El cultivo de tejidos vegetales, es decir, la tecnología de cultivo estéril de plantas, se basa en la teoría de que las células vegetales son totipotentes y utilizan órganos aislados como raíces, tallos, hojas, puntas de tallos, flores y frutos, y Se cultivan tejidos (como cambium, epidermis, corteza, células medulares, endospermo, etc.) o células (como megasporas, microsporas, células somáticas, etc.) y protoplastos en medios de cultivo artificiales estériles y adecuados, con luz, temperatura, etc.
Suplemento:
Cultivo de tejidos vegetales:
En sentido amplio, también se le llama cultivo in vitro, que se refiere a la tecnología de aislamiento de tejidos, órganos o células, protoplastos, etc. Y cultivarlas bajo control artificial mediante operación aséptica para obtener plantas completas regeneradas o producir otros productos con valor económico.
El cultivo de tejidos en sentido estricto se refiere a la regeneración de plantas a partir de diferentes partes de la planta, como cambium, parénquima, mesófilo y endospermo. También se refiere al cultivo de tejido calloso de varios órganos durante el proceso de cultivo y a la rediferenciación del tejido calloso para formar plantas regeneradas.
Pasos del cultivo de tejidos vegetales
El primer paso es retirar las partes no utilizadas del material vegetal recogido y lavar cuidadosamente las partes necesarias, por ejemplo con un cepillo adecuado. Corte el material en un tamaño apropiado para la persona en el recipiente de esterilización. Coloca un grifo y deja correr el agua durante unos minutos a unas horas. El tiempo de lavado depende de la limpieza del material. Los materiales flotantes o finos se pueden lavar en una bolsa de gasa. El lavado con agua corriente es particularmente útil cuando la contaminación es grave. Al lavar, puede agregar detergente en polvo para limpiarlo y luego enjuagar el detergente con agua del grifo. El polvo de lavandería puede eliminar la suciedad ligeramente adherida a la superficie de las plantas y eliminar los lípidos para facilitar el contacto directo con el desinfectante. Por supuesto, la sustancia limpiadora más ideal es el Tween, un tensioactivo.
El segundo paso es remojar y desinfectar la superficie del material. A realizar en una mesa de trabajo o caja de inoculación limpia, preparar vasos de precipitados esterilizados, varillas de vidrio, alcohol 70, desinfectante, agua esterilizada, relojes, etc. Remojar en alcohol 70 durante 10 a 30 segundos. Debido a que el alcohol puede humedecer la superficie de los materiales vegetales, y el alcohol al 70% tiene un fuerte poder de penetración y puede matar fácilmente las células vegetales, el tiempo de infiltración no debe ser demasiado largo. También hay algunos materiales especiales, como if, yemas, etapas de arranque con brácteas y brácteas, yemas latentes con múltiples capas de escamas, etc. , y utiliza principalmente materiales internos, que pueden tratarse con alcohol al 70% durante un tiempo un poco más largo. En condiciones estériles, el material tratado se retira después de que el alcohol se evapora y se utiliza el material interior.
El tercer paso es tratarlo con desinfectante. Hay muchos tipos de desinfectantes de superficies y puede elegir 1 o 2 según la situación. Ver tabla. El cuarto paso es enjuagar con agua esterilizada durante unos 3 minutos cada vez, entre 3 y 10 veces según el tipo de desinfectante utilizado. El efecto de lavado del agua esterilizada es evitar los efectos secundarios de los desinfectantes que matan las células vegetales. Nota: ① El alcohol tiene una fuerte permeabilidad y la madera joven perderá fácilmente su color verde en el alcohol. El tiempo de remojo debe ser corto para evitar que el alcohol mate las células vegetales. ② Los materiales maduros, especialmente las semillas, se pueden remojar en alcohol durante mucho tiempo. Por ejemplo, las semillas se pueden remojar durante 5 minutos. (3) El poder de penetración del cloruro de mercurio es débil. Generalmente se remoja durante unos 10 minutos y causa poco daño a los materiales vegetales. (4) El polvo blanqueador puede hacer que los materiales vegetales pierdan fácilmente su color verde, así que utilícelo con precaución en materiales jóvenes. ⑤ Agregar Tween 20 u 80 (un agente humectante) con una concentración de 0,08-0,12 al desinfectante puede reducir la tensión superficial de los materiales vegetales y lograr mejores efectos de desinfección.