Cómo distinguir cinco zonas en el experimento de electroforesis de película de acetato de proteína sérica

Dado que varias proteínas tienen puntos isoeléctricos específicos, si la proteína se coloca en una solución con un valor de pH inferior a su punto isoeléctrico, la proteína se cargará positivamente y se moverá hacia el electrodo negativo. De lo contrario, se mueve hacia el polo positivo. Debido a que la velocidad a la que se mueven las moléculas de proteínas en un campo eléctrico está relacionada con su carga, la forma y el tamaño de las moléculas, la electroforesis se puede utilizar para separar diferentes proteínas.

El suero contiene una variedad de proteínas con puntos isoeléctricos por debajo de pH 7,5. Cuando el suero se somete a electroforesis en un tampón de pH 8,6, todas las proteínas del suero están cargadas negativamente y se moverán hacia el electrodo positivo en el campo eléctrico. Dado que varias proteínas séricas llevan diferentes cargas al mismo pH y tienen diferentes tamaños de partículas moleculares, nadan a diferentes velocidades y se separan mediante electroforesis.

Información ampliada:

Notas:

Los resultados normales del análisis de proteínas séricas mediante electroforesis en película de acetato de celulosa son diferentes a los de la electroforesis en papel, debido principalmente a la alta albúmina. La albúmina humana normal individual sólo supera el 70%. α1, α2 y β, γ son todos bajos, y la γ globulina en algunas personas normales puede ser tan baja como alrededor del 12%. Los valores normales anteriores son sólo de referencia.

La membrana seca teñida por electroforesis se sumergió en una solución de ácido acético glacial: etanol al 95% (2:8) durante 20 minutos. Después de sacarla, la membrana se colocó plana sobre una placa de vidrio. La película se vuelve transparente gradualmente durante el secado. Esta película transparente se puede utilizar para dibujar una curva de electroforesis utilizando un densitómetro de barrido, y el porcentaje de cada componente se puede calcular en función del área de la curva.

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Enciclopedia Baidu - Electroforesis de película fina de acetato de celulosa