En 1955, Fuenjalida y Palacios prepararon una vacuna neonatal de cerebro de rata (SMBV). Esta vacuna se utiliza ampliamente en América del Sur desde hace más de 40 años. Sin embargo, la incidencia de complicaciones neurológicas sigue siendo de 1/8.000. Resumen: Las vacunas de tejido nervioso tienen los siguientes problemas: tienen una inmunogenicidad débil, contienen factores paralizantes de los nervios y algunas contienen virus vivos residuales. Además, las cabras y ovejas utilizadas para la producción de vacunas pueden estar infectadas con virus latentes. Por lo tanto, en su séptimo informe (1984), el Comité de Expertos de la OMS apoyó la restricción y el abandono de la producción de vacunas de tejido cerebral y abogó firmemente por el uso de vacunas de cultivos celulares inactivados. *Vacuna de embrión de aves:
Para reducir la aparición de parálisis nerviosa, la investigación de Peck preparó la vacuna de embrión de pato (DEV) en 1956. La vacuna se ha utilizado ampliamente en Estados Unidos y otros países durante 27 años para tratar la rabia posterior a la exposición, y se han observado pocos efectos secundarios graves, pero los niveles de anticuerpos neutralizantes no son tan buenos como los de la vacuna de tejido cerebral. Después de la llegada de la vacuna de células diploides humanas, las comparaciones mostraron que su seguridad y efecto inmunológico eran mejores que los de la DEV. Muchos países dejaron de usar la vacuna DEV en 1982. *Vacunas de cultivo celular: vacunas recomendadas por la OMS:
1. Vacuna de células diploides humanas (HDCV):
En 1964, la estadounidense Wistar se utilizará para la producción de la vacuna Semple The PM. La cepa del virus de la rabia se adaptó a la cepa de células diploides humanas WI-38 y, posteriormente, el Instituto Francés Merieun la adaptó a la cepa de células MRC-5 para la producción de vacunas. El virus se cultiva, se clarifica, se calienta, se inactiva con β-propiolactona y se liofiliza para preparar la vacuna. La vacuna fue aprobada por primera vez para su producción en 1974 y comercializada en 1978. Debido a su alta inmunogenicidad y buena tolerabilidad, el HDCV se utiliza actualmente en Estados Unidos, Canadá, la mayoría de los países europeos y varios países asiáticos. La desventaja de la HDCV es que la HDC no es fácil de cultivar y el título viral del virus de la rabia cultivado en HDC es relativamente bajo, lo que encarece mucho la vacuna y limita su uso en los países en desarrollo. 2. Vacunas de cultivo celular primario:
Una de las ventajas de las vacunas de cultivo celular primario es que no requieren criopreservación de los tipos celulares. Sin embargo, cada lote de vacuna debe ser controlado para detectar impurezas (bacterias, micoplasmas, virus) en los órganos cultivados, y la disponibilidad de órganos animales es un factor que limita la producción industrial. Vacuna de células de riñón de hámster (PHKCV): propuesta por Kissling en 1958 y desarrollada posteriormente por Fenje, el virus de la rabia fijo se adaptó a células de riñón de hámster (PHKC) para producir una vacuna inactivada y tuvo éxito. 1968 La vacuna fue aprobada en Canadá para amplificación humana y vacunación previa a la exposición. La vacuna recibió el número de producción 1980 aprobado por el Ministerio de Salud de China y reemplazó a la vacuna Semple. Vacuna de células de riñón de perro: en 1978, Van Wezal et al utilizaron la cepa PM del virus de la rabia para adaptarse a las células de riñón de perro y utilizaron microportadores para producir en masa la vacuna.
En los Países Bajos se realizaron experimentos de vacunación en humanos antes y después de la exposición a la vacuna. La respuesta inmune obtenida fue equivalente a la del HKCV. La producción fue aprobada en los Países Bajos en 1980. Vacuna de células de embrión de pollo: En Kando 1965, la cepa Flary HEP se adaptó a células de embrión de pollo. El virus cultivado se inactivó con β-propiolactona, se concentró y se liofilizó (mejorado mediante purificación por centrifugación zonal) para fabricar una vacuna, que se comercializó. en Japón. En 1983, Barth et al. diferenciaron una vacuna de células de embrión de pollo purificadas (PCECV) adaptada a células de embriones de pollo con la cepa Flary LEP de la vacuna japonesa antes mencionada. Actualmente, la vacuna la produce la empresa alemana Chiro Behring GmbH. 3. Vacunas de línea celular:
Los avances de la biotecnología, como el subcultivo de células sobre microportadores en fermentadores, han hecho realidad la producción industrial de vacunas contra la rabia. 1984 El Instituto Merion de Francia desarrolló con éxito la vacuna de células Vero. Durante el proceso de preparación, se utilizó tecnología de microportadores (cultivo en suspensión de unión celular) para el cultivo industrializado en tanques grandes. Un gran número de experimentos realizados en la década de 1980 y más recientemente han confirmado que la vacuna Vero tiene buenos efectos inmunológicos, ya sea que se use como inmunización humana previa a la exposición o como tratamiento posterior a la exposición. 1984 165438+Octubre, la OMS cooperó con RF para utilizar tecnología de microportadores para perfundir células Vero a alta densidad. La producción industrial de la vacuna contra la rabia tardó 15 años y fue exitosa. En la actualidad, la vacuna de células Vero ha adquirido experiencia segura y eficaz en muchos países del mundo.