Los colorantes de ácidos nucleicos utilizados habitualmente son:
1. Colorante EB
EB es un intercalador de moléculas de ácido nucleico y se suele utilizar en genética molecular, ADN y cromatina. estructura en análisis y otras investigaciones, especialmente muchos laboratorios domésticos todavía utilizan EB para teñir en experimentos de electroforesis de ácido nucleico en gel. EB es una molécula pequeña que penetra fácilmente la membrana celular y es quimérica con el ADN intracelular. Tiene una estructura macrocíclica de yugo *** plana y es un reactivo de inserción de molécula de ADN típico. El anillo de fenantridina se inserta en la molécula de ADN. pares de bases, forman un complejo estable con la quimera del ADN, lo que afecta la replicación del ADN y altera los fenómenos genéticos y fisiológicos normales. Como compuesto mutagénico, el mecanismo de la EB para inducir mutaciones en el cuerpo humano es irreversible.
2. Tinte GoldView
GoldView (GV) es un nuevo tinte de ácido nucleico que puede reemplazar al bromuro de etidio (EB). Su sensibilidad es equivalente a la del EB y su método de uso. es completamente igual. El ADN de doble cadena exhibe fluorescencia verde bajo luz ultravioleta transmitida y también puede usarse para teñir ARN.
En esencia, el llamado Goldview es naranja de acridina, también conocido como el legendario AO. Existe una prueba de apoptosis tradicional que utiliza naranja de acridina como tinte, que es la prueba de tinción AO/EB. EB no puede penetrar la membrana celular intacta, mientras que AO puede penetrar la membrana celular y teñir el núcleo celular para distinguir las células apoptóticas y no apoptóticas.
3. Los tintes GelRed y GelGreen
GelRed
y GelGreen
son dos tintes que combinan alta sensibilidad, baja toxicidad y ultra- Propiedades estables. Un excelente reactivo de tinción de gel de ácido nucleico fluorescente todo en uno. Su tinte soluble en agua ha sido certificado como seguro por la Agencia de Protección Ambiental de EE. UU. y los desechos se pueden verter directamente al alcantarillado sin causar contaminación ambiental.
La estructura química especial de GelRed
y GelGreen
dificulta la penetración en la membrana celular y la entrada en las células. Es esta característica la que reduce la citotoxicidad de. los tintes. Pero precisamente por eso su precio es unas diez veces mayor que el del GoldView.
Información ampliada
Aplicaciones en investigación científica de colorantes de ácido nucleico:
1. Inmunoensayo
La tecnología de anticuerpos monoclonales marcados fluorescentemente es citometría de flujo Citómetros han ampliado el espacio de aplicación ilimitado en el campo del estudio de diversos antígenos funcionales y proteínas de genes tumorales en membranas y células celulares.
Las sondas fluorescentes se pueden unir de forma valente a anticuerpos monoclonales mediante agentes reticulantes de proteínas. Los tintes más utilizados para el etiquetado de inmunofluorescencia incluyen isotiocianato de fluoresceína (FITC), ficoeritrina (PE) y tintes de la serie AlexaFluor.
2. Detección de ácido nucleico
Después de teñir el núcleo con tintes fluorescentes de ácido nucleico, medir cuantitativamente la intensidad de la fluorescencia emitida por las células puede determinar el contenido de ADN y ARN en el núcleo y Se analizó el ciclo celular y el estado de proliferación celular.
Existe una variedad de tintes fluorescentes que pueden teñir el ADN o el ARN en las células. Los tintes de ADN de uso común incluyen yoduro de propidio (PI), DAPI, Hoechst 33342, etc., y los tintes de ARN incluyen naranja de tiazol y acridina. naranja espera.
Enciclopedia Baidu-Tintes fluorescentes