La progesterona antagoniza el efecto inhibidor de los estrógenos sobre GSK-3. Actividad que excluye la ciclina D1 del núcleo
La progesterona antagoniza la inhibición estrogénica de GSK-3 y excluye la actividad de la ciclina D1 del núcleo.
Nuestro estudio muestra que la localización celular de la ciclina D1 es un punto regulador clave en la progresión del ciclo celular epitelial uterino porque E2 induce la acumulación de ciclina D1 en la fase temprana de los núcleos G1, que se bloquea completamente con el tratamiento con P4 (. 21). GSK-3. Se ha demostrado que participa en la regulación de la localización subcelular de la ciclina D1 en células cultivadas (22, 23, 27).
Nuestro estudio muestra que la localización celular de la ciclina D1 es un punto regulador clave en el ciclo celular epitelial del útero, porque durante la fase G1, E2 contiene acumulación nuclear de ciclina D1, que es bloqueada por el tratamiento con P4. Totalmente cubierto. En células cultivadas podemos ver GSK-3. Ubicado en el compartimento subcelular de la ciclina D1.
Explorar si las hormonas esteroides femeninas pueden regular la localización de la ciclina D1 modificando GSK-3. Actividad, examinamos el estado de fosforilación de GSK-3. Se utilizaron anticuerpos específicos anti-fosfo-Ser9 en células epiteliales uterinas después de diferentes tratamientos hormonales (Fig. 1).
Explorar si las hormonas esteroides femeninas Ser9 pueden regular la posición de la ciclina D1 cambiando la actividad de GSK-3. Probamos el estado de fosforilación de GSK-3. También probamos células epiteliales uterinas tratadas con diferentes hormonas.
Niveles totales de GSK-3. Las células epiteliales uterinas permanecieron sin cambios bajo todos los tratamientos hormonales en comparación con los ratones de control no tratados.
Los niveles generales de GSK-3 en las células epiteliales uterinas se mantuvieron constantes en todos los tratamientos hormonales en comparación con los ratones cultivados no tratados.
El grado de fosforilación de GSK-3-Ser9 fue igual o inferior a los niveles de detección en ratones control y tratados con P4.
El ancho de fosforilación de GSK-3-Ser9 fue menor o igual al observado en ratones cultivados y tratados con P4.
Por el contrario, el tratamiento con E2 indujo un
aumento espectacular de GSK-3. La fosforilación de Ser9 se detectó por primera vez 2 horas después del tratamiento, alcanzó un máximo aproximadamente a las 8 horas y luego desapareció gradualmente hasta las 16 horas.
Por el contrario, el tratamiento con E2 resultó en un aumento dramático en la fosforilación de GSK-3 en Ser9. La primera observación fue 2 horas después del tratamiento y la observación más alta fue casi 8 horas. Luego la fosforilación disminuyó significativamente hasta las 16 horas.
El pretratamiento con P4 inhibió en gran medida la GSK-3 inducida por
E2. Ser9 se fosforiló, pero no completamente, ya que todavía había una señal débil a las 4 y 8 horas después de este tratamiento en comparación con el grupo de P4 solo.
El tratamiento previo con P4 inhibió en gran medida la fosforilación de GSK-3-Ser9 inducida por E2 en comparación con el grupo de P4 solo, pero esto no se debió completamente a una fosforilación débil a las 4 y 8 horas después de recibir este tratamiento.
Además de esta fosforilación inhibidora de Ser9, GSK-3. También se ve afectado por la fosforilación en Tyr216 que estimula su actividad (28).
Además, GSK-3 también inhibe la fosforilación de Ser9. También se ve afectado por la fosforilación de Tyr216, que estimula su actividad (28).
Utilizando un anticuerpo específico anti-GSK-3-Tyr216, determinamos si E2 y P4 regulan GSK-3. actividad a través de la fosforilación de Tyr216 (Figura 1).
Con anticuerpos dirigidos a la firma GSK-3-Tyr216, podemos sacar conclusiones para determinar si E2 y P4 regulan la actividad de GSK-3. Mediante fosforilación de Tyr216 (Figura 1).
Similar a estudios previos (28,29), GSK-3. es innato
Se fosforiló incluso en extractos epiteliales de ratones control no tratados, y diferentes tratamientos hormonales no alteraron los niveles de fosforilación de GSK-3. En Tyr216.
Similar a estudios previos (28,29), GSK-3.
Se demostró un proceso de fosforilación intrínseca incluso en ratones cultivados no tratados y extractos epiteliales tratados con diferentes hormonas, y su nivel de fosforilación no cambió en Tyr216.