1. ¿Banco de trabajo ultralimpio?
Actualmente, la mayoría de los laboratorios celulares utilizan un banco de trabajo ultralimpio para lograr un funcionamiento aséptico. Tiene las características de operación simple, instalación conveniente y ocupación de espacio reducido. y limpieza. Funciona muy bien. Anhui Renhe Purification le presenta dos tipos principales de banco de trabajo ultralimpio: el tipo de flujo lateral (tipo vertical) y el tipo de flujo de salida (tipo de flujo laminar horizontal). El principio de funcionamiento generalmente es que el aire interior se filtra inicialmente a través de un filtro grueso, se presiona hacia la caja de presión estática mediante un ventilador centrífugo y luego se filtra finamente a través de un filtro de aire de alta eficiencia. El flujo de aire limpio que sale pasa a través del esterilizado. área a una cierta velocidad del viento transversal uniforme. Esto crea un ambiente de trabajo libre de polvo y estéril de alta limpieza. ?
(1) Banco de trabajo de flujo lateral: el aire después de la purificación fluye desde el lado izquierdo o derecho a través del banco de trabajo hacia el lado opuesto, y también fluye de arriba hacia abajo o de abajo hacia arriba hacia el opuesto. lado, formando una barrera para el flujo de aire. Mantenga el área de trabajo estéril y la estructura del banco de trabajo esté cerrada;?
(2) Banco de trabajo de tipo salida: el aire purificado fluye hacia el operador, por lo que el flujo de aire externo no se mezcla. en la operación. La estructura del banco de trabajo está abierta, pero no es bueno para el operador realizar operaciones experimentales con sustancias peligrosas. Los departamentos correspondientes deben comprobar periódicamente la limpieza del banco de trabajo ultralimpio. La limpieza del banco de trabajo ultralimpio que cumple con los requisitos debe alcanzar el nivel 100. El número de partículas de polvo con un tamaño de partícula ≤5 μm detectadas por un detector. el contador de partículas de polvo no debe exceder 3,5/L; el flujo de aire debe controlarse a 0,75-1,0 m3/s; el número promedio de colonias bacterianas es 1. El filtro debe reemplazarse si es necesario según las condiciones de esterilidad. ?
2. ¿Microscopio?
El microscopio invertido es un equipo necesario para el trabajo diario en el laboratorio de cultivo celular. Se utiliza principalmente para comprender el crecimiento de las células y observar si existe. contaminación. Si los fondos lo permiten, se recomienda utilizar un microscopio de contraste de fases de alta calidad, un microscopio de disección, un microscopio de fluorescencia, un sistema de vídeo o un dispositivo de grabación de películas a intervalos equipado con un sistema de cámara, para poder fotografiar y registrar el crecimiento celular en cualquier momento. . ?
3. ¿Incubadora?
Las células cultivadas in vitro, como las células del cuerpo, necesitan sobrevivir a una temperatura constante. Generalmente, la temperatura óptima de crecimiento es 37°C. Los cambios de temperatura no deben exceder ±0,5 ℃. Cuando la temperatura aumenta 2°C, se vuelve desfavorable para la supervivencia celular. Cuando la temperatura supera los 40°C, las células morirán rápidamente. Por lo tanto, las mejores opciones son las incubadoras de temperatura constante y las incubadoras de CO2 con control preciso de la temperatura. ?
(1) Incubadora de temperatura constante: debe elegir una incubadora de temperatura autocontrolada a prueba de agua o tipo transistor. Este tipo de incubadora tiene una alta sensibilidad y un control de temperatura estable. Las incubadoras generales de temperatura constante son relativamente baratas, pero su desventaja es que sólo son adecuadas para cultivos cerrados. ?
(2) Incubadora de CO2: Actualmente, la mayoría de salas de cultivo celular han sido ampliamente utilizadas. La ventaja de la incubadora de CO2 es que puede proporcionar una cierta cantidad de CO2 (la concentración común es del 5%) necesaria para el cultivo celular, es fácil de estabilizar el pH del medio de cultivo y es adecuada para cultivos abiertos o semiabiertos. cultura. Cuando se utiliza una botella de cultivo, para mantener la ventilación entre la botella de cultivo y el mundo exterior, la tapa de la botella se puede aflojar ligeramente para evitar la contaminación de las células; cuando se utiliza este método de cultivo, el aire de la incubadora debe mantenerse limpio. y debe irradiarse con luz ultravioleta regularmente o desinfectarse con alcohol. Al mismo tiempo, se debe colocar un fregadero lleno de agua destilada esterilizada en la incubadora para evitar que la solución de cultivo se evapore y mantener la humedad relativa en la incubadora a 100. ?
(3) Consumibles de cultivo celular: Los recipientes para el cultivo de células pueden ser platos de cultivo, placas de cultivo o frascos de cultivo.
4. ¿Horno (caja de secado)?
Algunos instrumentos y utensilios utilizados para el cultivo celular deben secarse antes de su uso y la cristalería debe esterilizarse con calor seco. Durante la esterilización por calor seco, la temperatura en el horno generalmente supera los 160°C y generalmente se utiliza un alto horno. Sus ventajas son una temperatura uniforme y un mejor efecto, pero su desventaja es que el proceso de calentamiento es lento. Al calentar, no se puede calentar primero y luego soplar el aire. En cambio, el soplo de aire y el aumento de temperatura deben comenzar al mismo tiempo. Cuando la temperatura alcance los 100 °C, el soplo de aire debe detenerse. Se debe tener cuidado para evitar quemar el papel o el algodón que envuelve el recipiente. Los restos quemados pueden afectar el crecimiento celular. No abra la puerta inmediatamente después de la desinfección para evitar un enfriamiento repentino que pueda provocar que la cristalería se rompa. Debe esperar hasta que la temperatura caiga naturalmente por debajo de los 100 °C antes de abrir la puerta.
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5. ¿Dispositivo de purificación de agua?
El cultivo celular tiene altos requisitos en cuanto a la calidad del agua para el cultivo celular, la preparación de líquidos relacionados con el cultivo celular y el agua para limpiar los recipientes de cultivo celular. Debe prepararse con antelación después de un estricto tratamiento de purificación. Actualmente existe una variedad de métodos de purificación que se pueden combinar para purificar agua corriente en agua pura y agua ultrapura. El dispositivo de agua pura es muy flexible y cómodo de usar. Puede montarse en la pared, en el escritorio y estar equipado con un tanque de almacenamiento de agua. , o puede usarse directamente con una pistola dispensadora. También puede equiparse con una función de esterilización de acuerdo con diversos requisitos de agua experimentales, que puede eliminar eficazmente DNasa, RNasa, proteasa, etc. También hay un dispositivo de ultrafiltración de agua pura que puede usarse de manera efectiva. eliminar fuentes de calor y endotoxinas.
6. ¿Refrigerador?
El equipo esencial para los laboratorios de cultivo celular debe ser exclusivo y no debe almacenar sustancias volátiles, inflamables ni otras sustancias nocivas para las células, y debe mantenerse limpio. Generalmente incluyen refrigeradores comunes, refrigeradores de baja temperatura y refrigeradores de temperatura ultrabaja. ?
Refrigerador común: almacena líquido de cultivo, solución salina fisiológica, reactivo de solución de Hanks y otros elementos de cultivo, y puede almacenar muestras de tejido por un corto período de tiempo. ?
Refrigerador de baja temperatura de -20 ℃ y refrigerador de temperatura ultrabaja: se utilizan para almacenar preparaciones que deben congelarse para mantener la actividad biológica y deben almacenarse durante mucho tiempo, como enzimas, suero, etc. ?
7. ¿Almacenamiento por congelación de células?
Los contenedores de nitrógeno líquido comúnmente utilizados en almacenamiento se dividen en diferentes tipos y especificaciones según las necesidades de uso. Hay tres factores a considerar al elegir un recipiente de nitrógeno líquido: volumen, facilidad de uso y cantidad de nitrógeno líquido evaporado. El tamaño de los contenedores de nitrógeno líquido es generalmente de 25 a 500 litros y pueden almacenar entre 250 y 15 000 crioviales de 1 ml. La temperatura más baja del nitrógeno líquido puede alcanzar los -196°C. Se debe tener cuidado para evitar la congelación al usarlo. Dado que el nitrógeno líquido es fácilmente volátil, es necesario prestar atención a la cantidad restante de nitrógeno líquido y reponerlo a tiempo para evitar daños celulares o la muerte debido a una cantidad insuficiente de nitrógeno líquido. Actualmente, existen muchos almacenamientos de congelación de células inteligentes para elegir, que pueden equiparse con almacenamiento de nitrógeno líquido con controladores electrónicos para realizar la automatización del almacenamiento de congelación y pueden monitorear el nivel de nitrógeno líquido y la temperatura de la muestra para garantizar que la temperatura de la muestra esté siempre en la temperatura adecuada; punto de temperatura establecido Se puede configurar un sistema de alarma para configurar alarmas en caso de anomalías en el nivel de nitrógeno líquido, temperatura, batería, voltaje, suministro de energía, etc. también tiene un sistema de derivación de gas caliente para evitar que el aire caliente supere los -130°; C entre en el tanque de nitrógeno líquido, protegiendo así más eficazmente la muestra y evitando que aumente la temperatura en el recipiente. Además, puede elegir un tanque de suministro de nitrógeno líquido para reponer nitrógeno líquido en el tanque de almacenamiento a través de una tubería de conexión para garantizar la seguridad de la muestra. ?
8. ¿Centrífuga?
Durante el cultivo celular, generalmente se usa una centrífuga para preparar la suspensión celular, ajustar la densidad celular, lavar y recolectar las células. Generalmente, una centrífuga de escritorio de 4000 rpm está configurada convencionalmente; si desea realizar la sedimentación celular, debe utilizar una fuerza centrífuga de 80-100 G, porque una fuerza centrífuga excesiva dañará las células. De acuerdo con los diferentes requisitos, existen centrífugas de gran capacidad con temperatura ajustable, centrífugas de alta velocidad, centrífugas refrigeradas de baja temperatura y otras centrífugas con más funciones para elegir.
9. ¿Balanza?
Se utilizan habitualmente la balanza de precisión y la balanza analítica. La precisión de las balanzas analíticas es generalmente de 0,1 mg, 0,01 mg y 0,001 mg. Generalmente, se debe seleccionar una balanza adecuada en función del volumen de muestreo y los requisitos de precisión: para un volumen de muestreo superior a 100 mg, se debe seleccionar una balanza con una precisión de 0,1 mg, para un volumen de muestreo de 100-10 mg, una balanza; se debe seleccionar una balanza con una precisión de 0,001 mg; para un volumen de muestra de 10 mg, se debe seleccionar una balanza con una precisión de 0,001 mg; La balanza debe calibrarse periódicamente. Puede elegir una balanza con función de calibración automática para un mantenimiento conveniente. Al utilizar la balanza, se debe tener cuidado de limpiarla y evitar el contacto directo de polvos y líquidos corrosivos con la plataforma de pesaje. La respuesta viene de