Clasificación y detección de sondas fluorescentes

Las sondas fluorescentes de uso común actualmente incluyen sondas de fluoresceína, sondas fluorescentes de iones inorgánicos, puntos cuánticos fluorescentes, balizas moleculares, etc. Además del análisis cuantitativo de ácidos nucleicos y proteínas, las sondas fluorescentes también se utilizan ampliamente en tinción de ácidos nucleicos, electroforesis de ADN, hibridación de moléculas de ácido nucleico, tecnología de PCR cuantitativa y secuenciación de ADN.

Los métodos actuales para detectar sondas fluorescentes incluyen principalmente mediciones de un solo punto e imágenes de fluorescencia con dispositivos de carga acoplada (CCD) (incluidas imágenes de microscopía de fluorescencia con enfoque láser para análisis de microáreas). Debido al largo tiempo de escaneo del tubo fotomultiplicador y a la alta intensidad de la irradiación láser, es difícil captar los primeros cambios en la fluorescencia. La matriz de imágenes de fluorescencia CCD es grande, el campo de visión de las imágenes es amplio, el tiempo de imágenes es ajustable y el efecto de detección es mejor.

La detección por quimioluminiscencia tiene las características de un equipo simple, fácil operación, rápida velocidad de análisis y alta sensibilidad. El análisis de imágenes por quimioluminiscencia es una combinación de quimioluminiscencia y tecnología de imágenes. Tiene las características de alta resolución, la capacidad de detectar múltiples muestras simultáneamente, un amplio rango de respuesta espectral y alta sensibilidad [10, 11]. Western blots y microorganismos. Detección de señales quimioluminiscentes en chips de matriz. En este experimento, ¿TCPO? ¿Imidazol? ¿H2O2? Sistema de imágenes de quimioluminiscencia con sonda fluorescente. Dado que la quimioluminiscencia no requiere ninguna fuente de luz, no hay interferencia de la detección de fluorescencia ni fondo óptico inevitable durante la obtención de imágenes de fluorescencia, por lo que se puede lograr un límite de detección más bajo. El sistema se utilizó para realizar análisis cuantitativos de cinco sondas fluorescentes y se estudiaron las imágenes de quimioluminiscencia de IgG antihumana de oveja monoclonal marcada con isotiocianato de tetrametilrodamina (TRITC). El límite de detección es de 10 a 11 mol/L, que es un orden de magnitud menor que el de las imágenes de fluorescencia en las mismas condiciones.