Los métodos existentes generalmente se dividen en tres categorías: (1) métodos basados en la acción de la trombina para formar fibrina; (2) ensayos físicos y químicos y (3) ensayos inmunológicos.
El primer tipo de método es un método de medición funcional. La fibrina formada se puede dividir en método gravimétrico, método colorimétrico con reactivo de fenol, fotometría ultravioleta, método de medición de nitrógeno y método de turbidez y método de tiempo de coagulación de trombina. , etc. La ventaja de este tipo de método es que mide el fibrinógeno, que tiene función de coagulación, también conocido como proteína coagulable, por lo que tiene buena especificidad. El método puede ser simple o complejo. En el uso rutinario, a menudo se utiliza el método más simple de Von Clauss. En algunos países se han utilizado ampliamente kits comerciales diseñados según este método. Según una encuesta CAP de 1975 en Estados Unidos, 1.824 de los 1.939 laboratorios clínicos utilizaron este método, es decir, 94 utilizaron este método, entre los que Tan et al. Uno de esos métodos fue el método colorimétrico del reactivo de fenol modificado por Ratnoff y Menzzie, que se propuso como método de referencia. En los últimos años, muchas publicaciones han recomendado utilizar el método mejorado de Jacobsson como método para determinar el valor estándar de fibrinógeno. La desventaja de este tipo de métodos es que, teóricamente, hay dos aspectos que pueden provocar errores. En primer lugar, lo que se precipita y se mide es fibrina en lugar de fibrinógeno. Se sabe que cuando el fibrinógeno se convierte en fibrina, dos péptidos cortos, a saber, el péptido A (FpA) y el péptido B (FpB), se escinden de las cadenas peptídicas α y β respectivamente. Por tanto, la fibrina en realidad tiene 10 menos masa que el fibrinógeno. En segundo lugar, se sabe que una vez que se forma la fibrina, absorberá algunos factores de coagulación o factores fibrinolíticos, lo que aumentará la cantidad de fibrinógeno medida. Además, cuando se utiliza este método para obtener fibrina y lavar (exprimir) para eliminar otros componentes proteicos, no sólo es problemático sino también difícil ser completamente minucioso, lo que puede causar otra contaminación proteica.
El segundo tipo de método (método de determinación físico y químico) es el más utilizado en nuestro país. Este tipo de método se puede dividir en método de salazón (incluida la salazón con sulfito de sodio, sulfato de amonio o cloruro de sodio, desarrollo de color de proteínas o turbidimetría), método de precipitación por desnaturalización térmica y método de electroforesis. Este tipo de método es relativamente simple y rápido y es especialmente adecuado para pruebas de emergencia. Sin embargo, la desventaja es que la especificidad de este método no es fuerte. Lo que se mide no es fibrinógeno con función de coagulación, sino que puede incluir algunos productos de degradación y/u otras proteínas. El método de electroforesis es demasiado complicado y no adecuado para trabajos rutinarios.
El tercer tipo de método (método inmunológico) consiste en utilizar fibrinógeno puro como antígeno para inmunizar animales para producir anticuerpos policlonales o monoclonales. Luego se determina mediante látex inmune, hemaglutinación pasiva o hemaglutinación inversa, inmunodifusión unidireccional, electroforesis en cohete y ELISA. La ventaja es que la mayoría de los métodos son simples, pero la desventaja es que lo que se mide no sólo es fibrinógeno coagulable, sino que también puede incluir sus productos de degradación (porque tienen el mismo antígeno), y también puede incluir fibrinógeno obstructivo (los disfibrinógenos no son fibrinógeno funcional que no está carboxilado en la posición γ del ácido glutámico N-terminal, también conocida como proteína causada por deficiencia de vitamina K, PIVKA). Pero el inmunoensayo también tiene la ventaja de que puede utilizarse para medir PIVKA. Si el fibrinógeno total de un paciente (medido por inmunología) no es bajo o incluso aumentado, pero el fibrinógeno funcional (es decir, coagulable) se reduce significativamente, se puede juzgar que hay PIVKA presente. Las enfermedades hepáticas, la deficiencia de vitamina K, etc. pueden provocar un aumento de PIVKA, que tiene valor de diagnóstico clínico.