El método de cálculo del tablero de conteo de células sanguíneas (biología de secundaria) es el siguiente:
La escala de la cámara de conteo generalmente tiene dos especificaciones. Una es un cuadrado grande dividido en 16. cuadrados medianos se divide en 25 cuadrados pequeños, con un máximo de 400 cuadrados pequeños, la otra es que un cuadrado grande se divide en 25 cuadrados medianos, y cada cuadrado mediano se divide en 16 cuadrados pequeños, el número total es. También 400 células.
Estamos contando el número de celdas en cada cuadrícula pequeña. Para calcular el número de celdas en una cuadrícula grande, hay 400 cuadrículas pequeñas en una cuadrícula grande, por lo que debemos multiplicar por 400.
La longitud del lado de cada cuadrado grande es 1㎜, por lo que el área de cada cuadrado grande es 1㎜2. Una vez cubierto el cubreobjetos, la altura entre el portaobjetos y el cubreobjetos es 0,1. ㎜, por lo que el volumen de la cámara de recuento es 0,1㎜3. El método de cálculo es el siguiente:
1. Fórmula de cálculo para placa de conteo de 16×25:
Número de celdas ml = (número de celdas en 100 celdas 100) × 400 × 1000 × dilución Múltiplos
2. Fórmula de cálculo para placa de recuento de 25×16:
Número de células ml= (número de células en 80 celdas 80)×400×1000×factor de dilución
Método de operación:
1. Dependiendo de la concentración de la suspensión bacteriana que se va a analizar, agregue agua esterilizada para diluirla adecuadamente (la pendiente generalmente se diluye 100 veces) y la cantidad de bacterias por rejilla pequeña se puede contar como el grado.
2． Tome un hemocitómetro limpio y cubra el área de conteo con un cubreobjetos.
3. Agite bien la suspensión bacteriana, use un gotero para absorber una pequeña cantidad y deje caer una pequeña gota (no demasiada) de las ranuras a ambos lados de la plataforma central de la placa de conteo a lo largo del borde inferior del cubreobjetos para permitir la suspensión bacteriana para utilizar la superficie del líquido. Llene el área de conteo con tensión para evitar que se generen burbujas y use papel absorbente para absorber el exceso de suspensión bacteriana que fluye fuera de la ranura.
También puedes dejar caer la suspensión bacteriana directamente sobre el área de conteo (no dejes que las plataformas a ambos lados del área de conteo se manchen con la suspensión bacteriana para evitar aumentar la profundidad del área de conteo después de agregar una cubreobjetos). Luego agregue un cubreobjetos (no cree burbujas de aire).
4. Déjelo reposar por un tiempo para permitir que las células se asienten en la placa de recuento y ya no se desplacen con el líquido. Coloque el hemocitómetro en la platina del microscopio y sujételo firmemente. Primero busque el área de conteo bajo un microscopio de baja potencia, luego cambie a un microscopio de alta potencia para observar y contar. Dado que el índice de refracción de las células vivas es similar al del agua, se debe reducir la intensidad de la luz durante la observación.
5. Al contar, si el área de conteo se compone de 16 cuadrados medianos, cuente el número de bacterias en los cuadrados centrales superior izquierdo, inferior izquierdo, superior derecho e inferior derecho (es decir, 100 cuadrados pequeños) según la dirección diagonal. Si se trata de un área de conteo compuesta por 25 cuadrados centrales, además de contar los cuatro cuadrados centrales anteriores, también es necesario contar el número de bacterias en el cuadrado central (es decir, 80 cuadrados pequeños).
6. En el caso de la levadura en ciernes, cuando la yema alcanza la mitad del tamaño de la célula madre, se puede contar como dos células. Cuente cada muestra repetidamente 2-3 veces (los valores no deben diferir demasiado cada vez; de lo contrario, se debe repetir la operación) y calcule el número de células por ml (g) de suspensión bacteriana según la fórmula.
7． Una vez completada la medición, retire el cubreobjetos y enjuague el hemocitómetro con agua. No frote ni limpie con objetos duros para evitar dañar la escala de la rejilla. Después del lavado, séquelo usted mismo o séquelo con un secador de pelo y guárdelo en una caja.