Procedimientos experimentales de catalasa para estudiar el efecto del valor del pH sobre la actividad enzimática

①El propósito del experimento es explorar el efecto del pH sobre la actividad catalasa, por lo que primero agregue 2 mL de peróxido de hidrógeno recién preparado con una fracción en volumen del 3% a los tubos de ensayo No. 1, 2 y 3. solución, luego agregue 1 ml de agua destilada al tubo de ensayo No. 1, agregue 1 ml (volumen igual) de solución de hidróxido de sodio al tubo de ensayo No. 2, agregue 1 ml (volumen igual) de solución de ácido clorhídrico al tubo de ensayo No. 3 y agite los tubos de ensayo.

② Según el análisis de la pregunta, deje caer 2 gotas de líquido triturador de hígado de pollo en cada uno de los tubos de ensayo N° 1, N° 2 y N° 3.

③El número de burbujas refleja el nivel de actividad catalasa. Observe atentamente el número de burbujas producidas en cada tubo de ensayo y regístrelas.

En el pH óptimo, la actividad enzimática es máxima; cuando es mayor o menor que el pH óptimo, la actividad enzimática disminuirá. Por tanto, los resultados experimentales son: se generan más burbujas en el tubo de ensayo N° 1; se generan menos burbujas en los tubos de ensayo N° 2 y 3;

Además del pH, existen otros factores ambientales que afectarán a la actividad de la catalasa. En este sentido, se propone un tema de investigación relacionado: explorar el efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa.

Entonces la respuesta es:

① 1 ml (volumen igual) de solución de hidróxido de sodio (no se otorgarán puntos si faltan el volumen y el nombre del reactivo) 1 ml (volumen igual) de clorhídrico solución ácida (volumen de reactivo y nombre del reactivo) No se otorgarán puntos si falta algún nombre del reactivo).

②Líquido para triturar hígado de pollo

③Produce más burbujas

Explore el efecto de la temperatura sobre la actividad catalasa (u otras respuestas razonables)

Comentarios : Esta pregunta examina los factores y experimentos exploratorios que afectan la actividad enzimática. La atención se centra en los experimentos exploratorios que afectan la actividad enzimática. Se requiere que los estudiantes dominen los principios del diseño experimental y juzguen con precisión las variables independientes, las variables dependientes y las variables irrelevantes. experimento.

Al mismo tiempo, es necesario comprender los factores que afectan la velocidad de las reacciones enzimáticas. Como catalizador biológico, las enzimas no solo tienen las características de los catalizadores inorgánicos generales, sino que también tienen características como especificidad, alta eficiencia y suavidad. Todos estos son buenos materiales para experimentos biológicos. El uso de las características de las enzimas como base de conocimientos puede evaluar mejor el conocimiento experimental y las habilidades operativas de los estudiantes.

Información ampliada:

Método cinético

Mide la cantidad de reacción química que se produce en un periodo de tiempo determinado.

① ¿Método colorimétrico? ¿Si el producto de la reacción enzimática puede reaccionar con un reactivo químico específico para generar una solución coloreada estable y existe una relación lineal entre la profundidad del color generado y la concentración del mismo? producto dentro de un cierto rango, este método se puede utilizar Ley.

Por ejemplo, se mide la actividad de la proteasa: la proteasa puede hidrolizar la caseína y la tirosina generada puede reaccionar con el reactivo de Folin para formar un compuesto azul estable. Dentro de un cierto rango de concentración, el color del compuesto azul. producido es Existe una relación lineal entre la profundidad de tirosina y la cantidad de tirosina, que se puede utilizar para la determinación cuantitativa.

② El método de medición de gas se utiliza principalmente para reacciones enzimáticas que producen gas. Como la determinación de la actividad de los aminoácidos descarboxilasa y ureasa. La cantidad de dióxido de carbono producido se puede medir con un instrumento especial como un respirómetro Valsalva. Según la relación entre el cambio de gas y el tiempo, se puede obtener la velocidad de la reacción enzimática.

③¿Método de titulación? Este método se puede utilizar si uno de los productos es una sustancia ácida libre. Si la lipasa cataliza la hidrólisis de las grasas, el aumento de ácidos grasos representa la actividad de la lipasa.

④¿Espectrofotometría? Utilizando la diferencia en las propiedades de absorción de luz del sustrato y el producto, se puede medir directamente la disminución del sustrato o el aumento del producto en la mezcla de reacción. Casi todas las oxidorreductasas se miden mediante este método.

Si la coenzima I reducida (NADH2) y la coenzima II (NADPH2) se absorben a 340 nm, pero el NAD y el NADP no tienen absorción a esta longitud de onda, las deshidrogenasas se pueden medir mediante este método. Este método es rápido y fácil de medir, y el uso de un espectrofotómetro de barrido automático proporciona una gran comodidad para una determinación rápida y precisa de la actividad enzimática.

Enciclopedia Baidu-Actividad enzimática