La cromatografía por electroforesis capilar utiliza tubos capilares como canales de separación, utiliza campos eléctricos de CC de alto voltaje como fuerzas impulsoras y utiliza las diferencias en los coeficientes de movilidad y distribución entre partículas cargadas para separar. . Los indicadores técnicos de los capilares incluyen material, diámetro interior, diámetro exterior, espesor y longitud de la pared, etc.
1. Material:
El capilar ideal debe ser química y eléctricamente inerte, capaz de transmitir luz ultravioleta y visible, tener cierto grado de tenacidad, ser elástico, fácil de doblar, duradero y barato.
Los materiales utilizados actualmente son el politetrafluoroetileno, el vidrio y el cuarzo, entre los que el cuarzo es el más utilizado. Los capilares extraídos de sílice fundida son quebradizos y se rompen fácilmente, pero se vuelven muy elásticos después de recubrirlos con poliimida.
1. Politetrafluoroetileno: transparente a los rayos UV y débil en electroósmosis. Sin embargo, el diámetro interior del capilar es desigual, se adsorbe en la muestra y la conducción del calor es deficiente.
2. Vidrio: La electroósmosis es la más fuerte, pero el contenido de impurezas es alto.
3. Cuarzo: Hay dos tipos: natural y artificial El componente básico es la sílice.
2. Diámetro interior:
El diámetro interior de los tubos capilares de cuarzo suele ser de 25 a 75 μm, siendo los más utilizados en cromatografía por electroforesis capilar de 50 μm y 75 μm. diámetros interiores mayores.
1. Ventajas de los tubos capilares de diámetro interior pequeño:
(1) Corriente pequeña, menos calor Joule, lo que permite aplicar un voltaje más alto.
(2) La gran área de disipación de calor puede acelerar la disipación de calor, reducir la difusión radial, mantener plano el patrón de flujo electroosmótico y mejorar la eficiencia de la columna.
2. Desventajas de los tubos capilares de pequeño diámetro interior:
(1) Gran superficie específica, que aumentará la adsorción de solutos.
(2) Dificultades en la introducción, detección y limpieza de la muestra.
(3) El límite de detección inferior es mayor que el de los tubos capilares de gran diámetro interior.
3. Diámetro exterior:
El diámetro exterior del capilar es de 350 ~ 400 μm.
Por lo general, hay dos especificaciones: el diámetro exterior del tubo capilar de pared gruesa es de 375 μm y el diámetro exterior del tubo capilar de pared delgada es de 150 μm.
4. Espesor de la pared:
El espesor de la pared capilar incluye dos partes: el espesor de la pared del propio cuarzo y el espesor del revestimiento de poliimida (la conductividad térmica es muy baja).
El espesor de la pared del cuarzo es de 150~375μm.
El espesor del recubrimiento de poliimida es de 12μm.
5. Longitud:
La longitud del capilar se llama longitud total. Dependiendo de las necesidades de separación se puede seleccionar una longitud de 20 a 100 cm.
La distancia desde el extremo de entrada del tubo capilar hasta la ventana del detector se denomina longitud efectiva. La longitud efectiva es de 80~100 cm.
Cuando la intensidad del campo eléctrico es constante, el número de placas teóricas es proporcional a la longitud de la columna. Sin embargo, la longitud de la columna no se puede aumentar indefinidamente, porque para mantener constante la intensidad del campo eléctrico, se debe aumentar el voltaje en ambos extremos de la columna.
Cuando el voltaje es constante, la longitud de la columna aumenta, lo que puede reducir el calor Joule. Sin embargo, reducirá la intensidad del campo eléctrico y aumentará el tiempo de análisis.