Análisis sistemático de los componentes químicos del género Rubus. Las investigaciones comenzaron a finales de los años 1970 y principios de los 1980. Los químicos nacionales y extranjeros han estudiado la composición química de más de 20 especies de plantas de Rubus y han obtenido más de 50 nuevos compuestos, la mayoría de los cuales son triterpenos (glucósidos) y diterpenos (glucósidos). Los diterpenos y triterpenoides se consideran componentes característicos de la planta. Plantas de Rubus. Sin embargo, todavía hay muchas deficiencias en la investigación sobre los componentes químicos de las frambuesas, por lo que las separamos sistemáticamente y obtuvimos 4 compuestos, a saber (3-sitosterol (1), caroteno (1) y tilo (11658).
1 Instrumentos y materiales
BrukerAM-400 y BiukerDRX-500 para RMN utilizando TMS como estándar interno; VGAutospec-3000 para MS; espectrómetro UV externo UV757CRT El instrumento es un XRC-1; instrumento de punto de fusión del microscopio y el termómetro no está calibrado. Es producido por la fábrica Yike de la Universidad de Sichuan. El gel de sílice de capa fina y el gel de sílice para cromatografía en columna son producidos por la fábrica química del océano de Qingdao. comprados en el mercado de la ciudad de Anguo, provincia de Anhui, en 2003, y fueron identificados por el profesor asociado Fang Chengwu del Departamento de Medicina Tradicional China de la Facultad de Medicina Tradicional China de Anhui
2 Extracción y separación
Se trituraron 48 kg de frambuesas con 80 ml de extracción con % de etanol, el etanol recuperado no tiene olor a alcohol, se filtró y se separó. Se secó una columna de gel de sílice, se eluyó con un gradiente de CHCl3-MeOH en secuencia y se recogió el eluyente, una fracción por 100 ml. En la fracción CHCVMeOH (8:1), se concentró la fracción 5 y se dejó aislar cristales en forma de aguja blancos. Se separó la fracción ghq 3-MeOH (5:1), fracción 17. Se realizó una cromatografía en columna de gel de sílice repetida para obtener el compuesto Li (20 mg); el filtrado se pasó a través de una columna de resina D101 y se eluyó con H2O y etanol de diferentes concentraciones; Se usaron 1000 ml como primera fracción y se combinaron 293031 fracciones y se eluyeron con etanol al 60 % parcialmente concentrado para obtener 14 g de extracto. Se mezcló el gel de sílice y se separó a través de una columna seca. -1:1) elución en gradiente y finalmente lavar con metanol puro. Recoger el eluyente y usar 100 ml como flujo. Eluir con CHOA-MeOH (5:1), combinar las fracciones 26-28 y concentrar, extraer con acetato de etilo para obtener. Se mezclan 108 g de extracto con gel de sílice, se secan y se separan, y se usa CHO 3. Se eluye con Me0h (20:1-1:1) y finalmente se lava con metanol puro. Se recogen las fracciones 111-180 cada 100 veces y se concentran. se obtienen 700 mg de sólido, que se separa mediante columna seca de gel de sílice se eluye con acetato de etilo-acetona-H2O-ácido acético (5:1:0,5:02) para obtener el compuesto iV (45 mg). 3 Identificación
3.1 El compuesto 1 es una aguja incolora como cristal (CHCljEtOAC), MP 136 ~ 138 La reacción de Qliebeimanri-burdiard es positiva, EI-MSm/z (%): 414(81), 381( 45)329(75), 303(64), 255(71), 213(95), 145(100)55(54) y
3.2 El compuesto U es un polvo amorfo blanco (metanol). MP 285 ~ 287°C, reacción de Liebermariri-Burchard positiva, EI-MSM/Z(%)414(m-GLC)(7)396(100), 382 (65440). 145(60), 121(46) y 69(73) se hidrolizaron según el método habitual. Después del desarrollo de TLC, los valores de Rf de aglicón y azúcar fueron consistentes con los de los estándares de sitosterol y glucosa adjuntos, respectivamente, y fueron consistentes con los valores de la literatura, es decir, el compuesto 1.
3.3 El polvo amarillo del compuesto HI (metanol), MP 214 ~ 216 C, el polvo de clorhidrato de magnesio y Molex mostraron reacciones positivas y mostraron fluorescencia amarilla bajo luz ultravioleta. UVXnm:348266 es la absorción UV típica de los flavonoides. La hidrólisis ácida y el examen TLC mostraron la presencia de glucosa en comparación con la sustancia de referencia. La comparación de cis-R, C-NMR y la literatura mostró la presencia de kaempferol en 13'4| y en el espectro 'H-NMR hay un Conjunto de sistemas de acoplamiento AB. 7,31 (1H, DJ = 15,9 hz) 6,11 (1H, d, J = 15,9 hz) a2 2 juegos del sistema B2; 7,98 (2H, dJ = 8,8 Hz) 685 (2H, dJ = 8,8 Hz) 7,36 (2H, ( iJ =8.6Hz), 6.78(2H, (iJ=8.6Hz) y el sistema de elemento acoplado: 637(1H, DJ = 637. DJ = 1.7 Hz) tiene grupos con los mismos cambios químicos en el espectro L3C-NMR. Señal: 115.0(X2), 13Q0(X2),
(X2) está relacionada con la señal basada en éster S166.1, extensión HSQC 11 (1h, DJ = 8″) y expresión HMBC A5. .11C65438 .7.31C1H, dJ=15.6Hz) y 11(07÷1660(09÷65436) Hay un fragmento de 147 en E-MS, es decir, 17 combinado con 1H-NMR y I3C-NMR demuestra aún más la presencia de ácido p-hidroxicinámico en la molécula, 286 es la aglicona, 121 es el fragmento del anillo A, 65438. La señal del azúcar en este compuesto es 00...74...76...70...74,1, 62.9, vale la pena señalar que 00.6 (5.44, 1 HDJ = 7.3 Hz) se muestra (glucosa 3D) según HMBC, 5.44 (1 HDJ = 7.1 Hz) está relacionado con 133 (C-3), lo que indica que la glucosa está conectada a la posición C-3 como se ve en el espectro HBMC, 1660 cc-9″-9″) está relacionado con el d-C metileno 4,02 (1H, dJ=12,0Hz) y 426C1H, dJ=12,0Hz) del azúcar, mientras que otros están en la literatura anterior [1301 pertenece a C-2, 6! Y 1308 está clasificado como C2<6>. Pero combinado con 1H, W-COSY y HMBC y HSQG en 2D~NMR, tenemos motivos para clasificarlo. 130,1 como C2<6> 65438. La atribución de datos se muestra en la Tabla 1H-HMR, 13 NMR y HMBC.
3.4 Compuesto IV en polvo amarillo (metanol) PF 171 ~ 173 C, el polvo de clorhidrato de magnesio reacciona positivamente. con Molex bajo luz UV, UVXim:348266 es la absorción UV típica de la hidrólisis ácida, mediante examen de cromatografía en capa fina, en comparación con el control, que muestra la comparación de 1h-NMR y 13C-NMR con el compuesto 1. Indicando la presencia de kaempferol, hay un grupo de sistemas A2B2 7,97 (2 HDJ = 8,7 Hz), 6,87 (2 HDJ = 8,7 Hz) y sistemas de acoplamiento elemental en el espectro 1H-NMR 639 (1H, dJ = 1,7 Hz); , 6,19 (1H, dJ=1,7Hz) BC-NMR (DEPT) muestra que la señal del azúcar en este compuesto es 01,3 (5). 669 y s 10q 7 (4.351 hdj = 1.2Hz) 70.3, 70.671.868.2, 17.7, pertenecen respectivamente a la sustitución de 6 posiciones (glucosa 3-D y a-L-). 1,2 Hz) está relacionado con 66,9 (C-6), lo que indica que la ramnosa está conectada a la posición C-6 de la glucosa en una configuración, y está relacionada con 1,3 (5,301 HDJ = 7,5 Hz) y 133,2 (C-3). Se puede inferir que el compuesto W es: kaempferol-3-13-D(RHA)-GL ccv)1 hmr, 13C-NMR y HMBC. Las asignaciones de datos del compuesto W(DMSO)H-HMR y 65438+ se muestran en la Tabla 2.
4 Discusión
4.1 En la literatura anterior, C2 y 6 se clasificaron como 1301, mientras que 1308 se clasificó como C2<6> pero se combinó con 2 & en RMN, en 1 h" HCOSY , HMBC y HSQC, tenemos razones para atribuir 130.8 a C2, 6', 130.65438
4.2 La quercetina y el kaempferol son los principales flavonoles en las plantas de Rubus, y la posición de los glucósidos La mayoría de ellos están en el "-3 " posición, y los monoglucósidos, diglicósidos y triglicósidos son todos 17], pero no se ha informado del compuesto IV en esta especie.